TABLEAU IV
Teneur en vitamine B, libre des principaux organes de l'homme 1/10 de mg. par kg. frais.
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b) Dans le lait de femme.
Nous avons dosé la vitamine B, dans le lait de femme, de quatre à huit jours après l’accouchement. Il faut considérer que ces femmes avaient pendant leur séjour à la maternité une alimentation très nettement supérieure à leur alimentation habituelle. Les prélèvements ont été effectués le matin.
Lorsque l’on veut doser la vitamine B; par la méthode de JANSEN déjà décrite : adsorption sur terre à foulon et oxydation par le ferricyanure de potassium, on se heurte à un premier obstacle : lPélimination des protides du lait. Contrairement au lait de vache une élimination correcte de la caséine est impossible en utilisant l'acide trichloracétique.
W. NEUWEILER a surmonté la difficulté en effectuant une digestion de la caséine par la pepsine. Le lait est préalablement écrèmé par centrifugation prolongée.
Après centrifugation il est acidifié à pH : 5,5 par de l’acide chlorhydrique, et porté pendant huit minutes au bain-marie à 60-70°. Ensuite le lait refroidi est additionné de quatre grammes environ de pepsine par 100 em et abandonné 12 à 16 heures à l’étuve à 37°. La prise d’essai dépend du volume de lait. L'auteur précise la marque de pepsine utilisée. Cette indication est utile, car toutes les pepsines n’ont pas la même activité et il faut parfois augmenter cette dose et prolonger de 2 à 4 heures la durée d’étuvage. Le liquide est filtré et étendu à trois fois son volume initial par de l’eau distillée, puis agité pendant 1 heure 30° environ en présence de terre à foulon. L’adsorbat est traité comme nous l’avons indiqué. Plusieurs essais d’oxydation avec des volumes différents de la solution de ferricyanure de potassium à 1 p. 1.000 sont nécessaires. Le thiochrome est extrait par l’alcoo! isobutylique et l’extractum comparé à une gamme.
Sur 15 laits de femme nous avons trouvé par cette méthode |
7 fois des traces de vitamines B; (moins de 0,050 mg. p. 1.000)
3 fois : 0,05 mg. p. 1.000
2 fois : 0,06 mg. p. 1.000
2 fois : 0,10 mg. p. 1.000
L’insuffisance des prises ne nous a parfois pas permis d’apprécier les teneurs au-dessous de 0,050 mg. par litre.
28 CHARLES AUFFRET.
Quoiqu'il en soit, comme NEUWEILLER nous constatons la pauvreté du lait de femme en vitamine B;. Cet auteur à trouvé des teneurs variant depuis des traces jusqu’à 0,130 mg. par litre. Il nous a été impossible. de suivre dans le temps la variation de la teneur en vitamine B, dans le lait d’une même femme.
Comment peut-on expliquer dans ces conditions la rareté de l’hypoavitamose ou de l’avitaminose chez le nourrisson, consommant un aliment particulièrement riche en lactose ? Mme RANDOIN et LECOQ ont mis en évidence le rôle primordial de l'équilibre alimentaire dans lutilisation du lactose. Mais cet équilibre réalisé, une certaine quantité de vitamine B,; est nécessaire. Or la quantité de vitamine B, fournie au nourrisson est très faible par rapport à celle de lactose.
Il faut donc admettre que dans le lait de femme, aliment naturel parfaitement équilibré, l’action de la vitamine B; est maxima. En outre il est aussi possible que la forme sous laquelle se trouve le lactose dans le lait de femme favorise cette action. Les travaux de POLONOVSKI et LESPAGNOL qui ont abouti à l’isolement du lait de femme du gynolactose et de l’allolactose montrent que le problème est compliqué et permettent l’hypohèse précédente. De plus il ne faut pas oublier que l’enfant naît avec une réserve assez importante de vitamine antihéribérique qui peut être suffisante pour intervenir dans le métabolisme du lactose pendant tout le temps où le lait est son unique aliment. Le faible apport quotidien du lait peut suffir aux besoins de renouvellement ou de remplacement de cette vitamine qui jouant un rôle identique à celui d’un catalyseur dans des conditions optima d’action dure plus longtemps car elle ne paraît pas être « empoisonnée >» comme cela semble se passer au cours du déséquilibre alimentaire. Etant donné que la vitamine B; se montre active en très petite quantité il est difficile d'admettre qu’elle joue un rôle autre que celui d’un catalyseur. A dose active elle ne peut intervenir par apport d'énergie provenant de la combustion de sa molécule.
