CHAPITRE III

ÉTUDE DE LA SÉCRÉTION BOJANIENNE DE LA MOULE COMMUNE . (Suite).

LES SUBSTANCES ALBUMINOIDES QUE RENFERME L'EXTRAIT BRUT DE L'ORGANE DE BOJANUS DE LA MOULE SONT : DE LA SÉRINE, UNE ALBUMINE ET UNE FIBRINE PROPRES A LA MOULE, ENFIN UN ALBUMINATE A BASE INDÉTERMINÉE PLUS OU MOINS ANA- LOGUE À LA CASÉINE. IL Y A AUSSI DE LA MUCINE.

Quand on a constaté qu'un liquide renferme des matières albuminoïdes, il n’y a plus qu’à chercher si une seule substance est dissoute, ou s’il y en a plusieurs. Le dernier cas est le plus fréquent. On essayera ensuite de voir si l’on a affaire à de l’albumine et à ses variétés, aux diverses fibrines, à de la caséine ou aux albuminates analogues.

Sous ce titre « albumine etses variétés » on comprend l’albumine du sérum ou sérine, l’albumine de l’œuf, la paralbumine et la métalbumine.

I n’y a pas lieu de croire que la sécrétion bojanienne renferme les deux derniers de ces corps, qui sont du reste très rares ; mais on en a la preuve, car :

1° La liqueur se troubie par l'addition d’une petite quantité d’acide acétique et d'acide chlorhydrique.

2 Le ferrocyanure de potassium la trouble également quand on l’y introduit après un excès d’acide acétique.

8° Le coagulum plus ou moins fibreux que produit l’alcool ne se dissout pas par une longue digestion en présence de l’eau pure et à la température ordinaire.

Iln’y a done pas de métalbumine ; iln’y a pas davantage de

paralbumine. Ce corps se précipite en présence de l'alcool sous la

forme de flocons granuleux qui se dissolvent dans l’eau à la température de 35°. Or :

1° Le coagulum floconneux qui se produit quand on verse de l'alcool dans la sécrétion des Corps de Bojanus de la Moule ne disparaît pas dans l’eau à 35° ; il faut une longue, très longue ébullition pour le dissoudre et encore partiellement.

2° La température de 100° n’amène pas seulement un trouble dans la liqueur, mais un coagulum véritable, et en filtrant on a un liquide limpide.

Ainsi l’albumine de la sécrétion bojanienne de la Moule ne peut être que de la sérine ou une substance analogue à l’albumine de l’œuf de la Poule. Nous allons voir que l’extrait obtenu en triturant la glande en présence de l’eau les contient toutes les deux. car elle offre un grand nombre de réactions qui conviennent à l’une et à l’autre de ces substances protéiques.

1° Quand on chauffe la sécrétion brute de Organe de Bojanus de la Moule dans un tube à essai, bien avant que le point d’ébullition ne soit obtenu, on voitse former un coagulum à la partie supérieure du liquide. Le coagulum donne naïssance à des flocons distincts blancs, d’une texture finement granuleuse, très légèrement élastiques, sans odeur ni saveur. Après leur apparition, un léger trouble se manifeste et se propage de haut en bas.

Quand on fait cette expérience, il est inutile, le liquide étant neutre, d'ajouter une goutte d’acide acétique ou de neutraliser par le sulfate de soude, le chlorhydrate d’ammoniaque où tout autre sel alcalin.

Le trouble que l’on obtient ne peut être confondu avec celui que produisent parfois, dans les mêmes circonstances, les phosphates terreux (phosphates de chaux, de magnésie, ou encore ammoniacomagnésien). On sait que ces phosphates, qui se séparent facilement à l’ébullition de leurs solutions neutres, disparaissent rapidement par l'addition d’une goutte ou deux d'acide chlorhydriquedans la

liqueur. Dans l'expérience que je cite, le trouble ne disparaît pas.

2° L’acide azotique modérément étendu produit dans l'extrait de la glande un précipité blanc qui est soluble dans un grand excès d’acide et en présence de beaucoup d’eau.

3° Les acides chlorhydrique, sulfurique et picrique donnent également naissance à un précipité, à un coagulum floconneux.

4 Mais le précipité fourni par l'acide chlorhydrique est difficilement soluble dans un excès de réactif. Il forme une masse gélati-

neuse, transparente, qui remplit le tube à essaisans se dissoudre.

5° L’acide acétique, l'acide lactique donnent naissance à un précipité.

6° L'alcool forme immédiatement un coagulum blane floconneux qui ne se dissout qu’en partie, lorsque, l'ayant immédiatement séparé de l'alcool, on l’agite dans l’eau distillée.

7° L’acide tannique et le bichlorure de mercure donnent d’abondants précipités avec la sécrétion bojanienne de la Moule.

