PORT AP
obtenir, un caractère du sang permettant d'utiles comparaisons d'espèces.
Le sang à son issue du vaisseau, est reçu dans une solution à la fois fluorée et oxalatée qui en assure l'incoagulabilité et la conservation : l'augmentation du poids du récipient donne Ja masse du sang recueilli. On amène le liquide à une dilution telle qu'une proportion aliquote du produit final contienne un poids fixe et connu du sang. C’est à cette prise d’essai qu’on ajoute de l’iodure mercuro-potassique titré, le milieu étant finalement acidulé avec de l'acide acétique, et c’est dans le mélange amené à un volume connu, puis filtré, qu’on apprécie indirectement, par cyanimétrie et par la quantité d’azotate d'argent décinormal versée pour obtenir le trouble indicateur final, l'indice mercurique du sang ». (Chelle) (40). Chez l'homme cet indice est très voisin de 19.
d) Précipilation des albumines par l’acetone. — Ce procédé de dosage est utilisé par Piettre et Villa (127), Bierry et M'ie Moquet (24), Bierry et Vicario (26). La technique employée par Bierry et Vicario consiste à précipiter les albumines par l’acétone; à coaguler ces albumines en milieu convenable, d'une acidité ionique nettement définie (PH à 5,5); à peser avec les précautions d'usage les albumines soigneusement lavées et desséchées. La précipitation par le carbone permet d’avoir des albumines aussi pures que possible et de les doser fort exactement ; les poids d’albumine trouvés sont un peu plus faibles que ceux obtenus par la méthode de précipitation directe.
e) Microdosage des albumines. — Le procédé proposé par Vallée et Polonowski (157) est une modification microchimique de la méthode de dosage par l'appréciation de l'azote total des albumines. Il n’a guère d'indications dans les cas de dosages des albumines du sérum, vu la quantité toujours suffisante de sérum que l’on peutavoir à sa disposition pour éviter un microdosage.
3. Procédés physiques. — Les méthodes chimiques de dosage des albumines sont, on le voit par ce qui précède, délicates et difficilement utilisables en pratique courante, aussi a-t-on eu recours, en clinique, à des procédés physiques rapides et simples qui sont: la viscosimétrie et la réfractométrie.
a) Viscosimétrie. — « On désigne sous le nom de coefficient de viscosité relatif d’un liquide le nombre qui exprime le rapport du temps nécssaire à l'écoulement de ce liquide à travers un tube capillaire, au temps nécessaire à l'écoulement d'une même quantité d’eau distillée, dans les mêmes conditions de température et de pression.
Le coefficient de viscosité d’un liquide est d'autant plus élevé que sa teneur en colloïdes est plus grande. Il est par conséquent naturel qu’on ait cherché dans la viscosimétrie un moyen de mesurer les albumines du sang. » (Lisbonne et Margarot) (102).
: 628 ET Co Nes
Le viscosimétre le plus employé est celui de Walter Hess, nous ne décrirons pas cet appareil, relativement connu et répandu et dont la technique se trouve dans la plupart des ouvrages de laboratoire à l'usage des praticiens. C'est celui dont nous nous sommes servis.
Parmi les autres viscosimètres les uns mesurent successivement le temps de succession d’un liquide à examiner et le temps d'écoulement de l’eau. Ce sont ceux de Hirsch et Berch, d'Ostwald, de Mac Castrey, de Dupré-Denning, et Watson, de Determann, de H. Mayer.
Les autres sont analogues à celui de Hess: tels les appareils de Zangzir de Healser, de Munzer et Bloch. 5
Nous devons signaler le viscosimètre récemment imaginé par R. Dumange (48) (de Bordeaux) : il est basé sur ce principe que « pour un temps égal, les liquides dans un tube identique tombent d'autant plus bas qu'ils sont moins visqueux, c'est-à-dire en raison inverse de leur viscosité »: Les avantages de cet appareil seraient d'après son inventeur : la lecture directe à l’aide d'une manipulation simple dans le minimum de temps, son nettoyage parfait et instantané, sa fragilité bien moindre que celle de l'appareil de Hess et son prix extrêmement bas.
