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$ II, — Etude microscopique et chimique des selles. 19 EXAMEN MICROSCOPIQUE

Procédé simple. — Hallion, dans la Nouvelle pratique médico-chirurgicale (1), indique la manière suivante d'examiner les selles des nourrissons, en trois préparations :

1° On dilue une parcelle de matière fécale dans de l'eau. Ce liquide de dilution porté sur la lamelle du microscope permet de reconnaître à l’état normal : a) les résidus cellulosiques, des débris de céréales; b) des savons sous forme de corpuscules plus ou moins arrondis ou irréguliers, amorphes, tantôt d’un jaune plus ou moins foncé (savon de chaux), tantôt incolores à l’état pathologique ; c) des débris de tissus divers, grains de fécule, des gouttes de graisse neutre, des acides gras et des savons en nombreux petits cristaux

2° Une seconde préparation est additionnée d’une goutte d'acide acétique et chauffée jusqu'a l’ébullition, pour fondre tous les résidus de matières grasses. Les acides gras,’ résultant en partie de la décomposition des savons par ce réactif, cristallisent par refroidissement.

A l’état normal, quand on vient de les chauffer, les résidus des matières grasses y sont à l’état de fusion. On obtient ainsi une notion sommaire sur la totalité des graisses, les savons ont disparu et leurs acides gras se sont libérés ; après refroidissement, les acides gras cristallisent. Des selles pathologiques permettent d'y découvrir des amas d'acides gras en abondance excessive.

(1) Page 609,

30 Une troisième préparation est faite avec addition d’une solution iodée forte (iode, 1 gr. ; Ki, 2 gr. ; eau distillée, 50 gr.), qui colorera l’amidon et certains organismes en bleu.

Procédés à l’aide de divers réactifs. — On ajoute à la préparation microscopique une goutte des divers réactifs spéciaux, suivants :

Chloruré de sodium en solution à 0,6 0/0 ; Glycérine qui a la propriété de rendre transparents certains objets (Lynch) ; Alcool, éther, chloroforme ; Acide acétique à 800/0 ; Acide chlorhydrique de 3 à 5 0/0; Acide sulfurique ; Solution d’ammoniaque et solution de potasse à 10 et 15 0/0 ; Réactif de Millon ; Acide osmique 1 0/0 ; Solution alcoolique du Soudan IT ; Solution légère d’éosine aqueuse ; bleu de méthylène ; bleu de safran.

Selon la matière présumée des selles, l'opérateur se servira de l’un ou l’autre de ces réactifs. Schmidt donne le conseil de faire deux préparations, l’une à Pacide acétique, l’autre à la solution de Lugol, quand l'enfant reçoit des hydrocarbones.

1° Recherches des graisses pour les réactions micro-chimiques.

A. Les graisses neutres. — Déjà la simple pression de la lamelle sur la lame permet de déceler des formations irrégulières qui ressemblent au dessin de la mer sur une carte géographique. Chauffées, elles se résolvent en gouttelettes qui par refroidissement se transforment en couches irrégulières et opaques. L’acide osmique (après adjonction d’alcool qui réduit la palmitine et la stéarine), les colore en brun noir. La solution alcaline de Soudan IT les colore

en rouge, Elles sont insolubles dans l’eau, la potasse et l'alcool à froid ; sont solubles dans l'alcool à chaud, l’éther, le chloroforme, la benzine.

B. Les acides gras, à un faible grossissement sont reconnaissables à leur coloration d’un gris blanc. Mais on pourrait les confondre avec les graisses neutres. Il faut les étudier par les réactions micro-chimiques. A part les cristaux de graisse et les acides gras en aiguilles qui ne prennent pas la coloration, les acides gras comme les graisses neutres sont aussi colorés en brun noir par l’acide osmique à 1 0/0 et en rouge avec le Soudan III. Mais ils sont soiubles dans l'éther et dans l'alcool à froid contrairement à ce qui se passe avec les graisses neutres).

