C) COMPOSÉS SE RATTACHANT AU SOUFRE NEUTRE

a) Cystine.

S — CH, — CH — (NH,) — COOH | | S — CH, — CH — (NH,) — COOH

L'eau régale agissant sur la cystine, dans les conditions que nous avons précédemment décrites pour le sulfonal, oxyde une partie du soufre ; on obtient en effet, par l'acide chlorhydrique et le chlorure de baryum un abondant pré- cipité desulfate. Cependant la réaction est loin d'être totale. Nous avons procédé au dosage du soufre sur une prise d'essai. Résultats obtenus :

Se

Poids de substance; .:2..,%/02%,0 0 g. 495 SO,Ba Correspondant. 0 g. 260 D'OR SSP A NERAT ET RETrS 7,21

Calculé %, : 26,66.

Nous nous sommes demandé quelle était la substance qui prenait naissance au cours de cette oxydation. Dans ce but, nous avons oxydé 5 gr. de cystine par l'eau régale et nous avons évaporé à sec le produit d'oxydation au bain-marie. La cystine est, comme l'on sait, insoluble dans l’eau, de même dans l’eau régale, mais après quelques secondes de contact, une violente réaction se produit avec dégagement de chaleur et d’abondantes vapeurs nitreuses. Cette réaction dure quelques secondes et doit être effectuée dans un cristallisoir à bords élevés et à large surface.

Le produiti provenant de l'évaporation à sec, au baïinmarie, est desséché dans le vide sulfurique. Il. se présente sous l’aspect d’un liquide visqueux, difficilement cristallisable, de réaction fortement acide. Il contient du reste de l'acide sulfurique ilibre. Sur une prise :d’'essai neutralisée par la lessive de soude, le réactif de Nessler ne donne qu'une réaction extrêmement faible. Il ne s’est ipas produit de sels ammoniacaux au cours de la réaction. Le résidu, repris par l’eau, est neulralisé par agitation avec le carbonate de baryum et filtré. Dans cette opération, l’acide sulfurique reste sur le filtre sous forme de sulfate de baryum. Par évaporation du résidu et cristallisation, on obtient, au fond du cristallisoir une masse cristalline de coloration jaune ambré à peine translucide.

Ces cristaux ont été repris par l’eau, et soumis à une nouvelle cristallisation. Après dessiccation dans le vide sulfurique, nous avons procédé au dosage du soufre, de l'azote et du baryum.

Voici les résullats obtenus :

Dosage de l'azote (Kjeldahl) :

Nous n'avons pas (rouvé d'azote dosable par cette mé-

thode.

Dosage du soufre (permanganate alcalin) :

BOIS es ubStanse ne NAT 0 g. 763 0 g. 734 SO,Ba correspondant........... 0 g. 495 0 g. 453 D'OR SRE PR Pau nEL 8,90 8,47

Calculé pour le corps CELESORC

| (acide sulfolactique) CHOH Ex

oo /” A See Dana ie 10,4

Ba

Dosage du baryum après calcination par le mélange oxydant alcalin et transformation en sulfate de baryum :

I Il

Poids-dersubstance 1. 0 g. 742 0 8. 910 SO,Ba correspondant.......... 0 g. 4775 0 g. 564 DOUBS PSN 37,13 36,37 Calculé pour l’acide sulfolactique :

A et en in nn n ne 44,9

Le produit obtenu est un mélange de sulfoniques ; les sulfonates de baryum cristallisent à l’état anhydre. Donc nous pensons que le constituant principal est le sulfolactate de baryum. Il n’y a pas, en effet, d'azote dans le produit de la réaction dont le premier temps serait non seulement l'oxydation du soufre, mais la désamination avec production d’un alcool, la réaction est identique à celle qui se passe avec certaines amines sous l'influence de l'acide nitreux :

R—NH, + NOH=R—N =N—OH +H,0,

corps instable dans la série grasse, qui donne, dans un second temps, R — N,0H = R — OH + N:.

Cependant, le chiffre de baryum obtenu diffère seusiblement du chiffre théorique ; d’ailleurs la proportion du soufre se trouve aussi abaissée par rapport aux chiffres théoriques correspondant au sulfolactate de baryum. Pour obtenir un produit pur, nous aurions dû procéder à des fractionne-

CPR) LEE

ments, ce qui serait sorti du cadre que nous nous étions tracé, puisque nous savons maintenant qu'il s'est formé, indépendamment de l’acide sulfurique, un dérivé sulfonique dosable par l'oxydation permanganique alcaline.

De ce qui précède, nous retiendrons deux faits importants : La désamination, d’une:part et la formation d'acide sulfurique et sulfolactique, d'autre part. Par quel processus a eu lieu la désamination ? S'est-il formé de l'acide nitreux, comme l’ont prétendu ‘certains auteurs, au cours de l’oxydation par l’eau régale ou le chlore naissant possède-t-il cette propriété ? Nous savons que le brome à froid donne, sur la cystine et la cystéine, de l'acide cystéinique. Il n'y a donc pas désamination. En est-il de même avec le chlore ? Dans ce but, nous avons fait agir sur la cystine, pendant 48 heures, un excès de chlore naissant obtenu par action de l’acide chlorhydrique sur le bioxyde de plomb,

Après avoir chassé le chlore par l'ébullition, nous avons précipité, après filtration, l'excès de plomb par l'hydrogène sulfuré. Le nouveau filtrat fut soumis à une légère ébullition pour chasser l'hydrogène sulfuré.

