I. — Recherche de l'acide urique

J’ai cherché l'acide urique chez :

Ostrea edulis,

Pecten maximus,

Pecten varius,

Pinna verruculatus,

FONCTION URINAIRE CHEZ LES MOLLUSQUES ACÉPHALES. 97 Pectunculus pilosus, ;

Anodonta cygnea,

Anodonta anatina,

Unio batava,

Cardium edule,

Cardium Pennanti,

Cardium norvegicum,

Cyclas corneus,

Tapes decussata,

Tapes pullastra,

Cytherea chione.

Mactra solida.

Tellina solidula.

Donazx anatina,

Solen ensis,

Pholas dactylus,

Pholas candida,

Pandora rostrata.

C'est-à-dire chez vingt-deux espèces différentes appartenant à dix familles distinctes de Mollusques acéphales, les unes pourvues de siphons et les autres n’en ayant pas.

Je n’ai pu trouver de traces d’acide urique ou d’urates chez aucun de ces Mollusques, quel qu’aitété le soin apporté aux analyses ou le nombre des animaux soumis à l'expérience. Et cependant nous avons déjà vu qu'une seule Æélix aspersa ou pomatia suffit à ce genre de recherche.

Il n’est donc pas vraisemblable que mes résultats soient entachés d'erreur, que la couleur de la murexide ait passé inaperçue à mes yeux, que j'aie confondu une teinte avec une autre. Evidemment aucun de ces Mollusques ne renferme d’acide urique dans ses Sacs de Bojanus.

Si, au lieu de traiter les Glandes par l'acide azotique et l’ammoniaque, on les met digérer en présence de la potasse caustique,

ARCH, DE ZOOL. EXP. ET GÉN. — 2° SÉRIE, — T, V bis, suppz. 1887, — Aer Mem. 7

à froid ou à chaud, peu importe, on n’obtient pas davantage de traces d'acide urique quand ensuite on verse dans la liqueur de l’acide chlorhydrique ou de l'acide acétique.

La Mactra solida m'a fait voir dans les tissus de sa Glande des cristaux qu’à leur aspect j’ai pris pour des mâcles d’acide urique. Mais j'ai reconnu mon erreur quand je les ai traités par l’acide azotique et l’ammoniaque, car je n’ai point obtenu de murexide. Il serait à craindre que les cristaux observés par le professeur Lacaze- Duthiers ne fussent pas également des cristaux d'acide urique : l'apparence était la même, c’est vrai, mais l’analyse n’en a pas été faite d'une facon suffisante.

On sait que de Babo, en analysant , à la prière de Siebold, les concrétions que ce savant avait retirées de l’Organe de Bojanus d’un Pectunculus pilosus, y a découvert de l'acide urique. Voït, qui a eu l’occasion de recommencer l’analyse sur des concrétions extraites des Corps de Bojanus d’un autre Pectunculus pilosus, n’en a pas trouvé. Pour moi, étant parvenu à me procurer deux Pectunculus vivants, j'ai cherché dans leur Glande l’acide urique ou des urates, et je n’ai rien trouvé. En faut-il conclure que de Babo s’est trompé ? certainement non ; car l’admettre, ce serait dire que les concrétions ont toujours chez une même espèce de mollusque la même composition, alors que tout prouve le contraire et que nous voyons des différences physiques et chimiques exister entre des calculs appartenant, non pas à des individus différents d’une même espèce, mais au même mollusque et retirés de la même glande. Je regarde donc comme exacts les résultats des analyses de Babo et de Voit, c’est-à-dire que j'admets que la composition des concrétions, des calculs qu’ils ont étudiés, était différente, quoiqu'ils fussent extraits de l’Organe de Bojanus d’animaux de la même espèce, parce que c’est la seule conclusion qu'on puisse logiquement tirer des travaux de ces chimistes.

