STRUCTURES CELLULAIRES

Fa

Si l'on excepte Les trav:ux de BÉHRENS (6) qui obtint, dès 1932, par centrifusation, des noysux à partir d'un tissu desséché au préalable, puis ceux de BENSLEY (7) qui isola en 1934 les premières mitochondries à partir du foie de cobaye, on doit reconnaître que c ‘est à CLAUDE (19) que revient le mérite d'avoir, en 1941, séparé par centrifugations, à p-rtir de cellules äanimales, des groupes de granules de t: illes différéntes,. IL put sin si mettre en évidence, pour la prenière fois, grâce au microscope électronique, des éléments submicroscomitues ‘muxquels il donna le nom de microsomes, Depuis, d'inportantes modifications ont été apportées à . ES primitive ; le rempl.cement des solutions saline ar le saccharose hypertonique à 30 p. 100, introduit par HOGEBOON (41) et ses collaborateurs, constitue notamment un très gros progrès en permettant, d'une part, un meilleur fractionnement, d'autre pirt, une bonne conversation des caractères morphologiques des éléments et, dans une certaine mesure, le respect de leur intégrité chimique et enzymatique,

Cependant, quelles que soient les conditions réalisées, aucun auteur, jusqu'ici, n'a :pu mettre au point unéwCechnique sa tisfaisant au double critère suivant : pureté et totalité pour chacun des types de structures, |

DOUNCE (30), par exemple, obtient des noyaux purs, mais il nencherche pus à les avoir quantitativement et, de plus, sa méthode ne concerne pas l'obtention des granules cytoplasmiques. LEUTHARDT et MULLER (55), KENNEDY et LEHNINGLR (49), CUNYHINGHAM, GRIFFIN et LUCK (25) de leur côté, séparent les gros et les petits gränules mais, d'une part, ils néglisent les noy.ux, et, d'autre part, ne s'intéressent pas à l'aspect quantitatif de 1a° séparation non plus qu'au degré de pureté des fractions obtenues. La méthode proposée par HOGEBOOM et SCHNEIDER (41) mérite une mention spèciale, car elle est la seule à permettre un fractionnement complet du tissu en noyaux, mitochondries, microsomes et phase homogène du cÿytoplasme ; miis les auteurs reconnaissent que leur friction nucléaire, en particulier, reste souillée de mitochondries, de cellules. intactes.et de débris conjonctifs ce qui implique que leur technique ne. livre pas de facon .uantitètive les diverses.

structures, B) TECHNIQUE Nous avons retenu düuns la méthode de HOGEBOOK, quelcues-

unes des importantes modifications qu'ils ont apportées à l: tech nique primitive de CLAUDE : saccharose à 30 p. 100 comme milieu

de dispersion, vitesses et durées de centrifugation pour plusieurs des séparations, Mais pour atteindre les buts que nous nous provosions nous ävons dû 1: reprendre point per point et

luistaireusubirune réelle transformauron,

On'3. utilisé comme mitériel. le foier de rat Le rët,, après un jeûne de 24 heures, est tué p:r décapitation et le foie, prélevé rapidement, est porté à l: chambre froide à + 2° où seront effectuées toutes les manipul'tions ultérieures,