D’après BESsAN et REICHELT la flore bactérienne du côlon (en particulier B. bifidus) suppléerait aux besoins en vitamine B, du nourrisson en synthétisant cette vitamine qui serait résorbée par le foie. Et les troubles apparaîtraient, selon Guc- GISBERY, sous l'influence d’une altération de la flore intesti-
nale ou d’une carence de certaines substances nécessaires à la synthèse. Ces troubles se produisent dans des conditions très identiques à celles déjà rencontrées dans certains cas de polynévrite et créées expérimentalement par LECOQ par addition de bacilles lactiques à la ration alimentaire.
NEUWEILLER a prouvé que l'injection ou l’ingestion de vitamine B, augmentait la teneur du lait de femme mais de facon minime par rapport à la quantité administrée.
La teneur en vitamine B, du lait de vache est nettement supérieure à celle du lait de femme. Pour en effectuer le dosage il faut éliminer les protides.
NEUWEILLER met le lait écrèmé par centrifugation à l’étuve à 37° pendant une demi-heure, et l’additionne de lab-ferment. Ensuite il l’acidifie comme le lait de femme en le portant à 60-70°. Puis après refroidissement il lui ajoute de la pepsine et le place à l’étuve à 37° pendant une nuit. Il est de nouveau centrifugé, et le liquide clair obtenu est traité comme celui provenant de la digestion pepsique du lait de femme.
En opérant dans ces conditions NEUWEILLER a trouvé dans le lait de vache des teneurs en vitamine B, variant de 0,240 mg. à 0,570 mg. p. 1.000.
N'ayant pu suivre cette technique, nous avons déféqué le lait en suivant la méthode classique qui utilise l’acide trichloracétique.
A 10 cm* de lait de vache écrèmé dilué par 10 cm d’eau distillée on ajoute 5 cm d’une solution d’acide trichloracétique à 50 p. 100 et agite modérément pour mélanger les liquides. On filtre et lave le coagulum avec de l’eau distillée contenant dans 50 em *, 1 em* d’acide trichloracétique à 50 p. 100. Cette eau acide est employée par affusions successives jusqu’à obtention d’un volume final de 50 em*. La vitamine B, est extraite de cette solution et oxydée par le ferricyanure de potassium à 1 p. 1.000 comme précédemment.
Certains auteurs estiment que la vitamine B; est partiellement adsorbée par le coagulum.
Par ce procédé nous avons trouvé dans des laits frais locaux par litre 0,50 mg. — 0,45 mg. — 0,40 mg. — 0,40 mg. — 0,35 mg. — 0,30 mg. — 0,30 mg.
Au Tonkin, la production de lait frais est si faible, qu’il
30 CHARLES AUFFRET.
ne peut être considéré comme un aliment d'usage courant même pour les enfants.
Ces dosages permettent de mettre en évidence la grande différence existant entre les teneurs en vitamine B; du lait de femme et du lait de vache. Ces deux laits sont pour le nouveau-né des aliments complets naturellement équilibrés. Le lait de femme est plus riche en lactose que le lait de vache, mais moins riche en vitamine B,. Il semble done comme nous l'avons déjà indiqué que la parfaite assimilation par l'enfant du lactose du lait de la mère ne puisse être attribuée qu’à un état différent de celui du lactose de lait de vache.
En admettant ce qui est vraisemblable, qu’à côté de la-vitamine B, libre que nous dosons, existe la co-carboxylase, on peut supposer que les mêmes écarts subsisteront entre les quantités de co-carboxylase.
Comme le fait remarquer Mme RANDboix le lait étant parfaitement équilibré en ses divers constituants il faut éviter de déséquilibrer la ration du nourrisson par adjonetion de glucides sans apport d’une quantité équivalente de vitamine B;.
Au Tonkin il est possible de constater cette erreur chaque jour. Les enfants sont nourris au sein jusqu'à l’âge de deux ans et parfois plus tard. Entre les repas de lait ils consomment en quantité importante, même surprenante, du riz plus ou moins blanc. Il est indubitable que dès son jeune âge le Tonkinoïs est exposé au béribéri qui doit se manifester sous des formes plus ou moins frustes, formes qui peuvent disparaître en vieillissant quand la ration alimentaire devient plus ariée et par le fait même plus riche en vitamine B..