8° L’éther agité en présence de l'extrait des Corps de Bojanus donne naissance à un coagulum qui par le repos se sépare en deux précipités. En effet, on observe au bout de quelque temps dans le tube où l’on a fait l'expérience trois couches superposées : à lasurface un coagulum transparentet gélatineux, au milieu une couche liquide et au fond un précipité blanc floconneux. Le coagulum d'apparence gélatineuse, qui se forme à la partie supérieure du liquide porté sous le microscope, se montre formé par des gouttelettes d'éther entouré d’une membrane anhiste. Le précipité floconneux est finement granuleux.

La manière dont se comporte l'extrait de l’Organe de Bojanus de la Moule est aussi la même que celle qu’on observe quand on met la sérine en présence des acides azotiques, sulfuriques et picriques, de l'alcool, du bichlorure de mercure et dutannin. Mais les réactions que fournissent l’acide chlorhydrique, l'acide acétiqu et l'acide lactique, le coagulum surtout qui est dû à l’éther indiquent

une substance analogue, mais non identique à l’albumine de l’œuf

des oiseaux, ou plus exactement de l’œuf de la Poule, qui seule a été bien étudiée.

Ainsi deux sortes d’albumines paraissent exister dans la sécrétion bojanienne de la Moule : ce sont la sérine et une albumine plus ou moins semblable à celle de l’œuf ; mais il pourrait se faire qu’au lieu de deux, il n’y en eût qu’une seule, et queparl’ensemble de ses propriétés elle participât de l’une et de l’autre de ces matières protéiques. Nous allons voir qu’il ya en réalité deux albumines:

Traitons en effet cet extrait de la glande par l’éther, agitons, puis laissons reposer un instant et filtrons. S'il y a de la sérine, on la retrouvera dans le liquide limpide qui passe, puisque l’éther est sans action sur elle et que seule l’albumine propre à la Moule aura été coagulée et sera par conséquent restée sur le filtre. Or, si l’on verse dans la liqueur quelques gouttes d’une solution de sulfate de cuivre, puis une très petite quantité de lessive de potasse, on verra apparaître une belle couleur bleue violacée. Nous savons que cette réaction, une des plus sensibles qui existent, caractérise les corps dits protéiques. Le liquide filtré renferme donc une matière albuminoïde : cette matière est de la sérine.

Quant au coagulum resté sur le filtre et qui renferme, en outre de lalbumine proprement dite, quelques autres matières albuminoïdes, iln’est point formé par une substance identique au blanc de l’œuf de Ia Poule. Nous en avons pour garanties les réactions que, sous sa modification soluble, cette albumine fournit avec les divers acides chlorhydrique, acétique et lactique, et que l’on n’observe point avec les solutions dans l’eau de l’albumine de l’œut des (rallinacés. Les expériences montrent de plus que cette albumine, particulière à la Moule, forme la majeure partie des coagulums obtenus, et que la sérine n’existe qu’à l’état de traces dans la

LA pe sécrétion.

La sérine et l’albumine particulière à la Moule ne sont pas les

seules substancesalbuminoïdes que renferme la sécrétion del’Organe de Bojanus ; on y trouve encore de la fibrine et une caséine.

La recherche de la fibrine est rendue particulièrement difficile parce qu’elle ne se coagule pas. Ce qui caractérise en effetce corps, c’est sa coagulation spontanée. Üe caractère va en s’affaiblissant à mesure qu'on descend l'échelle des êtres : la fibrine du sang des crustacés met déjà un temps assez long à se coaguler ; celle du sang de l’Auître ne se coagule jamais. Il en est de même pour la Moule dont le sang, mêlé à beaucoup d’eau, paraît seulement plus filant, plus gluant au bout de quelques heures. Aussi, à défaut de sa propriété caractéristique, on en est réduit, pour la déterminer, à chercher d’autres réactions ; il n’en existe malheureusement pas qui soient bien démonstratives. Le microscope nous apprend que la fibrine coagulée est un corps blanc, amorphe, sans texture histologique; et la chimie nous montre que cette matière se dissout à la longue dans une solution d’azotate de potasse dans l’eau pure, quand on a soin de maintenir pendant longtemps la température constante et dans le voisinage de 40°. La dissolution que l’on obtient forme un liquide visqueux que la chaleur coagule. La sérine se prend aussi en grumeaux par la chaleur, mais toute confusion est impossible, car l'acide acétique précipite la fibrine dissoute, ce qu’elle ne fait pas avec la sérine. Ainsi, quoique se rapportant à un état sous lequel la fibrine des humeurs de la Moule ne se présente point habituellement, la constitution histologique et la solubilité dans ie salpêtre pourraient néanmoins suffire à la caractériser, s’il n'était malheureusement aujourd’hui prouvé que toute fibrine n’est pas soluble dans l’azotate de potasse, et que celle-là même qui s’y dissout perd avec le temps cette propriété et devient insoluble après une longue exposition à l'air. Quand la fibrine ne se coagule pas spontanément, si elle est insoluble dans l’eau salpêtrée, il n’y a que l’observation microscopique qui puisse, en montrant l’étatanhiste de ses flocons coagulés, faire croire à sa présence. C’est là le cas de la fibrine de la Moule,

