A. — EXPÉRIENCES

Expérience 1.

Il s'agit de deux animaux adultes (de poids supérieur à 100 grammes) dont l'un reçoit du sérum de rats immuns, l’autre (L 59) - servant de témoin — reçoit dans les mêmes conditions du sérum d'animal neuf.

L'injeetion infectante est réalisée par inoculation intrapéritonéale de 100 millions de globules rouges parasités en suspension dans { ce de sérum ; ce mélange d'hématies de rat infecté et de sérum avait été maintenu à létuve à 37° pendant une demi-heure. Au cours des 7 jours suivants, les deux animaux reçoivent quotidiennement dans le péritoine les mêmes doses de sérum, sérum immun pour l'animal en expérience, sérum normal pour le témoin. Dès le lendemain de l’impaludation, le rat L 58 présente une parasitémie plus faible que son témoin : le surlendemain le taux des globules rouges parasités baisse et reste à ce dernier niveau jusqu'au 6° jour ; à partir de ce moment, malgré la sérothérapie, la parasitémie s'élève : toutefois l'infection reste faible et elle est de brève durée.

Jours ( lendemain de l'inoculation) il 2 3 cl 5 6 vs 9 ul Rat L38 GRP p. 100 GR MOT MOI MOTANON EEE MOUS 2 0 Rat L59 GRP p. 100 GR - 10-19 OP SAT? OO RON (témoin) Sérum (en ce) 2 2 À 2 0,52 1

Expérience 2.

Ce sont encore des animaux adultes. L'injection de sérum est faile en même temps que l'inoculation de 200 millions de globules rouges parasités. Les injections de sérum sont répétées les Æ jours suivants à la dose de 1 ee : les deux animaux testés L'S5, LS#) reçoivent du sérum prélevé chez des rats immuns où hyperimmuns, le témoin (L 82) reçoit du sérum d'animal neuf.

La parasitémie, qui après 24 heures à atteint un taux: normal, de Lou 1,5 p. 100, S'abaisse le surlendemain à 1 p. 1.000 : elle selève ensuite très faiblement pour atteindre les taux respectifs de Let 3 p, 100 !e 5° jour qui suit l'impaludation, L'infection est alors très faible et brève. L'établissement du pourcentage des réticulocytes montre qu'ils ont un taux égal ou supérieur à op. 100 : l'infection aurait done pu s'élever davantage s'il n'y

HQE

avait eu l'intervention du sérum ; et ce qui le confirme, c’est le parasitisme de tous les réticulocytes chez le témoin.

Jours 1 2 3 4 5 6 7 8

Rat L83 GRP p. 100 GR) 1 0,1 0,5 0223 2 0,1 0,02 Rét. (p. 100 GR) 3 5 8 8 20 10 25

Rat L84 GRP (id) 155 0,1 0,2 0,5 1 RO 200 Rét. (id) . 5 6 / 10 5)

Rat L82 GRP (id) 2 2 2 4 5 4 10

(témoin) Rét. (id) 4,5 9,5 3 6 10 15 20

Sérum (en cc) ï al 1 1

Expérience 3.

L'expérience est réalisée sur de petits rats de 50 grammes chez lesquels on a provoqué une augmentation de la réticulocytose par l'association saignée-5 gamma de vitamine B 42 quelques jours auparavant.

L'injection de sérum immun (mélange de sérums provenant des rats S9 hyperimmun, S 55 hyperimmun, S 76 immun) est faite 24 heures après l'inoculation péritonéale massive de parasites, alors que l'infection sanguine est déjà manifeste. La dose utilisée pour réaliser l’impaludation était de 60 millions de globules rouges parasités.

Rat Poids Sérum 24 D. 20: SRE 4 j.

(g.) (encc) «GRP Rét, GRP Rét. GRP. Rét. GRP Rét.

407 55 1 2 6 4 té 3,5 5 5) }

408 45 1 1,5 4 4 5 3 £ 2 3 (témoin)

409 65 1 19 15 12 12 12 6 6 6 (témoin)

Le lendemain de l'injection de sérum, l'infection s'est élevée nettement chez tous les rats. On pourrait done croire qu'il n’y a pas eu de séro-protection ; mais, 24 heures après la sérothérapie on remarque les faits suivants :

— chez les témoins, tous les réticulocytes sont parasités, et l'élévation de cette parasitémie est directement fonction du taux des réticulocyies :

— chez les rats traités par le sérum immun, la parasitémie quoique haute est nettement plus faible que ne pouvait le faire prévoir le taux des réticulocytes : il y à une proportion importante de réticulocytes libres.