Un régime riche en vitamine B; s'impose pour la femme allaitant. Il faut en effet remplacer la quantité variable de vitamine B, éliminée quotidiennement, et il y a intérêt à rendre le lait aussi riche que possible en ce facteur.
c) Dans l'urine.
H. WESTENBRINK et J. GOUDSMIT ont préconisé la technique suivante pour doser la vitamine B, dans l’urine
L'urine est amenée à pH : 3 par addition d’acide chlorhydrique. L’indicateur utilisé est le rouge congo qui doit devenir légèrement bleu. La vitamine B, est extraite par de la franconite K, L. L’adsorbat est lavé avec HCI N/500 et de
DOSAGE DES VITAMINES B; ET B»s DANS L'ORGANISME. al
l'alcool à 96° et la vitamine B, oxydée par le ferricyanure de potassium comme nous lPavons déjà décrit.
Pour Fextraction de la vitamine B; nous avons employé la terre à foulon et la prise d’essai était de 100 cm d'urine.
Ces auteurs signalent que ce dosage est rendu difficile par la présence d’autres substances fluorescentes adsorbables, et par des substances qui inhibent la fluorescence du thiochrome.
A la colonie la substance fluoreseente couramment et abondamment rencontrée est l’urobiline. En examinant aux ultraviolets l'alcool isobutvlique avant servi à l'extraction du thiochrome on observe dans certains cas une fluorescence verte masquant complètement la fluorescence bleue caractéristique. Pour éviter cet inconvénient nous n'avons pris que des sujets présentant une élimination normale d’urobiline. Néanmoins nous nous somines heurté à d’autres obstacles. En effet la terre à foulon adsorbe aussi des urochromes que les lavages à l’eau acide et à l'alcool éthylique n’éliminent pas et qui sont élués en milieu alcalin par l’aleool isobutylique : le dosage est imposible.
Nous avons dosé la vitamine B, dans l’urine de 24 heures de dix adultes de 25 à 30 ans et nous avons trouvé des teneurs variant de 0,015 mg. à 0,030 mg. par litre. Chez trois enfants de 5 à 6 ans dont les parents se trouvent dans le groupe précédent nous avons trouvé pour l’un 0,015 mg. et pour les deux autres 0,020 mg. par litre. La quantité d’urine émise par les adultes étaient voisines de un litre par 24 heures et pour les enfants elle oscillait de 0,400 1. à 0,500 I. Chez huit femmes enceintes à quelques jours de l’accouchement nous avons trouvé des quantités de vitamine B, variant de traces à 0,020 mg. par litre. Les quantités d’urine émises oscillant de 0,800 1. à 1,250 1., la quantité maxima de vitamine B, éliminée est de 0,025 mg. par 24 heures.
On constate donc que les quantités de vitamine B; éliminées quotidiennement tant par l'individu normal que par la femme enceinte sont faibles. Chez cette dernière cette quantité peut se réduire à des traces.
H. WESTENBRINK et J. GOUDSMIT ont établi qu'en Europe les sujets normaux excrètent de 0,070 mg. à 0,300 mg. de vitamine B, par 24 heures. Cherchant à établir l'influence du régime sur cette élimination ils ont trouvé chez dix hommes
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soumis à un régime très riche une élimination moyenne de 0,230 mg. par 24 heures. Dans les mêmes conditions les femmes n’éliminent que 0,120 mg. et quand elles sont enceintes lexcrétion urinaire quotidienne de vitamine B; diminue considérablement de O0 à 0,080 mg. par 24 heures.
La comparaison de tous ces chiffres met davantage en évidence la faiblesse de l'élimination urinaire quotidienne de vitamine antibéribérique par le Tonkinois normal.
WESTENBRINK et GOUDSMIT ont constaté qu'après injection ou ingestion de 3 mg. d’aneurine on ne retrouve dans l’urine de 24 heures que 15 p. 100 de cette quantité. II faut donc admettre que l’organisme fixe momentanément ou détruit une partie de la vitamine B:.
Le tableau suivant dû aux mêmes auteurs met en évidence que l'élimination de la vitamine B; plus forte le jour que la nuit dépend de la quantité absorbée et qu'après injection ou ingestion d’une quantité importante de cette vitamine Pélimination augmente considérablement.