Quand on verse de l’alcool à 90° dans la sécrétion artificielle de la glande, il se produit immédiatementun abondant précipité blane. Le précipité, ou plutôt le coagulum est constitué en majeure partie par une albumine particulière à la Moule avec des traces de sérine et aussi de fibrine et de mucine, ainsi que nous allons le voir. Pour isoler la fibrine, on débarrasse par filtration le coagulum de * l’alcool qui l’imprègne, on le lave et on le met en présence d’une solution concentrée d’azotate de potasse, et cela pendant longtemps. Je me suis servi pour cela d’une étuve à éther. Après onze heures de contact, j'ai mis fin à l’expérience ; j'ai filtré et j’ai obtenu un liquide limpide, nullement visqueux, que la chaleur ne troublait pas et dans lequel l'acide acétique versé goutte à goutte ne formait aucun précipité. Celiquide ne renfermait donc point de fibrine dissoute. La fibrine de la Moule, s’il en existe dans le coagulum, n'est pas soluble dans le salpêtre, au moins dans les conditions de l'expérience, c’est-à-dire au bout de onze heures de contact, la température étant de 35° 5. Et non seulement la liqueur ne renferme pas de fibrine, mais elle ne contient aucune autre matière albuminoïde, car le sulfate de cuivre et la potasse n'y produisent aucune coloration bleue violacée.

Puisque la fibrine de la Moule ne se coagule pas et ne se dissout pas dans l’azotate de potasse, nous n’avons, pour la reconpaître, que l’examen microscopique ; encore faudra-t-ilnous placer dans des conditions où il soit possible. Voici comment j'ai opéré : on se souvient que, quand on agite l’extrait artificiel en présence de l'éther, on a, après repos, dans le tube où l’on fait l'expérience, trois couches superposées, deux solides et une liquide intermédiaire. Le dépôt du fond est floconneux, il est blanc et finement granuleux, c’est de l’albumine. Au-dessus est une couche liquide qui tient les sels en dissolution ; enfin à la surface il y a un coagulum d'aspect gélatineux. Or, quand on examine ce dernier sous un grossissement suffisant, on le trouve formé de très nom-

breux globules d’éther entourés d’une mince couche d’une sub-

stance sans texture histologique. Cette couche est, selon moi, constituée par de la fibrine. Il n’en existe que des traces dans la sécrétion bojanienne de la Moule. Mais alors cette fibrine provient-elle de la glande elle-même, ou n'est-elle pas plutôt apportée dans l'extrait par le sang du mollusque qui y est abondamment mélangé ? — Cette hypothèse est la plus vraisemblable. Par son mode même de préparation la sécrétion brute de Organe de Bojanus, renferme du sang. Si l’on se rappelle la configuration de la glande, on voit qu'entouré d’un lacis sanguin dont le réseau très riche en capillaires le pénètre de toutes parts, chaque Sac communique en plus directement avec le péricarde. En triturant une pareille glande il est impossible qu’on n’introduise point du sang dans le liquide qu’elle fournit. Si donc le sang des invertébrés ou, pour parler plus exactement, si le sang de la Moule est constitué comme celui des animaux vertébrés, s’il renferme un corps analogue à la fibrine et n’en difflérant que par son inaptitude à se coaguler spontanément et à se dissoudre dans le salpêtre, on doit le trouver dans le produit de la trituration de la glande, dans la sécrétion artificielle des Corps de Bojanus. Nous venons de voir qu’on l'y trouve er effet. S'il y en avait beaucoup, on devrait en attribuer une partie à la sécrétion propre de la glande ; mais comme il n’y en a que des traces, il semblera probable que cette substance pro-

vient uniquement du sang de la Moule.

Quand j'aurai montré qu’il existe encore une caséine dans la sécrétion brute del'Organe de Bojanus de la Moule, j'aurai terminé la détermination des principes albuminoïdes qu’elle renferme.

