SUCRE DANS L’URINE NORMALE

» L’autre forme est très-rare; j’en ai traité dans mon Annuaire de 185G : elle est caractérisée par l’augmentation considérable dans la quantité d’urée excrétée dans les vingt-quatre heures. » (Voyez la note VIII.)

NOTE V

Reelicrchc du sucre dans l’urine normale. — D’après Brucke, on précipite l’urine (de 1000 à 5000 centimètres cubes) d’abord avec une solution concentrée d’acétate neutre de plomb, on filtre, on ajoute au liquide fi 1 1 ré de l’acétate de plomb basique tant qu’il se produit un précipité, onfdtre de nouveau et enfin on précipite avec de l’ammoniaque. On rassemble le dernier précipité sur un filtre, on le lave avec de l’eau et enfin on le laisse sécher entre des couches épaisses de papier buvard, que l’on renouvelle de temps en temps.

Dans un mortier on triture grossièrement le gâteau réduit en petits fragments, d’abord avec de l’eau distillée, puis on ajoute, en triturant toujours, une solution concentrée d’acide oxalique, jusqu’à ce qu’un échantillon filtré ne soit plus troublé par une nouvelle addition d’acide oxalique. On sature le liquide filtré avec du carbonate de chaux finement pulvérisé, on filtre de nouveau, on acidifie faiblement avec de l’acide acétique, on évapore à sec et l’on dissout le résidu dans un peu d’eau. Avec cette dissolution Bruche effectue les réactions ordinaires, ainsi que l’expérience de la fermentation. — Bence Jones ne décompose pas le précipité de plomb par l’acide oxalique, comme le fait Bruche; il procède plus simplement en le traitant par l’acide sulfhydrique, après l’avoir suspendu dans l’eau. Bence Jones trouva, à l’aide de cette méthode, dans plusieurs urines normales (1000 à 5000 centimètres cubes) des quantités de sucre qui méritent d’être signalées (10 à 15 cenligr. dans 1000 centimètres cubes d’urine).

On mélange l’urine avec une quantité d’alcool concentré telle, que le liquide renferme à peu près les 5/5 de son volume d’alcool absolu. Il est convenable de prendre 200 centimètres cubes d’urine et de les mélanger avec 800 ou 1000 centimètres cubes d’alcool à 95 pour 100. Une fois le mélange opéré, on attend quelque temps afin que le précipité formé ait eu le temps de se déposer, et ensuite on filtre dans un gobelet île verre. Maintenant on ajoute goutte à goutte au liquide filtré en ayant soin d’agiter continuellement une solution alcoolique de potasse, jusqu’à ce que le mélange ait au papier de tournesol une réaction alcaline faible, mais évidente. On abandonne ensuite à la cave pendant vingt-quatre heures le gobelet de verre bien couvert. Le lendemain on décante le liquide avec précaution, on renverse le gobelet de verre sur du papier à filtrer, afin que celui-ci absorbe le reste du liquide, et on laisse au contact de l’air jusqu’à ce qu’il n’y ait plus aucune odeur d’alcool. En même temps on remarque que le fond et aussi une partie des parois du vase sont recouverts d’un dépôt cristallin, que l’on dissout dans aussi peu d’eau que possible, et l’on soumet cette dissolution aux réactions indiquées. — Mais comme dans certaines circonstances de l’acide urique peut passer dans ce précipité cristallin, il est dans tous les cas convenable d’acidifier la solution aqueuse concentrée de ce dernier avec de l’acide chlorhydrique et de laisser reposer pendant vingt-quatre heures, afin que l’acide urique qui peut s’y trouver puisse se séparer. Ensuite on se servira du liquide filtré neutralisé pour l’essayer avec la solution de cuivre, le sousnitrate de bismuth et la potasse, et, si c’est possible, pour le soumettre à l’épreuve delà fermentation.

