TENUE

sérum à étudier, au nombre de cinq : les trois premiers tubes contenaient l'antigène aux doses croissantes employées dans les tubes témoins. Le quatrième, sans antigène, ne contenant que du sérum et de l’alexine prouvait que le sérum ne fixait pas à lui seul le complément ; le cinquième tube à son tour, prouvait que le sérum était bien inactivé.

Nous résumons dans lé tableau suivant le dispositif expérimental :

TÉMOINS - 4 KÉACTIONS

mer LOL LT ES 9 LA LAS LE A7 Antigène. 02 05. 08::0 0 0,2 05 08 0! 0 DU EL ge NO LU 0 20 02 02 02 02 0,2 Alexine..:... 0,1 01 O1 010 O4 01 01 01 0 Globules rouges. 13 1 1 1 1 1 1 il 1 4

Sensibilisatrice suivant le titrage : 0,1 ou 0,2 au 1/10.

Les réactions restaient toujours à l’étuve à 37° 2 h. 1/2 avant de mettre dans les tubes la sensibilhisatrice et les globules rouges de mouton. Cette sensibilisatrice était titrée pour que l'hémolyse se produisit après une demiheure à l’étuve à 37°.

Les résultats n'étaient lus que lorsque les tubes témoins, ne contenant que l’antigène, et le groupement hémolytiques, étaient complètement hémolysés. Pour qu'il n'y ait aucun doute sur les résultats, nous centrifugions tous nos tubes, nous n'avons appelé positive que la réaction dans laquelle la déviation est absolue, c’est-à-dire où le liquide surnageant ne présente aucune trace d’hémolyse. Quand le sérum est coloré, des tubes témoins permettent de juger par comparaison de l'existence d'une hémolyse légère.

Pour que nos recherches fussent valables, il fallait multiplier les expériences témoins ; nous entendons par cela non seulement les garanties nécessaires du bon fonctionnement de la réaction en elle-même {ce sont les tubes témoins que nous avons signalés plus haut), mais encore les essais pratiqués avec des sérums neufs et aussi avec d’autres antigènes.

À de très nombreuses reprises, nous avons essayé les sérums neufs de lapin, de chien, de singe et de génisse pour nous assurer que spontanément il ne pouvait exister de déviation complémentaire. Dans nos expériences de contrôle, nous avons même recherché si le moment de la prise du sang pouvait, chez l'animal, modifier la réaction comme cela a été judicieusement montré par MM. Bezançon et de Serbonnes, dans l'étude des anticorps tuberculeux chez l’homme. Nous n'avons jamais trouvé de lapin fixant spontanément, quel que soit le moment de la récolte du sang.

Il était plus difficile de trouver une lymphe non vacclnale pouvant servir de témoin à nos réactions ; néanmoins, nous avons essayé, plusieurs fois, de pratiquer comparativement nos recherches avec la lymphe vaccinale fraîche et des exsudats provoqués. Pour cela, nous avons déterminé chez le lapin une irritation en frottant son tégument ventral avec de l’huile de croton ; la vésication qui se produisait amenait un exsudat qui nous servait comme antigène à comparer avec une lymphe vaccinale également de lapin. Nous avons observé que les réactions étaient seulement déterminées par celte dernière. Enfin, nous avons essayé à titre de contrôle, l'emploi comparatif des lymphes de génisse et de lapin.

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Or, un animal vacciné avec une lymphe de génisse fournit une réaction de fixation, en prenant comme antigène l’une ou l’autre de ces deux lymphes.

Ces expériences de contrôle, plusieurs fois répétées, ont une valeur réelle, mais si elles sont nécessaires, on ne peut affirmer qu'elles soient suffisantes ; il est cependant impossible d’aller plus loin. Il n’y a pas d’antigène non vaccinal, ne présentant comme seule différence avec la lymphe employée, que l'absence du virus. Toutefois, nous avons tenté de détruire le virus contenu dans la lymphe par le chauffage, et inoculant l’animal avec ce produit modifié, nous n'avons plus observé les réactions qui se voyaient chez l'animal témoin ayant reçu la lymphe non chauffée.

De cette expérience, on pourrait conclure que, si la destruction du virus amène la non apparition de la réaction, c'est que cette dernière est liée à la présence de ce virus. Cette conclusion n’est peut-être pas totalement légitime. Le chauffage a pu modifier d’autres propriétés de la lymphe, et si la réaction n'apparaît pas, peut-être y aùrait-il lieu d'incriminer l'état différent physicochimique sous lequel l’antigène a été introduit dans l'organisme.

Néanmoins, {toutes nos recherches étant faites par comparaison, ayant multiplié des témoins de tous ordres, nos expériences, par leur nombre et leur concordance, offrent un intérêt qu'il nous faudra discuter, et nécessiteront une interprétation d'ensemble.

Nos recherches ont demandé une grande quantité d'animaux. Nous ne pouvons cependant fournir pour chaque série un nombre considérable d'expériences.

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C'est qu'en effet, pour suivre les réactions humorales de l'animal vacciné, il faut tellement de témoins et de lapins d’épreuve, que nous avons été matériellement limités. On verra qu’un seul sujet étudié plusieurs semaines, nécessite l'emploi de 5 à 6 autres animaux.