Le 3 jour, l'effet du sérum a cessé.

D'où l'intérêt de suivre la réticulocytose dans ces épreuves de séro-protection ; on peut ainsi déceler une protection faible, qui passerait inaperçue par la simple numération des globules rouges parasités.

Expérience 14.

Jeunes rats de 50 grammes chez lesquels on a provoqué une augmentation de la réticulocytose (Comme dans l'expérience précédente) et qui reçoivent 1,2 ce de sérum dans la eavité péritonéale une heure avant l'inoculation infectante de 30 millions de globules rouges parasités.

Rat Poids Sérum provenant 18 h. 24 h. 2j. 3 j- (g.) (en cc) du rat GRP Rét. GRP Rét. GRP Rét. GRP Rét. 410 50 1,2 S 81 0,01 10 0177710 00 2 8 (immun) 411 47 1,2 S 96 OUT (he 25 7) OST 2 T0) (hyperimmun) 412 56 1,2 S97 (Sn RE 1) 0,2 10 (ER RET ES DSETS (hyperimmun) ; 113 42 1,2 neuf 1 10 2) AO AS 16 5 5 414 52 1,2 neuf 0,515 RS re Pa ET) 12 5 5

Chez les animaux traités par le sérum immun, la parasitémie est très faible après 18 heures et le reste jusqu'à la 48° heure. Elle s'élève le 3% jour, mais sans présenter l'ascension rapide que commande la réticuloevtose forte : il y a encore des rétieulocytoses libres. Ce n’est qu'à partir du 4 jour suivant l’injection péritonéale massive que l'infection est importante et correspond au taux des réticulocytes.

Par contre, chez les témoins la parasitérnie à la 18° heure est assez importante et s'élève encore rapidement pour atteindre 2 p. 100 à 1à 24° heure. La courbe continue à monter rapidement puisqu'un jour plus tard linfection est très importante : 10, 15 p. 100 ; tous les réticulocytes sont parasités. Signalons que la réticulocytose baisse ensuite, comme il est fréquent de le voir en cas de réticulecvtose provoquée avant infection.

La netteté des résultats obtenus ici nous fait penser que la dose infectante de 30 millions de globules rouges parasités est celle qu'il convient d’emplover de préférence, chez ces petits rats de 50 grammes.

Fig. Y

La

159 / 10 (témoin) /

18 24 48 heures 1 18 24 k8 heures

Graphiques destinés à montrer l’action protectrice du sérum de Rat hyperimmun.

En abcisses : les temps (comptés à partir de l’impaludation).

En ordonnées : la parasitémie et la réticulocytose. La parasitémie (GRP p. 100 GR) en traits pleins (Fig. NS ENVI VID) net

en trait discontinu (Fig. I: témoin) ; la réticulocytose (Rét. p.:100 GR) en pointillés.

Injections de sérum: flèches verticales en-dessous de la ligne des abcisses.

Fig. V. — Parasitémie chez le Rat adulte protégé par le sérum (L58, en trait plein) et chez son témoin (en traits discontinus) (expérience 1).

Fig. VI. — Parasitémie et réticulocytose chez 414, jeune rat sérvant de témoin à 412 (exp. 4). 2e

Fig. VII — Jd. chez 412 (exp. 4) : l’action protectrice du sérum se manifeste par le faible degré de la parasitémie et par l'écart entre le taux des GRP et celui des réticulocytes.

Expérience 5.

5 rats de 50 grammes environ reçoivent des doses de sérum de 1 ce et sont impaludés une heure après avec 40 millions de globules rouges parasités. Chez les 4 rats recevant le sérum d’animaux infectés où immuns, on avait provoqué par la technique habituelle une augmentation de la réticulocytose.

Le 415 et le 416 reçoivent du sérum prélevé en fin de primoinfection, quand la parasitémie était devenue très faible ;: les AT et A8 reçoivent du sérum d'animaux guéris depuis 6 semaines ; le témoin (419), qui ne reçoit pas de sérum neuf, n'avait pas été préparé comme les autres rats par saignée associée à vitamine B 12.

