Examen bactériologique

Si l’on considère le nombre et la variété de microorganismes qui nous entourent, 1l n'y a rien d'étonnant que nous relrouvions ces germes sur les flenrs, les fruits que nous mangeons {l) et par cela même dans les produits comme le miel, qui nous est fourni par les abeilles. 2 74

Or, la matière sucrée puisée dans le nectar des plantes et plus rarement dans la miellée, est un excellent milieu de culture pour certaines levures en attendant qu'elles soient transformées ailleurs, par les insectes et en particulier par les abeilles dans le miel.

Déjà Boutroux (2), avait remarqué que les levures sont nombreuses sur les abeilles et 1l avait eu l’idée de

(1) A. Sarrory et Fiassier, C. R. Soc. Biol., mars 1910. (2) Bourroux, Soc. Linéenne de Normandie, 9° S., 1882, p. 98.

Ho re

les rechercher dans le miel. Cet auteur avait ensemencé dans du moût de raisin stérilisé, un peu de produit retiré d’une alvéole; et 1l avait réitéré cette opération avec quatre alvéoles différentes ; le tout avait été mis dans un four de boulanger à 24° environ. Après un certain temps, trois des tubes restèrent dépourvus de tout organisme vivant; le quatrième fut envahi par un mycélium de moisissures. °

Pour Boutroux « les cellules de levure ne peuvent se développer dans le miel et y meurent. »

M. Alan Caillas (1), dans une conférence sur les «Trésors d'une goutte de miel », cite comme champignons trouvés : le mucor mucedo, le mucor racemosus, le penicilium glaucum et une bactérie : le pleurococcus vulgaris. ?

Nous avons repris l'étude bactériologique de différents miels, qui étaient toujours renfermés dans les alvéoles et nous avons pratiqué nos prises à l'intérieur des alvéoles avec toutes les précautions aseptiques désirables.

Méthodes employées. — Nous avons isolé les espèces qui nous inléressaient en diluant une cerlaine quantité de miel dans du bouillon de culture dont nous donnons la formule ci-jointe :

Peptone ere PTS : 2 gr.

GiuCOSe RE Re Ps AE 0 50 Glycérinees ex RAR EEE 5 ce.

Eau:Q.S" pour ER ET ROUE:

Nous avons neutralisé par la sonde au 1710 jusqu’à légère alcalinité et stérilisé ensuite un quart d'heure à 410°.

(1) L’Apiculteur, 1910.

ErbT ie

Nous avons 1solé les espèces par la méthode des boîtes de Pétri et par la méthode des stries successives ; nous avons eu par ces procédés un isolement parfait des différents germes.

D'autre part, nous avons employé du Raulin acide (1) sur lequel ne pousse que les champignons. Nous avons encore isolé par des dilutions successives les différents champignons.

Une fois ces expériences faites, bactéries et champignons isolés, nous les avons ensemencés sur les différents milieux employés en bactériologie (pomme de terre simple, glycérinée, carotle, gelose, etc.) de façon à en étudier les principales propriétés morphologiques et les différentes propriétés biologiques.

ÉrcDE MORPHOLOGIQUE DES ESPÈCES : 1) Fixation. — Nous avons fixé, au moyen de la chaleur, de l’alcocl, de l'acide picrique à saturation, du picroformol, etc.

2) Coloration. — Pour colorer nos préparations, nous avons emplové :

a) Pour les bactéries : Va thionine phéniquée, le violet de gentiane, la fuchsine de Ziehl, ia méthode de Gram.

b) Pour les champignons : le bleu lactique, le rouge congo, lé violet de gentiane et surtout le colorant triple de Gueguen à base de sudan TIT, iode et bleu lactique, qui permet de décéler à la fois le glycogène ou l’amidon,

(4, Liquide de Raulin :

BA ans core eu 1500 Carbonate de magnésie....... 0,40 Dore A TOR 70 Sulfate d’ammoniaque..,..... 0,25 APTE 7.7. ares n Sulfate die APS res oe 0,07 Nitr. d'ammoniaque........... 4 Sulfate:de Zinc22..... 0,07 Phosphate d'ammoniaque...... 0,6 Silicate de potasse........,... 0,07

Csrbonate de potasse.......... 0,6 Carbonate de manganèse... .. 0,07

teint le protoplasma en bleu et colore les globules de graisse en rouge.

Remarques. — L'optimum cultural des bactéries et des champignons inférieurs a été effectué en disposant dans différentes éluves, aux températures de + 15° + 20° + 30° + 34 + 37° + 40, des carottes ensemencées de champignons et de bactéries. Nous avions ainsi une idée de la température la plus favorable aux champignons.

Les essais ainsi conduits, nous ont donné les résultats

ci-contre

MIELS BACTÉRIES HA eau Bacillus subtilis.

(M. de Bretagne) 1 bactérie chromogène jaune

Sarcina lutea Bac. aerophilus.

Bac. multipediculus.

0 lactis.

Miel C (prov:

d’alvéoles) (M. de Normandie)