V. — Urée

Quel que soit l'intérêt que présente la recherche de l'acide urique, de l'acide hippurique, de la guanine et de la taurine, on peut

dire qu’il est presque nul en présence de celui qui s’attache à la

constatation de traces d’urée, si petites qu’elles soient, dans la sécrétion bojanienne de la Moule commune.

L’urée est en effetle corps que l’on doitregardercomme l’élément caractéristique de l’urine de l’homme et des animaux supérieurs. On peut, il est vrai, en trouver des traces dans d’autres humeurs, le sang et la lymphe, par exemple, ou même dans divers tissus, comme les muscles des Plagiostomes, mais l’urine estson véhicule par excellence, et le rein son organe éliminateur. Aussi, malgré les réserves qu'il convient à priori de faire sur l’identité possible ou simplement probable des fonctions chez les êtres qui appartiennent à des types zoologiques différents, constater la présence de l’urée chez la Moule, c'était, si la découverte était étendue à d’autres Mollusques, fixer d’une facon sinon indiscutable, du moins infiniment probable, le rôle physiologique de l’Organe de Bojanus des Mollusques acéphales.

A deux reprises différentes j’ai cherché et j’ai trouvé de l’urée dans la sécrétion bojanienne de la Moule. Je l'ai préparée en nature et jen ai essayé le dosage par les méthodes ordinaires. On verra plus loin comment cette découverte a été étendue à l’Anodonta cygnea, à V'Anodonta anatina,au Cardium edule, et, suivant toute vraisemblance, au Cyclas corneus.

Lorsque j'ai cherché, pour la première fois, l’urée dans l'Organe de Bojanus de la Moule, je me suis servi de près de quatre cents animaux (je ne les ai pas comptés), dontj'ai mis les Glandes dans l'alcool à 90° pendant dix jours. Puis, les ayant triturées dans un mortier, je les ai traitées à nouveau par l’alcool. Ayant filtré ces liquides, j'en ai chassé l'alcool au bain-marie, puis j'ai repris par l’eau, j'ai filtré pour enlever les graisses, et j'ai concentré à consistance sirupeuse. J’ai alors traité le sirop ainsi préparé par l’alcool absolu et bouillant, et j'ai abandonné au repos pendant vingt-quatre heures. Ce temps écoulé, il y avait au fond du vase un dépôt solide, et au-dessus un liquide alcoolique peu coloré. J'ai décanté

celui-ci avecprécaution, j’en ai chassé l’alcool par la chaleur, et j’ai

repris par l’eau. Cette opération était destinée à éliminer les dernières traces des corps gras, mais la graisse propre à la Moule étant soluble dans l’eau pure, le liquide qui a passé n'a rien abandonné au filtre, et il est resté coloré. Je lai mis alors en présence du sous-acétate de plomb ; il s’est formé un abondant précipité ; j'ai attendu qu'il se fût déposé au fond du vase et j'ai filtré. Le liquide que j'ai obtenu était limpide ; mis commeil contenait un excès de sel de plomb, j'ai dû, pour m’en débarrasser, le soumettre à l'action de l'acide sulfhydrique passant jusqu'à refus. Douze heures après, j'ai filtré, etj’ai obtenu un liquide d’une limpidité parfaite, qui néanmoins m’a donné par concentration un liquide sirupeux assez fortement coloré. Ainsi toutes les précautions employées n’ont pu débarrasser la liqueur de sa couleur roussâtre, et, lorsque l’ayant additionnée d’une goutte d’acide azotique, j'ai ob— tenu par une longue exposition sur l’acide sulfurigre des cristaux d’azotate d'urée, ceux-ci se sont trouvés placés au sein d’une masse brunâtre. Or cette masse colorée rendait assez difficile l’observation microscopique des cristaux, parce que, excessivement déliquescente, elle absorbait rapidement l'humidité de l'air et alors tombait en déliquium. Malgré cet inconvénient, j'ai vu que les cristaux avaient bien les formes de l’azotate d’urée ; je ne me suis pas contenté de les observer seul, je les ai fait regarder par d’autres personnes qui n’ont pas hésité à se prononcer comme moi et à les reconnaître pour des cristaux d’azotate d’urée. Cela ne m'a pas suffi. Voulant être absolument sûr de ce que j’avance, j'ai eurecours aux deux réactions que je vais maintenant donner et qui ne laisseront, je l'espère, aucun doute dans l’esprit de ceux que ces questions peuvent intéresser. Il faut observer en effet que les azotates alcalins présentent des formes cristallines trs voisines de celles de l’azotate d’urée et que la confusion est possible : aussi faut-il toujours recourir à des preuves plus certaines que celles qui résultent de la similitude des cristaux.

1° Quand on traitait sur une lame porte-objet un certain nombre

des cristaux que j'avais préparés par la liqueur de Millon, il se manifestait une vive effervescence. Orles bulles de gaz que l’on observait ne pouvaient évidemment provenir d’un azotate alcalin qui se dissout dans ces conditions sans dégagement gazeux.