On sait que la caséine et les albuminates de potasse ou de soude ne sont point coagulés par la chaleur : aussi j’ai pensé que la méthode la plus rapide et en même temps la plus sûre pour les obtenir consistait à faire bouillir l'extrait et à filtrer. Quelques traces

. 0 Q A ! \ s de caséine pourraient à la rigueur s'être coagulées à la surface du

liquide, mais il ÿ en a si peu dans la sécrétion, qu’on peut sans ins convénient les négliger. Dans le liquide limpide qui passe, j'ai versé de l'acide acétique, et il s’est manifesté un léger trouble. Un excès de réactif ne l’a point fait disparaître ; mais la liqueur m’a paru un peu plus limpide. Cette apparence peut tenir à deux causes : à la plus grande dilution du liquide, et alors il n’y a ni caséine ni albuminate ; mais on peut aussi l’attribuer à la disparition d’une partie du précipité, et dans ce cas il y avait des traces de caséine où d’un albuminate analogue. Je crois à la seconde de ces causes ; je regarde comme certaine la dissolution d’une partie du précipité, par conséquent j’admets la présence d’une caséine , non identique évidemment à celle du lait de la vache, mais à base de soude ou de potasse. Je n’ai du reste ni l’intention ni les moyens d’entrer dans la discussion que sa composition pourrait soulever;ilnyena que des traces ; je ne l’ai point isolée ; sa présence même n’a pu être affirmée que par unedifférence de teinte, différence qui doit toute sa valeur à l’habitude que l’opérateur peut avoir acquise par l’observation des divers degrés de transparence qui se présentent dans des cas semblables. En admettant l'existence de cet albuminate dans l'extrait, on n’en peut même déterminer la base. On élimine la sérine, l’albumine propre à la Moule et sa fbrine ; on évapore le liquide limpide obtenu par filtration, non sans l’avoir au préalable additionné de quelques gouttes d’acide chlorhydrique ; puis on verse sur le résidu de l'alcool pur et on l’allume. La flamme est jaune ; mais, en la regardant au travers d’un verre bleu, le jaune disparaît et fait place au violet. Peut-on dire que l’albuminate est à base de potasse ? non , car on pourrait tout aussi bien le croire à base de soude, puisque la flamme est jaune quand on la regarde directement.

L’expérience n'est pas concluante, elle n’indique pas quelle est la base qui entre dans la composition de la caséine, elle nous mon-

tre seulement, chose que nous savions, qu’il y a dans l’eau de mer

des sels de soude et de potasse, et ne prouve pas qu’il ÿ en à aussi dans la sécrétion de l’'Organe de Bojanus.

En résumé, quatre substances albuminoïdes existent dans la sécrétion bojanienne de la Moule commune. Une d’elles y est abondamment répandue ; c'est une albumine qui ressemble à celle de l'œuf de la Poule, mais elle en diffère parce qu'elle est coagulée par les acides chlorhydrique, lactique et acétique, employés à l’état detraces, et aussi parce que, précipitée par l’alcoolet immédiatement soustraite à l’action de ce réactif, elle ñe se dissout pas dans l’eau, même après une longue agitation.

Les trois autres substances albuminoïdes ne sont qu’à l’état de traces dans l'extrait de la glande : ce sont de la sérine, une fibrine propre à la Moule et un albuminate à base indéterminée. Il est probable que ces trois corps appartiennent au sang qui est mélangé avecl’extrait; quant au premier, à l’albumine, c’est certaine-

ment un des principes propres à l’Organe de Bojanus.

Avant de passer à l’étude des divers extraits qu’on peut faire de la sécrétion bojanienne de la Moule, il convient de montrer que celle-ci renferme des traces d’une matière muqueuse, la mucine, que l’ensemble de ses propriétés rapproche des substances albuminoïdes proprement dites. Voici comment on en peut prouver la présence :

1° On porte l’extrait brut de la glande à l’ébullition: au bout de quelques instants l’albumine et la fibrine sont coagulées; ou filtre et dans la liqueur limpide qui passe il n’y a plus que l’albuminate et la mucine ; on verse alors goutte à goutte de l'acide acétique, un trouble bien plutôt qu’un précipité véritable se forme. On a vu qu'il ne disparaît pas par un excès de réactif : il y

a de la mucine dans la sécrétion bojanienne de la Moule.

2° On coagule en bloc, au moyen de l'alcool, les albumines, la | fibrine, la caséine et la mucine; puis on maintient le coagulum frais pendant longtemps en présence de l’eau aiguisée d'acide acétique : albumines, fibrine et caséine se dissolvent ; seule la mucine reste à l'état insoluble dans la liqueur et lui donne du louche, pour peu qu’elle y soit à l’état de traces seulement.

Pour avoir des renseignements plus complets sur la mucine de la sécrétion bojanienne, pour la connaître comme celle du Colimaçon, il aurait fallu l’isoler, ce n’était pas possible. Il y en a même si peu qu’on peut penser que les faibles traces qu’on en observe viennent du sang de la Moule; je n’attribue pas cependant la viscosité de cette humeur après plusieurs heures d’exposition à l’air, à la mucine qu’elle renferme, mais à la fibrine qui y esten plus grande abondance. Dans tous les cas, il semble que le plasma du sang de la Moule a une composition analogue à celle du sang des vertébrés, puisqu'on y trouve des traces des mêmes matières albu-

minoïdes unies à des traces de mucine.