C. — Les savons ne se dissolvent que si on ajoute un acide. Les gouttelettes se produisent ; elles deviennent compactes par refroidissement. Si les savons se trouvent dans une solution alcaline, ils sont facilement solubles dans l'alcool et dans l’eau châäude. Contrairement à ce que l’on observe pour les graisses neutres et les acides gras, les savons ne sont pas colorés par lacide osmique etle Soudan. Des acides ajoutés à la préparation permettent de voir la transformation des masses de savons en aiguilles d'acides gras (Raubnitz) (1) et même dans le cas de savons de chaux et magnésie l'acide sulfurique permet de voir des cristaux de plâtre.

Le Réacrir pe JAcOBsON permet de différencier facile ment les variétés de graisse On le prépare de Ja façon suivante : on verse 4 à 5 gouttes de Ziehl dans un tube à essai, plein d'eau distillée ; on obtient un liquide rose

(1) Prag, med. Woch, 1892 n° 1,

Ne

foncé. Il suffit alors d'ajouter une à deux gouttes de ce liquide à la préparation des fèces, de recouvrir le tout d’une lamelle et d'examiner. Voici ce que l'on observe : Les graisses neutres ne se colorent pas du tout, elles apparaîtront donc comme des gouttelettes incolores ou jaunes. Les savons insolubles prennent un peu le Jacohson et seront rose pâle. Les acides gras, au contraire, se colorent avec élection et auront une helle coloration rose franc,

2° Recherche de la caséine.

Au microscope les amas de caséine se montrent comme des masses blanchätres, crevassées, irrégulières, offrant les réactions micro-chimiques des albuminoïdes, et nette— ment distinctes de celles des amas de graisse. Ils se dissolvent par ébullition avec l’acide chlorhydrique à 5 0/0, ou avec la soude.

Le RÉACTIF DE MILLON permet de les déceler par la coloration rouge qu’il leur imprime ; de même les faibles solutions d’éosine les colorent.

On peut utiliser pour la recherche de la caséine la MÉTHODE si simple de Lixer : On étale sur une lame une petite quantité de matières, préalablement délayées dans Peau, et on laisse sécher d’abord spontanément, puis ensuite en agitant la préparation afind’activer la dessiccation. On fixe par la chaleur, tont comme une préparation de crachats, et on colore par le mélange suivant :

Solution aqueuse à 0,75 0/0 de fuchsine acide : une partie ; solution alcoolique à 0,50 0/0 de vert de méthyle : une partie ; eau distillée : vingt parties.

2 Re

On laisse en contact 15 minutes, puis on place la préparation dans l’eau distillée, une heure au moins, sans laver. La caséine apparaîtra sur la préparation, colorée en violet ou en bleu pâle.

3° Recherche du mucus.

D’après Gaultier à l'examen microscopique, on voit que le mucus est formé d’une substance homogène, granuleuse ou diversement striée ; striation qui s’accentue davantage quand on traite la préparation par l’acide acétique, qui la montre comme formée de lamelles blanchâtres, opalines, s’entrecroisant, s’enchevéêtrant pour former un résau de mailles plus ou moins serrées (où se montrent dans les états pathologiques des cellules épithéliales, des globules de pus, des globules rouges de sang, des bacilles, des globules d’air, toutes sortes de débris alimentaires, des détritus, des cristaux).

Les couleurs, telles que l’éosine, la safranine, le picrocarmin, l’hématoxyline colorent les éléments contenus, suivant leurs affinités particulières, tandis que lui-même apparaît comme une substance gris jaunâtre, plus ou moins incolore. Le triacide d’'Ehrlich colore le mucus en vert, tandis que les autres parties prennent une teinte rougeâtre.

4 Recherche de l’amidon.

Pour connaître les grains d’amidon on se servira du RÉACTIF DE LUGOL (iode À gr. ; iodure de potassium 2 gr. , eau 60 gr.) qui colore les grains d’amidon en bleu ou en violet foncé.

ENED-eE

Ajoutons pour être complet que des granulations de bilirubine sont mises en évidence au microscope par la méthode de Triboulet.

On peut voir des leucocytes, des éléments épithéliaux, des muqueuses de la bouche et de l’anus et des cellules de l’épiderme du mamelon.

Les cellules végétales ont leur paroi colorée en rouge par le RÉACTIF DE HECHT (qui est un mélange par parties égales d’une solution aqueuse à 1 0/0 de neutralroth et d’une solution aqueuse à 2 0/0 de vert brillant.