Enfin, dernièrement, Kopaczewski (86) a imaginé un appareil à enregistrement électrique pour la mesure de la viscosité et de la tension superficielle.
La viscosimétrie du sang peut porter sur le sang total, sur le plasma, sur le sérum.
La viscosité du sang total dépend essentiellement des globules rouges et ne peut guère donner de résultats au point de vue qui nous occupe. D'ailleurs la méthode est d'un maniement difficile (avec l'appareil de Hess), et de multiples causes d'erreur en troublent les résultats. Elle est l’objet de vives critiques de la part des auteurs qui l'ont utilisée (Josué et Parturier (34), Chalier, R. Boulud et A. Chevalier (39), Sabrazès (143), N. Fiessinger (57).
La viscosité du plasma à été peu étudiée. Tout d’abord elle varie ‘avec le procédé employé; c’est ainsi qu’elle est de 1,86 en moyenne avec le plasma hirudiné (Kottmann (92) et Austrian) (14, de 2 à 2,8 avec le plasma oxalaté (Gley). De plus, tandis que Kottmann lui assigne une fixité invariable, Mayer (113), à la suite de très judicieuses expériences sur le plasma fluoré de divers animaux, trouve des oscillations variant pour la même espèce entre 1,50 et 2,29. Ce fait très cürieux, Mayer a essayé de l'expliquer en faisant appel à d'autres propriétés physico-chimiques du plasma. Les résultats ont été strictement négatifs. Il n'existe aucun rapport entre, d'une part, la viscosité et, d'autre part, les poids spécifiques, les poids de l'extrait sec (qui en l'espèce représente à peu près uniquement la partie protéique du plasma) ou la teneur en fibrinogène de chacun des plasmas examinés. Pour interpréter une anomalie qui paraît singulière, Mayer admet l'hypothèse que la viscosité du plasma et, partant, ses variations sont
Pr.
dues à un état spécial, à une qualité physico-chimique plus ou moins instable et changeante.
La viscosité du sérum nous intéressera seule. Pratiquement elle est aisée à rechercher avec le viscosimètre. Elle ne varie pas (Duncan et Gangee, Bence, Burton-Opitz, Determann), ou ne varie que fort peu (Mayer 113) d’un individu à l’autre, et cela autour d’une constante à peu près fixe. Le coefficient de viscosité trouvé chez l’homme par les différents auteurs qui l'ont étudié est de : 1,56 (Mayer), entre 1,78 et 2,09 (Bence) (18), 2 avec un minimum de 1,86 et un maximum de 2,29 (Borelli et Data) (29). D'après Chalier, Boulud et Chevalier (39) le chiffre normal est entre 1,65 à 1,70.
Mais deux questions se posent au sujet de la signification de la viscosité du sérum. Dépend-elle uniquement des protéines sanguines ou est-elle inflüencée par l’action des matières salines sur les protéines qui sont en fausse solution ? En second lieu exprime-t-elle vraiment le chiffre des albumines totales. Les avis sont partagés. \
Les sels ne semblent exercer qu’une influence minime si on se reporte aux expériences de Botazzi (32), à celles de Fano et Roni (56). Après avoir enlevé les deux reins à un chien, Botazzi constate que le point de congélation du sérum s’abaisse considérablement et la teneur en sels augmente, tandis que la viscosité ne change pas ; Fano et Rossi montrent qu'elle n'est pas influencée par adjonction d’électrolytes (d’autres liquides colloïdes comme les solutions d’amidon, de gomme arabique sont au contraire influencés).
Chez l'homme, Chalier, Boulud et Chevalier estiment de même qu’elle n'a aucun rapport avec le taux des chlorures, de l’urée et des cendres et est exactement en rapport avec le taux des albumines totales.