2° Lorsque l’on croit qu’un liquide exempt de substances albuminoïdes renferme de l’urée’, on peut s’en assurer, comme Knop l'a indiqué , en le traitant par l’hypobromite de soude qui décompose l’urée en acide carbonique et en azote ; l’acide carbonique est absorbé par l'excès de soude caustique, l'azote seul reste indissous, et de son volume on déduit le poids d’urée contenu dans la liqueur. Dissolvant l’azotate d’urée que j'avais préparé dans l’eaudistillée, jai fait agir sur lui l’hypobromite de soude et j’ai obtenu de l'azote, d’où j'ai conclu pourla seconde fois que je n'avais pas affaire à un azotate alcalin, mais bien à de l’azotate d’urée.

Mais ce n’est pas tout : l’hypobromite de soude permet de doser l’urée que contient un liquide animal, si l’on a eu soin d’éliminer les matières protéiques ; alors j’aicherché combien il pouvait y avoir d’urée dans l'extrait préparé au moyen des Organes des quatre cents Moules. Les résultats que j’ai obtenus n’ont pas été exacts, parce qu'ily avait eu plusieurs fois perte de matière pour mes différentes observations ; je suis plus tard arrivé à connaître plus exactement la richesse en urée de la sécrétion bojanienne de la Moule ; néanmoins je vais donner mon premier dosage, parce qu’il a été fait avec le plus grand soin, que je n’étais pas seul à le faire, et par conséquent sous l'influence des erreurs involontaires que commet souvent celui qui n’a avec lui personne pour lui signaler les causes d’insuccès de ses analyses.Je me suis servi, pour faire mon dosage, des appareils du D" G. Noelet de Dannecy, qui ne sont que des modifications de celui d’Esbach. J’ai mis le résidu fort réduit que les quatre cents Moules m’avaient fourni dans deux centimètres cubes d’eau, et les introduisant dans le mélangeur, jai, par l’action de l’hypobromite de soude, obtenu cinq centimètres cubes d'azote : la tempé-

rature était de 28°,5. De cette expérience j'ai conclu qu'il y avait

0g.013 d’urée dans l'extrait analysé. Si l'on admettait que celui-ci n’eût point éprouvé de pertes, cela ferait Og.00008 d’urée par animal ; mais des expériences postérieures, faites avec toutes les garanties désirables, m’ont fourni le nombre 0g.00045, et c’est celui que j'adopte pour le poids moyen de l’urée qu’on trouve dans l'Organe de Bojanus d’une Moule d'Isigny.

On ne peut pas objecter, contre la méthode analytique que j’ai suivie, que l’hypobromite de soude ne donne pas seulement naissance à un dégagement gazeux en présence de l’urée, mais que le même phénomène se produit quand le liquide renferme des urates, des matières albuminoïdes, de la créatine et de la créatinine. Des urates, la sécrétion bojanienne de la Moule n’en renferme pas ; quant aux substances albuminoïdes, iln’en reste plus après le traitement qu’on a fait subir à l'extrait pour préparer l’urée. Restent donc la créatinine et la créatine : il y a fort peu de l’une et de l’autre, parce que la première est presque insoluble dans l'alcool absolu à la température ordinaire, et que la seconde ne s’y dissout pas du tout. Et puis, pour produire cinq centimètres cubes d’azote, il ne faudrait pas moins de 1 g. 112 de créatinine, quantité évidemment supérieure à celle que quatre cents Moules peuvent fournir.

Malgré le bien fondé de ces observations, j’ai cru devoir recommencer le dosage de l’urée de la Moule et, pour être à l’abri des erreurs que les traces de créatine etde créatinine pouvaient entrainer, je me suis servi de la liqueur de Millon employée à froid. Mais alors opération est très lente, ce n’est qu’au bout de plusieurs jours que l’on peut considérer la décomposition comme terminée ; et comme, en l’état de nos connaissances, il n’y a point une importance majeure à savoir combien au juste chaque animal renferme d’urée dans ses Sacs de Bojanus, je ne retiendrai de l’analyse que j'ai faite que ce résultat capital qu’il s’est dégagé encore de l'azote.

Ainsi l’on trouve de l’urée dans l’Organe de Bojanus de la

Moule, et cette importante observation est basée :

1° Sur la préparation à l’état d’azotate de l’urée qu’on en peut tirer ; È

2° Sur sa décomposition par l’hypobromite de soude et par la liqueur de Millon.

Le lecteur trouvera, dans le dernier chapitre de ces recherches, des détails complémentaires sur la production de l’urée chez les Mollusques, et il ÿ verra notamment que j'ai trouvé de l’urée dans l’Organe de Bojanus de tous les Mollusques acéphales chez lesquels je l'ai cherchée, tandis qu’il ne m’a pas été possible d’en découvrir

chez les Mollusques gastéropodes.