La dessiccation à sec, au bain-marie, puis dans le vide sulfurique et l'action consécutive du carbonate de baryum, comme dans les conditions précédemment indiquées, nous ont conduit à un sulfonate de baryum dont nous avons déterminé la teneur en azote, soufre et baryum.

On obtient une masse cristalline identique, par son aspect, à celle obtenue avec l'eau régale.

Dosage de l'azote (Kjeldahl) :

Poids de,;substance. Sun 0 g. 021 HCI N/50 correspondant ............ 4 cc. 18 D'OMT 0ET re TN RE 5,57

NU à duel sou et ner EL AA RARE 5,9

Il s’est donc formé, avec le chlore naissant, de l'acide Cystéinique aux dépens de la cystine. D'ailleurs, le dosage du

soufre pratiqué sur une prise d'essai, nous a donné les résultats suivants :

PhidS déssabstances 7 CN ES 0 g. 346 S0:Ba correspondant... 0 g. 307 ROOMS ARE ner à 12,21

Calculé pour le eystéinate de baryum : 13,4 %. b) Méthionine. CH; —S — CH, — CH, — CH (NH,) — COOH

Contrairement à la cystine, la méthionine est soluble dans. l'eau. Cette propriété a permis sa découverte parmi les produits d'hydrolyse des protéines. L’eau régale donne avec cette substance, après quelques secondes de contact, une réaction. énergique, avec dégagement gazeux, mais qui n’a rien de comparable à la réaction d'oxydation fournie par la cystine.

En opérant comme nous l'avons fait avec la cystine, c’està-dire avec évaporation à sec, la solution chlorhydrique ne donne qu’un très faible précipité de sulfate avec le chlorure de baryum. Le produit formé par l’action de l’eau régale après évaporation, est difficilement purifiable, ce qui tient à la présence de l'acide sulfurique qui a pris naissance au cours de l'oxydation.

Nous avons effectué sur ce résidu la transformation en dérivé barytique après avoir évaporé à sec, desséché dans le vide, repris par l'eau, neutralisé par le carbonate de baryum pour éliminer l'acide sulfurique, filtré et soumis à la cristallisation par évaporation.

Le produit obtenu se présente sous l'aspect d'une masse difcilement cristallisable, hygroscopique qui, après dessiccation dans le vide, nous a donné à l’analyse les résultats suivants.

Dosage de l’azote (Kjeldahl) :

La substance ne contient pas d'azote dosable par la méthode de Kjeldahl. On n’en trouve que des traces (environ 0,06 %). C'est-à-dire une quantité pratiquement négligeable, due à la présence de sels ammoniacaux.

Dosage du soufre (permanganate alcalin) :

Poidéde substance née see see 0 g. 456 SO,Ba correspondant............... 0 8: 143 D'OR NE ete des 4,31

SRE

Dosage du baryum (fusion oxydante alcaline):

Poids de sUDStANES Ce te 0 g. 4565 SO:Ba cofréspondant +... 0 g. 143 D'OR DAMES ec Re 24,63

Les chiffres rapportés ci-dessus ne correspondent à aucune substance nettement définie; d'autre part, étant donné la constitution chimique de la méthionine, le soufre se trouvant dans la molécule relié à deux atomes de carbone, nous pouvons prévoir la formation d'une sulfone, produit non azoté, dont l'extrémité de la chaine serait constituée par le groupement —CH,;—S0,—CH;. Dans ces conditions, le soufre n’est plus dosable par ia méthode au permanganalte alcalin, et le chiffre de 4,31 trouvé est notablement inférieur au chiffre théorique. Pour le vérifier, nous avons dosé le soufre en partant d'un poids connu de substance initiale sur laquelle nous avons fait agir successivement l'eau régale, puis le permanganate alcalin et nous avons dosé l'acide sulfurique dans la liqueur chlorhydrique en le précipitant par le chlorure de baryum.

Voici les chiffres que nous avons obtenus :

Poids-de substance ne Re 0 g. 460 S0,Ba’correspondant... 22. 0 g. 144 D'où SE te FENETRE 4,282

Calculé pour la méthionine : 21,47 %.

Il s’est donc bien formé une sulfone ou un mélange de sulfones. Nous n'avons pas dosé la totalité du soufre, le chiffre 4,28 est notablement inférieur au chiffre théorique dans les deux dosages. Quant au chiffre obtenu pour le baryum, il se rapproche de celui correspondant à la substance :

Se DE CH,—S0, — CH, CHOH Cou

| COO Ba re CUT

Soit : 29 ®.

Set A

et qui doit prédominer dans le mélange de produits obtenus.

La méthode au permanganate, après action de l’eau

règale, sera donc jen défaut, puisqu'elle conduit à une sulfone. |

d) Glutathion.

L'action de l’eau régale sur un polypeptide, le glutathion, conduit à un corps dont nous avons fait le dérivé barytique dans les conditions précédemment décrites. Voici les résultats obtenus :

Poids de substante......1..:4. x 0 g. O11 HCI N/50 correspondant ........... 4 ce. 11 LPOUUN CLASSE 6,46 Calculé pour le composé de formule :

Re 108 COO é | Coo CH, — NH —CO

| | | OH Ra SO3\ Ba

OH Dar | CH— CH, —CH,—CO—NH — CH —CH, | | ‘ CH, —NH—C0.

COO Ne COO NBa Lt A bee té 5 g. 01

Calculé

Poids deé-substance:.,,,....:1:. 0 g. 2565 SO,Ba correspondant............ 0 g. 1045

HOUSE Mage ve 5,6 DS P. Desgrez : 3