Quant à l'analyse que j'ai faite, elle portait sur la Glande elle-

même du Pectunculus et non sur ses produits pathologiques. Si je

n'ai pas analysé les calculs de ce mollusque, ce n’est pas faute de les avoir cherchés avec soin ; mais les cellules des deux individus que j'ai étudiés ne renfermaient absolument que ces granulations microscopiques qui sont en quelque sorte le caractère distinctif des cellules bojaniennes ; de calcüls, de graviers , voire même de sables, il n'y en avait pas trace. J’en ai donc été réduit à chercher l'acide urique ou les urates dans la Glande, et elle n’en renfermait pas. Mon expérience, par conséquent, ne confirme ni n’infirme les recherches de Babo et de Voit.

Ilne semble pas vraisemblable que l’on puisse prétendre que l’absence d’acide urique tient à l’âge du mollusque, à l’état d’activité ou de ralentissement de ses fonctions vitales, au fond qu’il habite. Ces objections seraient dans tous les cassans fondement pour la Moule, chez laquelle j'ai pu poursuivre la série de mes recherches pour ainsi dire mois par mois. Et non seulement l’époque de l’année est sans importance ; mais il en est de même dela taille de l'animal et du lieu où il vit. J’en ai étudié de microscopiques, de moyennes et de très grandes ; j'ai disséqué des Moules qui avaient vécu sur des fonds légèrement vaseux, sur du sable et sur le rocher ; j'en ai fait venir de Vierville, de Trouville, d’Isigny et de Granville, et jamais je n'ai trouvé cet acide qu’on dit spécialement sécrété par l’Organe de Bojanus des Mollusques acéphales.

Riche en a pourtant trouvé chez la Lutraire ; maïs ce n’est pas dans la Glande qu'il l’a découvert, c’est duns la poussière qui en sortait quand on ouvrait les Sacs sous l’eau : c’est-à-dire que, comme de Babo, c’est dans un produit pathologique qu’il l’a trouvé. Il serait bien curieux de savoir si toutes les Lutraires renferment cette poussière d'acide urique dans leur Organe de Bojanus, et si cela n’est pas, siau moins toutes celles qu’on peut recueillir à Saint-Jacut-

la-Mer sont atteintes de cette diathèse urique.

II. — Acide hippurique. — Guanine. — Taurine. — Produits biliaires.

N'ayant pas trouvé d'acide urique, j'ai cherché s’il ne serait pas remplacé dans la sécrétion bojanienne de certains mollusques par l'acide hippurique. Mes analyses ont été faites sur les Organes dissociés de l’Anodonta cygnea, de l’Anodonta anatina et du Cardium edule. J'en ai traité les Glandes de Bojanus par un lait de chaux, puis j'ai sursaturé le liquide filtré par acide chlorhydrique. Je n’ai obtenu par cette méthode aucun cristal ayantles formes ou

les propriétés de l’acide hippurique.

La découverte de la Gruanine chez l’Anodonte par Wil et Gorup Besanez, découverte dont la réalité était contestée par Voit, a nécessairement attiré mon attention. À différentes reprises, j'ai essayé d'isoler ce corps en traitant, suivant la méthode ordinaire, les Organes dissociés de plusieurs centaines d’Anodonta cygnea ou anatina, mais cela a toujours été en vain. J’ai bien obtonu des cristaux, mais c’étaient des aiguilles de‘ taurine et non de la guanine. En effet, les longs cristaux qui s'étaient précipités avaient les formes et la transparence de la taurine, ils en avaient de plus la solubilité dansl’eau, l’insolubilité dans l'alcool et dans l’éther, et

enfin la composition, car ils renfermaient du soufre.

