III. Nos diverses recherches expérimentales

L’intra-dermo-réaction à la cholestérine

Méthode simple à appliquer, l'intra-dermo à la cholestérine présentait pourtant dans sa réalisation une difficulté initiale : c’est l’insolubilité de la cholestérine dans les solvants habituels et injectables.

Au début de nos recherches nous n'avons retenu que la solution huileuse : aux taux de 3 à 5 0/0 cette solution est stable ; au delà, il faut souvent, avant l'emploi, la faire tiédir pour redissoudre le léger précipité cristallin qu’elle dépose à froid.

Récemment nous avons eu recours à la suspension colloïdale qu'emploie notre ami Jacques Decourt pour diverses recherches qu'il poursuit depuis plusieurs années. I a bien voulu nous autoriser à l'utiliser. Sa préparation est facile : on fait dissoudre dans 10 cm° d’acétone bouillant 1 gr. de cholestérine pure : quand la dissolution est complète, on la projette par petites quantités et avec précaution dans 100 cm° d’eau bidistillée bouillante ; c'est le temps délicat de la préparation : il faut agir avec prudence pour éviter les projections de liquide ; on agite

et on continue prudemment à chauffer, On peut à la

A Dr es rigueur, faire flamber l’acétone en excès. Nous préférons prolonger, au moins un quart d'heure l’ébullition, pour débarrasser au maximun la suspension de l’acétone qu'elle peut retenir ; on filtre à chaud sur papier filtre ordinaire ou sur coton; il est recommandable de filtrer plusieurs fois. On obtient ainsi une belle suspension laiteuse qui titre en moyenne {gr. 65 de cholestérine pour 1.000. Elle est parfaitement stable : il nous est arrivé, à Decourt et à moi de la conserver plus de quinze jours au laboratoire sans y constater la moindre précipitation.

Examinée à l'ultra microscope, elle a tous les caractères des suspensions colloïdales ; on n’y trouve aucune figure cristalline.

Le docteur Duplan avait voulu également nous préparer une suspension colloïdale de cholestérine en utilisant le procédé à la lysalbine ; il nous avait remis un produit titrant près de 1/100. Malheureusement l’adjonction de

lysalbine le rend inutilisable pour l'intra-dermo-réaction.

Technique. — Quel que soit le produit employé, la technique est la même. Il suffit de se munir d'une seringue de deux centimètres cubes et des aiguilles fines à biseau court qu'on utilise pour la réaction de Schick; signalons en passant que lorsqu'on utilise l'huile cholestérinée, il est préférable de la faire tiédir préalablement afin de rendre l'injection « moins dure ». Après désinfection de la peau

de la face antéro-externe de l’avant-bras, on snjecte stricte-

TTL NE

ment dans le derme en poussant l’aiguille presque tangentiellement à la-peau, 2 à 3 dixièmes de centimètres cubes, du produit cholestériné, jusqu’à obtenir une papule blanchâtre, surélevée, de la grosseur d’une lentille. L’injection est absolument indolore.

Nous insistons sur le fait qu’elle doit être intra-dermique, car lorsqu'elle est poussée dans le tissu cellulaire

sous-cutané elle n’est suivie d'aucun effet.

Intra-dermo à l’huile cholestérinée

Lorqu'on utilise la solution huileuse il ne se produit habituellement dans les heures qui suivent l'injection, aucune modification locale ; l'aspect de peau d'orange qui indiquait la réussite de l'injection s’affaisse, et le lendemain il ne persiste que la trace de la piqûre sous forme d’un point rouge. Parfois cependant on note une réaction érythémateuse qui ne dépasse pas l'étendue d’une pièce de 50 centimes, sans gonflement, et qui va disparaître en 36 ou 40 heures.

— Quand l’intra-dermo est négative, il n'existe donc durant les deux jours qui suivent l'injection qu’une simple trace traumatique ou qu'une légère rougeur vite effacée.

— Quand elle est positive, on ne pourra généralement la lire qu'au delà du 3° jour; dans les cas les plus typiques,

la réaction est de type papulo-érythémateux : le point

Are

d'injection est entouré d’une induration nodulaire nette, sensible à la vue et au toucher, rouge ; la rougeur dépasse la zone d’induration, sur l'étendue d’une pièce de deux francs ; elle s’efface un moment à la pression ; la palpation de la région est un peu douloureuse : il est des cas moins nets où n'existe que l’induration : la friction légère de la peau à ce niveau fait apparaître électivement au-dessus du nodule une rougeur temporaire.

La durée de la réaction est en moyenne de 3 à 4 jours ; elle disparaît habituellement sans laisser de traces.

Nous devons pourtant signaler deux ordres de résultats curieux.