Nous présenterons nos faits, en les plaçant de la façon suivante. D'abord les rechecrhes cliniques et expérimentales faites sur les sujets vaccinés, et ensuite les expériences réalisées sur l’animal, en envisageant successivement la vaccination cutanée. et non tégumentaire (souscutanée, endoveineuse, digestive et péritonéale).

Un chapitre sera consacré à la recherche des anticorps dans les organes. \

il. — Réactions humorales chez les suiets vaccinés.

Ces recherches ont été le point de départ de notre mémoire.

Chez le sujet vacciné, il n’y a réellement qu'une réaction qui peut traduire l’état réfractaire, c'est le pouvoir virulicide du sérum que nous avons constamment rencontré à partir du 10 où 12° jour de la vaccination intra-épidermique. 2

La réaction de fixation n'apparaît que d'une façon précoce et transitoire, elle peut même manquer. Nous ne rapporterons que les observations suivantes, dans lesquelles 1l nous a été possible d'étudier en série les propriétés humorales.…

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OBSsERvATION L. — Un malade du pavillon Mourier, à l'hôpital Claude-Bernard, a été vacciné pour la dernière fois en 41906: il porte des cicatrices valables au bras gauche. À son entrée, une vaccination d'usage est pratiquée, à laquelle il répond selon le type de la réaction précoce de Von Pirquet, c’est-à-dire que dans les premières 24 heures, on a observé nne formation papuleuse qui s’est éteinte en 2 jours. Le sérum de ce malade est pris et essayé sur un lapin, pour déterminer son pouvoir virulieide vis-à-vis du vacein. Ce pouvoir apparaît très manifeste et on ne compte que 3 papules sur la zone -cutanée vaccinée avec le mélange sérum et vaccin ; il y a une éruption confluente sur la zone témoin.

Au contraire, la réaction de fixation pratiquée à ce moment 3 juin 4910, donne un résultat négatif.

OgservariON IL. — Un malade atteint de rougeole au début de la desquamation, est en pleine éruption vaccinale. Le pouvoir virulicide de son sérum apparait à peine, il n’y a qu’une différence légère entre la zone témoin et la zone d’épreuve dessinées sur le dos du lapin servant à l’expérience. La réaction de déviation pratiquée chez ce malade le 3 juin 1910, fut totalement négative, Dans ce cas la co-existence de la rougeole enlève, croyons-nous, toute valeur à la réaction de fixation. On connaît, en effet, le rôle empéchant de cette fièvre éruptive dans les diverses réactions humorales. Von Pirquet, puis Teissier et Kindberg, ont montré l'absence de réaction à la tuberculine chez les tuberculeux rougeoleux. M. Teissier à vu également avec Lutenbacher la réaction de Wassermann disparaitre momentanément chez les syphilitiques rougeoleux.

OBseRvaTION HE. — Un jeune enfant est en pleine éruption vaccinale au 8° jour. Son sérum offre une réaction de fixation nettement positive vis-à-vis d’une lymphe provenant d’un lapin, d'une ‘génisse et également d'origine humaine. Ce sérum ne présentait pas encore à ce moment de propriété nettement anti-virulente (40 juin 1910). Une nouvelle insertion vaccinale est faite à cette date, elle demeure sans aucun effet, pouvant être différencié de la réaction traumatique,

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Ogsenvarion IV. — Un jeune enfant vacciné depuis 15 jours présente un pouvoir virulicide très net, mais la réaction de fixation est négative le 47 juin 4940.

OBSERvATION V. — Une femme vaccinée depuis 14 jours, ayant eu une éruption très considérable, offre une réaction de fixation positive, vis-à-vis de l’antigène obtenu avec une Iÿmphe de lapin, 17 juin 1910.

OBservariIoN VI. — Un malade du pavillon Mourier a été vacciné pour la dernière fois il y a 8 ans. Sa réaction de fixation est négative, le sérum tue presque complètement le vaccin. La revaccination de ce malade se fait selon le type de la réaction précoce.

OBSERVATION VII. — Un malade atteint d’angine banale est vac ciné le 2 janvier 4911. Le 4 janvier, la réaction de fixation est pratiquée en présence d’une émulsion de pulpe fraiche comme antigène. La réaction est positive. Une revaccination est faite le 15 janvier, elle ne fournit aucun résultat. Une nouvelle réaction de déviation est pratiquée 10 jours après, elle est complètement négative. À cette date du 25 janvier, le sérum est très antivirulent.

OBSERVATION VII. - Un enfant atteint de varicelle, est vacciné le 8 janvier 4911. La lésion vaccinale est fort belle. La réaction de fixation est pratiquée le 44 janvier, elle est positive. À ce moment, le pouvoir virulicide du sérum n’a pas encore apparu. La réaction est refaite le 20 janvier, c’est-à-dire 12 jours après la vaccination, elle est encore totalement positive. À cette date, un nouvel essai du pouvoir virulicide est pratiqué, et cette fois la substance antivirulente existe. On compte sur la zone dessinée sur le dos du lapin servant à l'expérience, 10 papules sur 32 cent. carrés (lapin 55).

Pour une troisième fois, la réaction est refaite le 25 janvier 1944, pratiquée dans les mêmes conditions elle est cette fois complète- ‘ment négative. Une revaccination à cette date donne une lésion du type décrit par Von Pirquet. |