Les produits biliaires m'ont longtemps occupé et ont été cause que j'ai fait de bien nombreuses recherches, fort inutilement du reste. À la suite de quelques expériences insuffisantes, quoique conformes aux indications des auteurs, jai cru pendant très longtemps que ces corps, acides ou non, existaient chez les Mollusques acéphales. Mais je me suis assuré, en éliminant avecsoin les causes

d'erreur, notamment l’alcooi, l’éther et le chloroforme, qu’au-

un corps de cette nature n’existe dans l'Organe de Bojanus des Anodontes, du Pecter maximus, du P. varius, du Cardiuwm edule, du C. Pennanti, du Tapes decussata, de la Cytherae chione, de la Mactre, de la Telline, du Solen et des Pholades. On voit que je les ai cherchés chez presque tous les Mollusques dont j’ai pu disposer. J'ai employé, dans mes recherches, diverses méthodes qu’on trouve indiquées dans tous les Traités dephysiologie; etcomme je ne trouvais rien, j'ai fini par traiter directement l’Organe de Bojanus que J'étudiais par l’acide azotique nitreux et à la température ordinaire. Des expériences comparatives faites sur la bile de mouton ou de bœuf m’auraient permis de me rendre compte dela valeur et de la succession des teintes que j'aurais dû observer si des principes biliaires avaient existé. Mais je ne suis jamais parvenu à voir autre chose que le coagulum produit par les substances albuminoïdes et la couleur jaune rouge que prend le liquide saturé d’acide xanthoprotéique. La dernière méthode que jai employée a sur les autres l'avantage d’être applicable aux corps qui, commela biliverdine, ne

sont pas solubles dans l’eau.

III. — Graisse soluble dansl’eau de l’Anodonte et du Cardium edule. — Créatinine.

La préparation de l’Urée et, en général, de tous les sels qui se trouvent dans la sécrétion bojanienne des Mollusques acéphales est rendue excessivement diffcile par la présence d’une graisse soluble dans l’eau, que j'ai déjà signalée à propos de la Moule. L'étude que j'en ai faite chez les Mollusques autres que celle-ci est si sommaire que je ne hasarderai rien sur sa composition et sur ses autres propriétés.

Avec le Cardium edule et avec les Anodontes, j'ai préparé quelquefois des extraits éthérés ou alcooliques ; je n’en ai fait qu'un

examen sommaire au microscope, et la seule chose que je puisse

en dire, c’est qu’ils m'ont paru renfermer des aiguilles de stéarine et de margarine, et des cristaux volumineux de créatinine et de créatine.

La créatinine est du reste facile à reconnaître à ses formes cristallines. On l’obtient encore comme produit accessoire quand on prépare l’urée, et c’est ce qui m’a permis d’en faire un dosage approximatif chez le Curdium. Ayant en effet préparé lurée que contenait l’Organe de Bojanus de 417 Cardium, j'avais obtenu la créatinine de ces animaux comme résidu insoluble dans l’alcoo!l absolu et froid. J’en ai dissous le quart dans dix centimètres cubes d’eau chaude, et, mettant deux centimètres de la liqueur en présence de l’hypobromite de soude, j'ai obtenu 0,8cc d’azote. Si toute la créatinine avait été décomposée, il y auraiteu 16 centimètres cubes d'azote, c’est-à-dire 0,02g d'azote, ce qui correspond à 0, 054g de créatinine. Un seul Cardium en avait quatre cents fois moins ou 0, 00018.

Ce poids est précisément celui qui a été précédemment trouvé pour la eréatinine contenue dans l’Organe de Bojanus de la Moule. Il n’en faudrait pas conclure que le Cardium en élimine autant dans le même espace de temps. L’expérience ne donne à ce sujetaucune indication ; en voir une, serait commettre la mêmeerreur que celui qui, ayant grossièrement détaché les reins d’un chien et d’un chat, par exemple, prétendrait par le dosage de l’urée qu’il y aurait trouvée pouvoir comparer la sécrétion de ces deux animaux. Une seule chose était importante à connaître, c’est à savoir que le Cardium éliminede la créatinine. On pouvait, à titre de curiosité, chercher si chaque Glande en renferme peu ou beaucoup ; mais les conditions de l’analyse sont si défectueuses que les causes d’erreur y abondent et qu’il ne faut attribuer aux résultats que l’on obtient aucune importance réelle. Le hasard seul m'a fait trouver le même nombre, et l’unique conclusion à tirer de mon essai de dosage est que le Cardium, tout comme la Moule, renferme une très petite quantité de créati-

; He ue nine dans sa sécrétion bojanienne.