Rat Poids Sérum provenant 18 h. 24 h. PAM 3 j. (g.) (en cc) du rat GRP Rét. GRP Rét. GRP Rét. GRP Rét. 415 50 1 403 2 6 4 10 8 8 416 50 1 404 3 15 3 TOUS 13 417 47 1 L15 1,5 6 1PoR T0) D) 4 418 44 1 L 16 0,5 5 0510 155-413 D LS 0 2 3 3 3 3 3

À la 18° heure, chez tous, infection sanguine facile à conslater. Cependant elle est la plus faible chez les rats avant reçu le sérum des deux animaux immuns. L

Chez le témoin, de la 18° à la 24 heure, la parasitémie s'élève encore et tous les réticulocytes sont parasités.

Quant aux 415 et M6 (éprouvés avec du sérum prélevé en fin d'infection), la parasitémie ne s'élève pas de la 18 à Ia 24# heure chez l'un (#6), malgré 10 et 138 p. 100 de réticulocytes : elle s'élève chez l’autre rapidement. Après 48 heures, il y a une augmentation importante du nombre des globules rouges parasités et tous les réticulocytes sont parasités. Donc protection faible chez l’un (416, sérum de 404), non manifeste ou nulle chez le 415 (sérum de 403). Il est à noter que le 403, lors du prélèvement de sang avait une parasitémie de 1 p. 5.000 et le 40% de 1 p. 400 : il s'agissait done d'infections tout à fait à leur terme.

Sous l'influence du sérum de rats immuns depuis 6 semaines (L15, L16), l'infection reste stationnaire entre la 1& et la 24° heure et ensuite s'élève faiblement, eu égard au nombre important de réticulocytes. On est en présence d'une protection manifeste mais assez faible. Toutefois il faut noter que l’injection infectante était plus importante que dans les expériences

précédentes, et CoccessHaLz et EaTon [14]) ont insisté, dans l'étude du paludisme simien, sur la proportionnalité nécessaire des doses de sérum et d’inoculat.

Expérience 6.

10 rats de 50 granunes environ, chez lesquels on à provoqué une augmentation, de la réticulocytose. L'injection infectante (de 20 millions de globules rouges parasités) est réalisée une heur2 après l’inoculation intrapéritonéale de sérum provenant de rats hvperimmuns.

Rat Poids Sérum provenant 18 h. 24 h.

(g.) (en cc) du rat GRP Rét. GRP Rét.

S 205 55 1 S 76 0,2 4 0,1 S 206 45 0,7 S 4 0,2 6 0,05 S 207 50 1 317 0,1 5 0,03 S 208 42 0,7 211 0,1 7 0,1 S 209 42 0,6 415 0,1 3 0,1 S 210 418 1 346 0,1 6 0,2 S 211 55 1 L 16 (HET 0 0,05 S 212 p2 d SD 0,1 5 0,1 S 213 46 k neuf 0,2 3 1 S 214 51 1 neuf 025612 il Rat Poids Sérum provenant ANT 3] 4 j. Sie 801 (g.) (en cc) du rat GRPSRETASGRPEGRPÉ CRE AGREE S 205 55 1 S 76 ù SOUS S 206 45 0,7 S 4 2,5 6 10 S 207 50 1 531 0,7 8 4 S 208 42 0,7 211 0,03 3 0,03 0,02 0,03 2 S 209 42 0,6 T5 0,055 2 S 210 18 1 346 0,5 5 3 SAT 55 1 L 16 022812 2 S 212 52 1 S 55 1,5 5 À S 213 46 1 neuf 2 3 4 S 214 5% 1 neuf 8 8 5

Chez tous, la parasitémie est faible à la 18 heure. À la 2% heure, elle s’est élevée chez les témoins, mais non chez les rats qui ont reçu le sérum de rats hyperimmuns : elle baisse même chez 4 d’entre eux. Le 2° jour, chez 3 animaux (S 205, S 206, S 212), le pouvoir protecteur du sérum n'est plus manifeste ou n’a plus qu'un effet très faible ; tandis que l'effet se prolonge encore une journée chez S 210, S 211, S 209, S 207 et dure chez S 208 pendant plus de 5 jours.

Expérience 7.