Deux fois la réaction a été particulièrement durable. Mme P... atteinte d’un rhumatisme chronique déformant a vu à la suite d’une intra-dermo à l'huile cholestérinée se développer une réaction papulo-érythémateuse considérable, atteignant presquel’étendue d’une pièce de francs. En quelques jours, la rougeur s’est effacée ; mais l’induration a persisté pendant près d’un mois, donnant l'impression d’un véritable tophus, artificiellement créé, ou plus exactement nous rappelant par sa consistance et ses irrégularités, ces hygromas qu’elle présentait près de l’olécrâne et dont l’un à l’analyse chimique s’est révélé contenir de la cholestérine et du phosphate de chaux. Même constatation chez M. Har... d’une réaction fortement positive et ayant duré 10 jours ; le malade apparemment indemne

de toute précipitation s’est révélé porteur de deux petits

me D TIÈES tophi auriculaires contenant de la cholestérine : seul le résultat positif de l'intra-dermo a permis en les faisant systématiquement rechercher, de les trouver.

Chez Mme Bal... atteinte d'un xanthome sans diabète, la cholestérino-réaction très fortement positive, persistant à l’heure actuelle encore, depuis 15 jours fut en quelque sorte une « réaction à retardement ». Dans les quelques minules qui suivirent l'injection, une rougeur considérable était apparue autour du lieu d’inoculation. Nous pensions qu'elle réagirait dans un sens positif ; nous fûmes surpris de ne voir survenir pendant 5 jours aucune modification locale ; au 8° jour la malade venait nous trouver, s’effrayant de l'apparition, sur ses deux avant-bras (l'intradermo avait été faite des deux côtés), de &eux plaques d’un rouge vineux très surélevées ; c'était la traduction d'une réaction particulièrement forte qui dure encore à l'heure

actuelle.

On peut faire à l’intra-dermo cholestérinique plusieurs objections importantes.

C’est d’abord la minime quantité de cholestérine injectée. En utilisant les solutions huileuses à 3 0/0 la dose de produit actif qu'on dépose dans le derme est de 6 à

9 milligrammes. Les résultats qu'on obtient malgré cette dose infime ne sont pas pour nous surprendre ; sans doute

ne peut-on pas comparer les intra-dermo aux toxines diph-

SNS tériques on scarlatineuses par exemple, aux intra-dermd cholestériniques, mais on peut remarquer queles premières mettent en Jeu des quantités de produit actif infiniment plus petites ; elles donnent pourtant des résultats. La très faible faculté de résorption du derme en est la raison la plus vraisemblable. Il est certain que l'examen histologique d’une réaction positive donnerait d’utiles renseignements. Nous n'avons pu le pratiquer que chez l’animal ; encore ne s’agissait-il pas de réactions comparables à celles qu'on peut obtenir chez l’homme ; nous parlerons plus loin des constatations que nous avons pu faire : mais il ne nous semble pas possible de conclure de ce qui se passe expérimentalement chez l’animal à ce qui se passe chez l’homme à l'état pathologique.

Une deuxième objection plus valable tient au solvant huileux qu’il est nécessaire d'employer pour véhiculer la cholestérine. On peut en effet se demander si le caractère positif de nos résultats n’est pas simplement un cas particulier des réactions générales des tissus vis-à-vis de substances grasses agissant à titre de corps étranger, à moins qu'ils ne soient la traduction chez les individus observés d’un trouble du métabolisme des graisses fréquent dans cette catégorie de malades ; aussi avons-nous entrepris une recherche de contrôle, en pratiquant systématiquement chez 30 sujets des injections témoins à l'huile d'olive pure et stérilisée. Les résultats sont concluants :

dans la plupart des cas les réactions ont été nulles ; dans

ÉVNTAUE.

quelques-uns, il y eut une légère rougeur transitoire avec persistance d’un petit nodule gros comme une lentille ; jamais nous n'avons décelé de réactions comparables à celles que nous donnait l'huile cholestérinée ; bien plus, dans cette série de malades, cinq eurent avec l'huile cholestérinée des réactions positives ; les injections témoins

à l'huile simple furent négatives.

Résultats d'ensemble. — Nous avons pratiqué nous-mêmes l’intra-dermo à la cholestérine jusqu’à présent sur une centaine de sujets. Voici l’ensemble de nos résultats.

Résultats positifs. — 20 malades ont présenté des réactions franchement positives ; en voici le décompte :

T rhumatismes déformants d’étiologie non infectieuse. La plupart s’accompagnaient de déformations articulaires ; deux d’entre eux étaient porteurs de concrétions articu4

laires ou juxta-articulaires. L’une contenait en abondance de la cholestérine.

{ arthropathie syphilitique sans tabès.

(Nous signalons en passant que deux rhumatismes à forme arthralgique, sans déformation, l’un articulaire aigu, l’autre gonococcique nous ont donné une très légère réaction : elle était trop faible pour qu’on la considère comme positive).

1 petit tophus cholestérinique de l'oreille.

2 cholécystites lithiasiques.

a NN

1 Lthiase double biliaire et rénale chez un obèse sans cholécystite.

2 gérontoxon.