IV.— Recherche de l’Urée chez l'Anodonte cygnea, l’A. anatina, le Cardium edule et le Cyclas corneus.

Longtemps avant’ de l'avoir découverte chez la Moule, j'avais cherché l’urée dans la sécrétion bojanienne de l’Anodonta cygnea ot de l’Anodonta anatina.lJ’avaismême été assez heureux pour l’obtenir en nature, et j’en avais préparé l’azotate et l’oxalate. Je ne l’avais cependant point reconnue, parce que, comme rien neressemble autant aux sels d’urée que certains cristaux d’azotate et d’oxalate de soude ou de potasse, j'avais eru devoir m’assurer que les cristaux que j’observais satisfaisaient à la réaction caractéristique des sels d’urée, c’est-à-dire que j'avais cherché à voir si, chauffés sur une lame de platine, les cristaux disparaissaient sans laisser de traces. On sait que s’ilen reste, que si elles sontalcalines surtout, on n’a point affaire à de l’urée, mais à un sel de soude ou de potasse. Or, en chauffant ainsi les cristaux que j'avais préparés, ilsne disparaissaient point entièrement, il restait toujours une tache blanche qui, dissoute dans une goutte d’eau, lui communiquait des propriétés fortement alcalines. Que conclure ? que les cristaux étaient des sels de soude ou de potasse.

Lorsque près d’une année après, pour remplir un programme que je m'étais tracé à l'avance, j’en suis arrivé à chercher s’il existait de l’urée dans la sécrétion bojanienne de la Moule, quoique mon espoir d’en trouver fût presque nul, je crus devoir modifier ma méthode d'analyse etj'employai le réactif ordinaire de tous les laboratoires de physiologie, lhypobromite de soude. J’ai été assez heureux pour obtenir ainsi de l'azote, autrement dit pour constater qu’il existe de l’urée dans la sécrétion de l’Organe de Bojanus de la Moule ; alors j'ai repris immédiatement mes premières recherches et je n’ai pas tardé à me convaincre que les taches jadis obser-

vées tenaient aux impuretés qui souillaient les cristaux, et qu’en

les choisissant ils disparaissaient entièrement ; qu’enfin traitée par l'hypobromite ou la liqueur de Millon, leur solution fournissait de azote, ce que n’ont jamais fait les azotates alcalins. Ainsi le doute n’était plus possible et il était démontré que les cristaux depuis si longtemps préparés étaient bien, comme je l’avais un instant soupçonné, des cristaux d’urée.

On me pardonnera, je l'espère, à cause de l'importance du sujet, ce long exposé de mes hésitations. Peut-être rappellerai-je à quelques-uns combien ils onteu de peine au début de leurs recherches à caractériser certains principes organiques dont ils n’avaient que des traces et qu’ils ne pouvaient purifier, alors que par surcroît leur aspect et leurs formes cristallines se trouvaient modifiés par la présence de corps étrangers.

Après les Anodonta, j'ai étudié le Cardium édule, puis enfin, mais succinctement, le Gyclas corneus. Je vais commencer par l’'Anodonta cygnea.