Bodecker précipite d’abord par l’acide tartrique la potasse de la solution aqueuse concentrée du dépôt cristallin, dans le liquide filtré il enlèvel’excès d’acide avec du carbonate de chaux avec lequel il laisse le liquide en contact pendant quelque temps, il filtre bour séparer le tartrate de chaux et ’e carbonate de la même base ajouté en excès, t il essaye la solution ainsi obtenue avec la dissolution de cuivre, le sous-nitrate de jismulh et la potasse.

NOTE VI

Détermination quantitative de la glycose. — Pour doser la glycose contenue dans les urines on a habituellement recours à la liqueur cupro-potassique ou à l’appareil de polarisation. J’emploie une méthode beaucoup plus rapide (détermination parl'uromètre), mais qui donne des résultats moins précis que les deux précédentes.

Essai par la liqueur cupro-potassique. Réactif de Tromherz, de Barreswill, de Fehling. — Quevenne et M. Mayet ont publié de bonnes notices sur le réactif cupropotassique, ils donnent la préférence à la liqueur de Fehling qui est plus stable. J’emprunte à la notice de M. Mayet les détails des manipulations.

La liqueur de Fehling est composée de sulfate de cuivre, de tartrate neutre de potasse et de potasse caustique.

Son emploi est fondé sur la propriété que possède la glycose de réduire les sels de cuivre en présence de la potasse en excès, en donnant lieu à un précipité rouge de protoxyde de cuivre.

Comme la réduction se poursuit, si la quantité de glycose est suffisante jusqu’à la disparition complète du sel de cuivre en dissolution et que la décoloration de la liqueur bleue est la conséquence de cette réaction, il en résulte un moyen aussi exact que facile pour reconnaître la quantité de glycose contenue dans un liquide sucré.

La boîte que M. Mayet a fait établir contient :

A Un flacon de réactif de Fehling; B Un flacon vide gradué à 50 et 100 grammes; C Une lampe à esprit-de-vin ; D Une burette graduée par dixièmes de centimètre cubes; E Une pipette graduée (1) de la contenance de 10 cent, cubes; FF Deux tubes fermés; G Un ilacon de pastilles de potasse caustique; H Un ballon; I Une pince en bois; J Un support pour le ballon.

Analyse quantitative d’une urine diabétique. — On aura soin de puiser l’urine dans un vase où seront réunies toutes celles qui auront été rendues pendant les vingtquatre heures.

Dans le ballon H mettez, au moyen de la pipette graduée E, 10 centimètres cubes de liqueur de Fehling, c’est-à-dire la quantité que contient la pipette jusqu’au trait marqué 10 cc. La pipette ayant été remplacée par l’éprouvette graduée, il suffit de verser la liqueur de Fehling jusqu’au trait indicateur.

Vous ajouterez dans cette liqueur une pastille de potasse caustique; puis, saisissant de la main gauche avec la pince I le col du ballon, vous porterez le vase sur la flamme de la lampe à esprit-de-vin. Au moment où le liquide entrera en ébullition, vous y laisserez tomber goutte à goutte l’urine à analyser placée dans la burette, que vous tiendrez de la main droite, l’index appuyé sur l’orifice supérieur, et que vous aurez préalablement remplie jusqu’à l’affleurement du chiffre 0. En soulevant légèrement le doigt, l’urine s’écoulera goutte à goutte à mesure qu’une petite quantité d’air rentrera dans la

Si l’urine est peu chargée de sucre, il se produira seulement, au bout de quelques minutes d’ébullition, un trouble verdâtre, puis jaune. On continue l’ébullition en agitant de temps en temps pour éviter les soubresauts, et en tenant le col du ballon incliné

burette.

de lx 5° du côté opposé à la figure de l’opérateur. Le précipité passera bientôt au brun rouge eu môme temps qu’il prendra de la cohésion et se déposera plus facilement. Vous le laisserez alors se séparer en plaçant le ballon sur son support.

(1) Pour plus de commodité et pouréviter l’inconvénient du caoutchouc vulcanisé, la pipette I a été remplacée par une éprouvette graduée de 10ce.

GLYCOSE. DÉTERMINATION QUANTITATIVE.