Au contraire, d’autres auteurs indiquent des variations de la viscosité du sérum suivant une foule de circonstances indépendantes de la concentration protéique (Wanner) : la présence de certains électrolytes la diminuerait : ainsi les iodures, les nitrates, le chlorure de potassium et d'ammonium ; la présence ide ferments hydrolytiques (Wanner). D’autres électrolytes l’augmenteraient : chlorure de sodium, sulfate de soude et de magnésie, excès d’urée et de glucose {Austrian), de graisses, de pigments biliaires (Mayer), acide urique (Tissot), traces d'acides, substances provenant du métabolisme azoté (Borelli et Data) ou de bases libres. Les variations de la pression superficielle, l’ancienneté ou la dialyse de solutions albumineuses seraient également susceptibles de faire varier la viscosité (Wanner).
Rôhrer (137), qui repond à ces objections à un autre point de vue, admet avec Handowky une faible influence de l’urée sur la viscosité. Il admet et l’on doit admettre avec lui que des recherches complémentaires sont nécessaires pour déterminer l’action que peuvent avoir sur la viscosité les sels et les réactions du sérum.
Eafin, deuxième point essentiel, la viscosité exprime-t-elle le chiffre des albumines totales ? Oui, répondent Chalier, Boulud et Chevalier. À une viscosité normale du sérum correspond un taux normal des
es fu
albumines, l’hyperviscosité répond à l’hyperalbuminose et inversement. Au contraire, Naegeli (121) et Rôhrer (136) estiment que le taux de la viscosité dépend non des protéines totales, mais surtout de la globuline, Nous allons revenir dans un instant sur ce sujet.
b) Réfractométrie. — La méthode réfractométrique est basée sur ce fait que la présence dans un liquide de substances albuminoïdes fait varier son indice de réfraction et la déviation du rayon lumineux est d'autant plus marquée que la teneur en albumine est plus élevée (Reiss (132) et Strauss) (151).
On se sert, en général, dans les laboratoires, du réfractomètre à immersion de Pulfrich modifié par Reiss. Le principe de la méthode est le suivant : « Chez un individu normal, l'indice de réfraction du sérum varie entre les chiffres de 1,34873 et 1,35168 (à la température de 17° 5). Un sérum contient environ 8 p. 100 de substances colloïdes et 1 p. 100 de substances cristalloïides. Dans les conditions normales, les substances cristalloïdes d’un sérum ont un indice qui ne s’écarte pas de 0,00277. Seuls les colloïdes font varier l'indice total. Reiïss à calculé que chaque fois qu'une solution albumineuse augmente de 1 p. 100 d'albumine, son indice de réfraction s'élève de 0,00172. Connaissant donc l'indice de réfraction d’un sérum donné, il est facile d’en déduire la teneur en albumine de ce sérum par l'opération suivante : on retranche de l'indice le chiffre représentant l'indice del’eau distillée, c'est-à-dire 1,33320, plus celui des cristalloïdes 0,00277, l'un et l’autre étant supposés fixes. Le chiffre trouvé est divisé par 0,00172, indice de réfraction d’une solution albumineuse à 1 p. 100. Le quotient nous donne la quantité d'albumine contenue dans 100 gr. de sérum examiné ».
Nous emprunterons à Vaucher (158) la description du réfractomètre de Pulfrich et la technique de la réfractométrie. « L'appareil se compose essentiellement d'une lunette dont l’oculaire est muni d’une échelle graduée ; à l’autre extrémité de la lunette se trouve un prisme en verre résistant dont l’angle réfringent mesure 63°. À celui-ci est : adjoint un second prisme (dit prisme auxiliaire) à réflexion totale. C'est entre les deux prismes qu'on dépose la goutte de sérum à examiner. L'appareil étant solidement et hermétiquement clos est immergé dans une cuve à eau maintenue à une température constante de 17°5. Le rayon lumineux réfléchi par une glace placée à 45° au dessous de l'objectif se refracte en traversant le sérum d’où formation dans l'appareil d’une plage sombre dont on peut apprécier très exactement l'étendue grâce aux graduations de l’échelle. La précision est encore augmentée grâce à une vis micrométrique annexée à l’oculaire, permettant de lire les dixièmes de degré de l'échelle. On arrive ainsi à avoir des indices de réfraction de 5 décimales. Les graduations de l'échelle correspondent à des indices de réfraction qui sont indiquées dans des tables spéciales (tables de Reiss) permettant de convertir,