Rats d'environ 50 grammes, avec réticulocytose forte : une heure avant impaludation par 20 millions de globules rouges parasités, ils reçoivent dans la cavité péritonéale 4 cc de sérum. Les deux témoins (L120 et L121) reçoivent du sérum de rat neuf : les L413 et LA14 reçoivent du sérum prélevé chez les 346 et L 16, 20 jours après la prise de sang qui à servi à l'expérience 6 où a été décelé un pouvoir protecteur ; les L116 et L118 reçoivent du sérum prélevé chez Îles S4 et 317, rats immuns qui étaient splénectomisés depuis 19 jours sans réveil de la parasitémie (ils n'en ont pas présenté non plus au cours des 30 jours suivants), et dont le sérum, avant ablation de la rate, s'était révélé protecteur (expérience 6). Pour rechercher si la splénectomie ou la simple saignée font baisser le pouvoir protecteur, il n’a pas été fait d'injection de rappel à ces 4 rats : 346, L'16, S 4, 317. | |

Aucun pouvoir protecteur n’est appréciable dans le sérum du 346, ou peut-être existe-il encore une action très faible puisque le 2 jour il y a des réticulocytes libres en proportion assez importante ; les trois autres sérums ont un pouvoir protecteur manifeste. La splénectomie, non suivie de réveil de paludisme, n’a done pas provoqué un fléchissement des facteurs de défense humoraux.

Rat Poids Sérum provenant 18h. 24 D. 2j. SJ.

(g.) (en cc) du rat GRP Rét. GRP Rét. GRP Rét. GRP Rét.

3148 54 1 346 0,2 5 0,5 5 4 6 5 5 L 114 52 1 L 16 0,05 3 0,1 SRMOSl 5 ISSUES L 116 56 1 S 4 0:05 7 0,2 ÿ 0,7 10 6 6 L 118 45 1 317 0,02 7 0,1 7 0,7 % IS LA2ONRREST 1 neuf DS 0 fl 7,507

L121 50 il neuf 0,3 5 0,7 6 7 8

Expérience 8.

Dans cette expérience, le sang riche en parasites destiné à l'épreuve a été prélevé chez un rat lors de la crise.

4 rats de 30 grammes sont préparés par saignée-vitamine B12. Une heure avant l'impaludation, ils reçoivent dans leur cavité péritonéale le sérum à tester ; ce sérum provient de rats à Ja période de déclin de leur accès de primo-infection (stade IV), présentant une parasitémie de 1 à # p. 100 ; les rats 134, 433, 436 reçoivent 1 ce de sérum prélevé respectivement chez

RME UE Éd :

Serre

les rats L51, L 49, PS8 ; au rat 437, on injecte 0,8 ce de sérum debit.

Un cinquième rat de 50 grammes (438), dont la réticulocytose n'a pas été artificiellement augmentée et qui ne reçoit aucune injection de sérum, est inoculé, en même temps que les précédents, avec le même matériel infectant et aux mêmes doses : 20 millions de globules rouges parasités prélevés chez un animal à la période de crise de sa primo-infection (stade II).

Les courbes de parasitémie sont les mêmes chez les 3 animaux.

434 435 436 437 438 CG PMR CEE CGR PPRARÉ ES GREP LV Rét; GRP Rét. :: GRP, Rét. 18 h. 0,3 10 0,3 10 0,2 12 0,3 10 0,2 6 24 h. 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Faute de véritable témoin (le 438 n'a pas reçu de sérum de rat neuf), on ne peut tirer de la parasitémie aucun renseignement sur le pouvoir protecteur des sérums emplovés. Mais il nous à été donné de faire deux constatations :

a) I n'y a pas eu élévation de la parasitémie entre la 18° et la 24° heure, et seulement élévation faible, par rapport au nombre des réticulocytes, le deuxième jour. Ceci est bien différent de ce que l’on observait dans les expériences précédentes chez les animaux où ne jouait pas le pouvoir protecteur. Ce phénomène nous semble manifester la présence d’un pouvoir opsonisant in vivo dans le sang du rat donneur (c’est-à-dire de celui qui a fourni l’inoculat *infectant), pouvoir qui se révèle chez les rats receveurs par une action freinatrice sur l’ascension de la parasitémie. Ce pouvoir opsonisant dans le sang prélevé lors de la cerise a déjà été vu par A. ZuCKERMAN avec P. gallinaceum [101!

b) Chez un des rats (436) ayant reçu du sérum, on a prélevé, par ponction, de la sérosité péritonéale. Celle-ci présentait une densité de macrophages et des images de phagocytose plus marquées que chez le rat 438. Cette augmentation de la réaction macrophagique péritonéale est sans doute un effet du sérum testé.