Lorsque la séparation du liquide et du dépôt sera accomplie, vous examinerez la liqueur surnageante en plaçant le ballon entre l’œil et la lumière, regardant de haut en bas audessus d’une feuille de papier blanc. Si la liqueur est encore bleue, vous continuerez d’ajouter de l’urine, en notant avec soin le nombre de degrés indiqué sur l’échelle qu’il vous aura fallu employer, et vous continuerez ainsi jusqu’à la décoloration à peu prés complète du réactif de Felding, c’est-à-dire jusqu’au moment où le liquide ne présente plus qu’une teinte bleue ou verte très-légère , indice nécessaire pour être assuré que le point de saturation n’est pas dépassé. Le nombre de degrés ou de centimètres cubes employés vous indiquera, d’après le tableau ci-dessous, la quantité de sucre contenue dans l’urine que vous analyserez.

Supposons par exemple que, pour arriver à la décoloration du réactif de Fehling, il vous ait fallu employer 50 divisions ou h centimètres cubes : Sn lisant sur le tableau le chiffre qui se trouve en regard du nombre à, vous trouverez que l’urine que vous analysez contient 12 grammes 50 centigrammes de glycose.

TABLEAU INDIQUANT LES QUANTITÉS DE GLYCOSE CONTENUES DANS LES URINES ESSAYÉES AVEC LA LIQUEUR TITRÉE DE FEHLING.

Quantité de

Centimètres

Quantité

Quantité de

Centimètres

Quantité

liqueur titrée

cubes d’urine

de glycose

liqueur titrée

cubes d’urine

de glycose

employée

nécessaires

contenue

employée

nécessaires

contenue

pour !

pour opérer la

•dans un litre

pour

pour opérer la

dans un litre

l'expérience.

décoloration.

d’urine.

l’expérience.

décoloration.

d’urine.

grammes.

(fl

Il convient ici de faire une observation. Tant que l’urine à analyser ne contient pas

IN OTE VI

au delà de 30 à ùO grammes de sucre, on peut la soumettre directement à l’analyse; mais si, par quelques indications précédentes, on a lieu de suppnser qu’elle doive contenir au delà de cette quantité, il faut avoir la précaution de l’étendre d’un volume d’eau égal au sien. C’est ce qu’il est facile de faire au moyen du flacon gradué B. On verse de l’urine jusqu’au trait marqué 50 gr., puis de l’eau jusqu’au trait marqué 100 gr. On obtient ainsi une urine qui convient mieux à l’analyse, parce que, lorsque l’urine est trop chargée de sucre, la décoloration de la liqueur arrive si promptement qu’on a peine à s’assurer que le point de saturation n’est pas dépassé. Mais on comprend que pour avoir un résultat exact il faut doubler le chiffre du sucre trouvé.

On peut voir d’après ce tableau que c’est le titre de la liqueur de Fehling qui sert à déterminer la quantité de sucre contenue dans l’urine. En effet, cette liqueur est titrée de manière que, pour en décolorer complètement 10 centimètres cubes, il faut exactement 5 centigrammes de glycose ou une quantité de liquide contenant en dissolution 5 centigrammes de cette substance ; de sorte (pie, quel que soit le nombre de centimètres cubes d’urine employés pour arriver à la décoloration de la liqueur, on sait que cette quanlilé contient invariablement 5 centigrammes de glycose. Or il suffit d’une simple règle de proportion pour connaître la quantité de sucre contenue dans 1 litre ou 1000 cenlim. cubes d’urine. Supposons que A représente le nombre de centimètres cubes de liquide qu’il a fallu employer : ce nombre A contient évidemment 5 centig. de sucre. Par conséquent, si A contient 5 centigrammes 1 litre ou 1000 cenlim. cubes en contiendront x; d’où résulte la règle de proportion suivante :

A : 0,05 : : 1000 : x ou x =

On obtient donc le poids de la glycose contenue dans un litre d’urine en divisant 50 par le nombre A.