J’ai préparé l’urée de ce mollusque de la facon suivante : j'ai enlevé les Organes de Bojanus de 400 Anodonta cygnea environ qu'un ami m'avait envoyées de Torigny-sur-Vire, et je les ai mis au fur età mesure dans l’alcool à 90°. Après trituration et filtration, j'ai évaporé à consistance de sirop épais, puis repris par l’alcool absolu bouillant. L’alcool, décanté après repos et au bout de vingt-quatre heures, a été chassé au bain-marie, le résidu repris par l’eau et les phosphates éliminés par l’eau de baryte. J’ai filtré, puis précipité l'excès de baryte par un courant d'acide carbonique passant jusqu’à refus, filtré encore une foiset concentré à consistance de sirop. Enfin, mettant dans un endroit frais, j’ai achevé la dessiccation sur l'acide sulfurique.

J’ai obtenu ainsi des cristaux ayant l'aspect de l’urée, et tels qu’on les trouve dessinés dans les atlas de Robin et de Funke. Avec l'acide azotique et l'acide oxalique, ces cristaux m'ont donné des formes identiques à celles de l’azotate et de l’oxalate d’urée ; mais il m’a

fallu choisir pour ces expériences les cristaux les plus nets, car ils

sont en général souillés par des matières étrangères. Un de ces mêmes cristaux bien propre, mis sur une lame de platine, disparaît quand on chauffe sans laisser de trace bien sensible. Enfin, par l’'hypobromite de soude et par la liqueur de Millon, on obtient avec ces cristaux ün dégagement d’azote.

J’ai employé avec le même suecès le même moyen pour préparer l'urée del” Anodonta anatina ; cela ne fait donc aucun doute pour moi que les Anodontes renferment de l’urée dans leurs Sacs de Bojanus.

Le Cardium edule, vulgairement appelé coque, m’a également fourni de l’urée. Abandonnant pour la recherche de ce corps la méthode que j'avais précédemmentsuivie, j’airecouru, sans avantage du reste, à celle qui est préconisée pourextraire l’urée des muscles des poissons plagiostomes, méthode qui ne diffère de la précédente que par la substitution du sous-acétate de plomb à l’hydrate de baryte, et par conséquent de l’acide sulfhydrique à l'acide carbonique.

Mon expérience a porté, je crois l'avoir déjà dit, sur 417 Cardium edule ; j'ai préparé 40€ d’un liquide dont 22€ m'ont fourni 1,8cC d’azote. J'en ai conclu que si les 400 avaient été décomposés, j'aurai obtenu 36€€ d'azote, lesquels correspondent à 0, 097 d’urée, c’est-à-dire qu’un seul Cardium avait en moyenne 0,00023 d’urée dans sa Glande. Ce poids est inférieur à celui que des analyses récentes ont assigné pour l’Organe de Bojanus de la Moule. Mais j'ai déjà dit que, suivant toute vraisemblance, des comparaisons de ce genre n'avaient ni fondement, ni utilité, et qu’une seule

chose, l’existence même de l’urée, avait ici de l'importance.

J'ai voulu voir sile Cyclascorneus, qui est assez commun dans les ruisseaux, renferme aussi de l’urée ; mais comme la dissection d'un animal aussi petit m’a paru trop longue, j'ai ea recours à la méthode que j’ai si justement qualifiée de barbare : j’ai trituré les animaux avec leur coquille dans un mortier. J’ai ajouté de l’eau,

j’ai filtré, j'ai fait bouillir pour coaguler les substances albuminoï-

des, j'ai filtré encore une fois, et j'ai enfin traité le liquide par l’hypobromite de soude et par la liqueur de Millon. Avec l’un et avec l’autre de ces réactifs, j’ai obtenudel’azote, d’où j'ai concluque le Cyelas corneus sécrète de l’urée. Maïs par où s’élimine-t-elle ? — Probablement par l’Organe de Bojanus.

Ainsi, chaque fois que, par le nombre des individus que je pouvais me procurer, il m'a été possible de chercher l’urée dans lasécrétion bojanienne d’un Mollusque acéphale, je l’ai toujours trouvée. C'est là un résultat à opposer au suivant : chaque fois que j'ai cherché l'acide urique dans lasécrétion bojanienne d’un Mollusque

acéphale, je ne l'ai jamais trouvé.