2 hypertendus avec aortite et induration artérielle.

Î xanthome : c’est là que nous avons observé la plus forte réaction.

1 cirrhose éthylo-spécifique avec aortite et induration artérielle.

Résultats négatifs. — Nous relevons parmi nos intradermo négatives :

3 rhumatismes infectieux (articulaire aigu, gonococcique ou tuberculeux).

6 ictères (catarrhaux et spirochétosique).

5 hypertendus avec ou sans défaillance cardiaque.

6 néphrites chroniques ou aiguës.

2 tabès.

4 pleurésies tuberculeuses (séro-fibrineuses ou purulentes).

4 scléroses pulmonaires.

12 tuberculoses pulmonaires ulcéro-caséeuses ou fibreuses, dilatation des bronches.

8 asystolies.

6 hémiplégies par ramollissement ou embolie.

2 constipations chroniques.

1 ulcères gastriques ou duodénaux.

1 typhoïde.

k pneumonies et congestions pulmonaires aiguës.

1 entérite,

1 mal de Pott.

3 cirrhoses alcooliques.

& diabètes avec ou sans dénutrition.

1 cholécystite opérée depuis quatre ans.

1 gérontoxon avec rétinite albuminurique chez une rénale.

Les résultats qu'a bien voulu nous communiquer le D: M. Binet sont comparables aux nôtres.

L'intra-dermo-réaction s'est révélée positive dans :

4 migraine.

2 angiocholites calculeuses.

À rhumatisme chronique (réaction faible).

2 obésités avec hypertension. |

1 goutte.

Nous devons signaler deux réactions particulièrement fortes :

Me Herw... souffrant de migraines, a présenté une cholestérino-réaction érythémato-papuleuse ; à 2 centimètres en dehors du point d’inoculation s’est produite une formation semblable qui a duré deux jours et demi.

M Dry... angiocholécystite aigu a eu une réaction durable suivie d’une pigmentation brunâtre qui persiste encore après vingt-cinq Jours après l'injection.

Elle se montra négative dans :

3 uricémies.

1 cholécystite non calculeuse.

NO congestion hépatique (éthylique).

urticaire à répétition.

ictère hémolytique ancien.

angiocholécystite calculeuse.

lithiase biliaire ancienne.

lithiase rénale.

obésité.

polynévrite.

HR À À À À À À ee

syphilis tertiaire.

Elle était douteuse dans :

1 angiocholite non calculeuse.

4 Lithiase rénale.

2 obésités.

Encore s'agissait-il de réactions faibles disparues en 2 jours et que nous ne considérons pas comme positives.

La conclusion est facile. À condition de ne tenir pour valables que les réactions nettement positives, c’est-à-dire papulo-érythémateuses atteignant vers le 3° jour au moins l'étendue d'une pièce de un franc, nous voyons que l'intra-dermo-réaction n'est pratiquement positive que dans les différents types de maladies précipitantes. Il existe bien quelques réactions « douteuses » chez les obèses, au cours de certaines congestions du foie, des angiocholécystites non calculeuses, mais elles sont peu durables et ne doivent pas être considérées comme positives.

En dehors de ces cas elle est négative, quelle que soit

l'affection au cours de laquelle on l'a pratiqué : ellé n’est pas influencée par le degré de la température ; nos deux typhiques, nos deux pneumoniques n'ontpas réagi malgré leur fièvre à 40 ; l'ictère quelle que soit son étiologie, à condition qu'il ne s'agisse pas d'ictère lithiasique, la laisse négative. Seuls les tuberculeux fébriles même en l’absence de toute précipitation cholestérinique peuvent avoir des réactions faiblement positives ; mais ceci est loin d'être constant et il suffit d'en être prévenu.

Ce qui nous semble plus important c’est qu’un certain nombre de sujets ont une réaction négative alors qu'on s'attendait à la trouver positive. C’est le cas de 2 cholécystites ou angiocholécystites calculeuses, d’une lithiase biliaire et d'une rétinite-albuminurique.

Nous ferons remarquer que la lithiase est ancienne et qu'une de ces cholécystites a élé opérée depuis plusieurs mois : elles ne présentent actuellement aucun signe d'évolution ; on peut penser que la tendance précipitante que traduit une cholestérino-réaction positive manque actuellement chez ces deux malades : on peut s'expliquer ainsi que l’intra-dermo soit négative. En ce qui concerne l’'angiocholécystite de Binet, et la rétinite albuminurique, nous avouons ne trouver aucune explication valable.

Une dernière question se pose ; quelles sont les relations de l’intra-dermo et du taux de la cholestérinémie ? Nous avons pratiqué chez un certain nombre de nos malades,

en même temps que l’intra-dermo, un dosage de la choles-

y o térine du sérum (méthode de Grigaut) et parfois même

un dosage de l'acide urique.