Faisons l’application de cette règle à l’exemple qui nous a servi à composer le tableau. Nous avons supposé qu’il avait fallu employer AO divisions ou k degrés de l’échelle représentant k cc. d'urine, puisque chaque degré correspond à 1 centim. cube. Par conséquent ce nombre h vient prendre la place de A dans la règle de proportion que nous

avons posée ; de sorte que — = 12 gr. 50 c.

La même règle s’appliquerait de la même manière à toutes les divisions de la burette. Le tableau a été fait d’après ces données, afin d’éviter la répétition des calculs et d’abréger les opérations.

Formule pour trouver le poids absolu du sucre de diabète pur qui est contenu dans UN litre de l’urine observée. — D’après les expériences de M. Biot sur le sucre de diabète pur, si l’on observe une urine diabétique dans un tube dont la longueur totale actuelle en millimètres soit l, et que la déviation mesurée à l’œil nu pour la teinte extraordinaire bleu violacée, qui précède immédiatement le rouge jaunâtre soit «, le poids absolu du sucre contenu dans un litre de cette urine sera en grammes :

Si la longueur du tube est moindre que 350 millimètres, et que les couleurs bleues et jaunâtres soient très- apparentes, à cause du peu de coloration de la liqueur, cette évaluation sera plutôt trop forte que trop faible; si au contraire l surpasse 350 millimètres, ou si l’urine est assez fortement colorée pour que les couleurs diffèrent peu entre elles avant et après le point de passage, l’évaluation sera plutôt faible que trop forte. Dans tous les cas, l’incertitude aura très-peu d’importance, surtout pour le diagnostic. Elle dépend de la différence que la coloration plus ou moins intense apporte dans la détermination du point de passage, où l’on mesure la déviation

GLYCOSE. — DÉTERMINATION QUANTITATIVE.

quand on l’observe à l’œil nu; on la ferait disparaître, en l’observant toujours à travers un verre rouge, ce qui rend les déviations exactement comparables entre elles; mais cela rend ici les observations beaucoup plus pénibles sans utilité bien réelle.

Voici maintenant deux exemples qui montrent l’application de la formule :

On a observé une urine diabétique dans un tube dont la longueur totale l était 500 millimètres, et l’on a trouvé une déviation a égale à 15 degrés. Multipliant d’abord *2353,6 par 15, on a pour produit 35305, qui, étant divisé par 500, donne pour quotient 70,608 gr. C’est le poids du sucre de diabète contenu dans chaque litre de l’urine observée, et l’évaluation est plutôt trop faible que trop forte ;

2° Le tube d’observation avait pour longueur 357 millimètres, la déviation observée « était 10°, 907, l'urine était très-colorée à travers celte épaisseur.

En multipliant 2353,6 par 10,967 on a pour produit 25870,5, en négligeant après a multiplication les décimales ultérieures aux dixièmes; maintenant ce nombre 25870,5 'tant divisé par 357, donne pour quotient 71,673 gr. : c’est le poids du sucre de diabète contenu dans chaque litre de celte urine, et l’évaluation est plutôt trop faible que trop forte, parce que l’urine observée paraissait très-colorée dans le tube d’observation.

Ces calculs de multiplication et de division se font en un moment par les tables de logarithmes.

Quand l’urine est très-colorée, l’image extraordinaire reste insensible à l’œil pendant jne certaine amplitude de course du prisme biréfringent. On détermine alors les limites le sa disparition et de sa réapparition par un certain nombre d’observations succes- -ives; la moyenne arithmétique entre les extrêmes est la vraie mesure a \ c’est ainsi ]ue dans le second exemple on a obtenu les fractions de degrés de la déviation.

Sacciiaiu mgtre. — On emploie plus généralement aujourd’hui le saccharimèlre

Fig. 1 et 2.

e Soleil pour déterminer la quantité de glycose contenue dans les urines. 11 consiste ig. 1 et 2) en un tube T de 20 centimètres de longueur, que l’on intercale sur le

NOTE VI

trajet d’un rayon polarisé, entre le polariseur et l'analyseur. Le plan de polarisation est dévié et l’angle de déviation est apprécié au moyen d’un quartz compensateur. Ayant l’angle de déviation, les tables de Clerget donnent la quantité de sucre.

