II. LEUR RECHERCHE
Elle comporte :
a) La centrifugation du lait; b) Des examens microscopiques ; c) Des ensemencements.
a) La céntrifugation (Lôhnis) Cette épreuve permettra également l'examen microscopique, sur préparations colorées, de microbes autres (bacille tuberculeux, par exemple), de moisissures, de débris divers traduisant la saleté du lait; cet examen remplacera très souvent la numération des germes sur plaque, trop longue et insuffisante à elle seule.
On verse 10 centimètres cubes de lait bien agité, chauffé à 60-70 degrés, dans de petits tubes à essai (tubes de Trommsdorf) rétrécis à leur extrémité inférieure en un tube capillaire gradué au 1 millième de centimètre cube, et on centrifuge pendant cinq minutes environ. La vitesse doit être suffisante pour déterminer la formation d'un dépôt compact
Se VU qui reste adhérent au verre lorsqu'on décante le lait (1.200 tours par minute). S'il est nécessaire, on répétera la centrifugation. .
Le lait normal ne déposer un sédiment de o ce. 002 à o cc. oo4 (2 à 4 divisions), tandis qu’un lait de vache atteinte de mammite donne un dépôt de o cc. o1 et Pa (10 divisions) (Orla-Jensen).
Le lait sale contenant des matières excrémentitielles, des débris de terre, de végétaux, donne un sédiment gris ou brun; celui qui est près de devenir acide, un dépôt blanc (caséine). S'il s’agit de lait fourni par des animaux atteints d’une inflammation de la mamelle, le dépôt est souvent abondant et jaunâtre.
Le lait ayant été décanté, on fera avec un peu du sédiment un frotlis qu'on colorera.
b) Examens microscopiques (Kufferath).
‘ Etaler au moyen d'une pipette stérile, un vingtième de centimètre cube de lait sur une lame porte-objet (format anglais). Dessécher à l’étuve à 100 degrés. Après refroidissement, colorer au bleu de méthylène phéniqué. Laver doucement à l’eau en ménageant la pellicule de lait. Sécher et examiner à l'immersion.
. On recherchera sur la préparation : 1° les leucocytes; 2° les s{replocoques.
° Les leucocytes, dont le taux normal dans le lait de vache est de 500.000 à 1.500.000 par centimètre cube, augmentent dans les mammiles.
. 2° Le s{reptocoque de la mammite forme de longues chaïnettes d'éléments arrondis, légèrement aplatis transversalement, parfois de grandeur irrégulière. Les
HE chaînettes peuvent être remarquablement longues et former comme un véritable chevelu : elles sont enrou-
lées en pelotes irrégulières, formant avec les leuco-
cytes englobés des masses compactes agglomérées.
Généralement une gaine gélatineuse très nelle entoure les filaments streptococciques.
Les séreptocoques lactiques ont une forme typique (cocci allongés, généralement par deux) (Race).
Pour Kufferath cependant, le sérep{ocoque de la mammile peut affecter les formes courtes (chaînes de deux à huit cocci). La forme longue se remarquerail au début de l'affection et à son apogée.
Le streptocoque lactique glaireux de Violle se présente, soit sous forme de longues chaîneltes, eomme les séreplocoques pyogénes, soit sous celle de diplocoques ressemblant parfaitement à des pneumocoques. Il est entouré d’une capsule mucilagineuse, bien mise en évidence dans les cultures du lait, par la fuchsine de Zaiehl.
La fuchsine ne teinte pas la capsule qui se détache ainsi sur la préparation colorée en rose Feet du streptocoque et caséine),
Ce streptocoque indique toujours :
1° Une contamination du lait après la traite, contamination naturelle (terre, végétaux, excréments) ou artificielle (par mouillage du lait) ;
>° L'insuffisance de la pasteurisation, puisque la pasteurisation à 60 degrés pendant vingt minutes le
détruit ! (Violle).
! Kufferath signale au sujet de la coloration, par sa méthode, des
As c) Ensemencements. — Lôühnis indique dans son Précis de Bactériologie agricole le bouillon suivant comme un bon milieu de culture du séreptocoque de
la mammite :
Bouillon ordinaire . . . . . 100 grammes, Catéine, 23 (Re PR EEE 0 ETS AAC
On y ensemence un peu du dépôt de centrifugai P gation. On fait ensuite un examen microscopique de
R la culture.