L’opération, on le voit, est très-simple. Il suffit d’avoir une quantité de liquide suffisante pour remplir le tube polarimétrique. Le compensateur a été préalablement disposé au zéro. On interpose le tube et l’on fait mouvoir la vis micrométrique du compensateur, de façon à revenir à la teinte sensible.

Mais il y a plusieurs inconvénients qui se présentent ici et qui exigent des manœuvres nouvelles.

11 faut d’abord que le liquide urinaire soit préalablement décoloré et transparent. On obtenait autrefois ce résultat en traitant ce liquide par l’acétate neutre de plomb, qui précipitait entre autres substances celles qui colorent l’urine. Le sucre reste en dissolution. Il faut ensuite le débarrasser de l’excès de plomb. L’hydrogène sulfuré ou l’acide sulfurique le précipitent.

M. Bernard a indiqué un moyen beaucoup plus simple et préférable sous tous les rapports (1). Il suffit de traiter l’urine par le charbon animal et de compléter l’action par la chaleur ou en attendant un temps suffisant. On filtre la liqueur, laquelle passe entièrement limpide et se prête dès lors à l’examen polarimétrique.

Voici la manière d’appliquer le saccharimètre à l’analyse d’un liquide sucré : Â l’extrémité A du saccharimètre (voy. fig. 2), on dispose une lampe qui envoie des rayons lumineux à travers un Nicol. Le faisceau de lumière polarisée traverse ensuite le tube T, que l’on remplit d’abord d’eau distillée. L’œil de l’observateur étant appliqué à l’autre extrémité de l’appareil derrière un second Nicol faisant le rôle d’analyseur, on tire l’oculaire D ou on l’enfonce jusqu’à ce qu’on l’ait mis au point et qu’on aperçoive clairement un disque circulaire divisé par une ligne noire très-nette en deux parties égales de couleurs différentes. En faisant tourner le bouton horizontal H à droite ou à gauche, on arrive à produire des teintes identiques; les demi-disques présentent exactement la même couleur. Il faut tourner alors un anneau voisin de l’extrémité D ou de l’oculaire, et qui contient le prisme de Nicol analyseur, jusqu’à ce que les demi-disques. présentent la couleur qu’on appelle teinte sensible et qu’on choisit ordinairement dans la teinte uniforme bleu violet, de telle manière que le moindre mouvement à gauche ou à droite fasse passer l’un des demi-disques au rouge et l’autre au vert. On note la position du zéro devant un repère fixe.

Si l’on remplit alors le tube d’une solution-type de sucre candi contenant 16gr,39 de matière sèche et la quantité d’eau distillée nécessaire pour compléter 1 00 centimètres cubes, les demi-disques prennent des couleurs différentes. Pour les ramener à la teinte sensible, il faut tourner le bouton H, et alors, si l’appareil est bien réglé, c’est le numéro 1 00 de l’échelle qui coïncide avec le repère.

On voit par là que chaque degré de l’échelle représente un poids de sucre candi pur égal à 0gr, 1035, dissous dans 100 centimètres cube d’eau. Dès lors, pour faire une analyse de liquide sucré, on en remplira le tube (100 centimètres cubes), et l’on notera le déplacement du zéro. Le poids du sucre saccharose sera obtenu en multipliant le nombre des divisions par 0,1635gr. Pour le glycose qui nous intéresse surtout, nous verrions que chaque division de l’échelle correspond à 0sr,2397 de cette espèce de sucre : cela résulte de la lecture de la table de M. Clerget annexée à l’appareil.

Diabétomètre Robiquet. — Il est fondé sur les mêmes principes que l’appareil de Soleil, mais appliqué d’une manière particulière à la médecine, plus abordable et propre à la recherche analytique d’une seule variété, le sucre de diabète. C’est le diabétomètre de M. Robiquet. (Voy. Comptes rendus de l'Académie des science s, t. XLI11, p. 920.)

(1) Voyez Comptes rendus de laSoe. de biologie, 1855, p. 1. — Voyez Leçons au Collège de France, 1 855, p. 45.