CHAPITRE IV
Précipitation de la gélatine par l'acide tungstique.
19 Généralités. 20 Quantité d'acide tungstique nécessaire à la précipitation. 3° Influence de la concentration de la gélatine. 40 Action de l'acidité du milieu. 5° Action des sels sur cette précipitation. 6° Conclusions.
10 Généralités. — L'acide tungstique a été employé comme défécant du sérum sanguin par Folin et Wu. Il précipite la totalité des albumines, les albumoses peptones et polypeptides. C’est un des meilleurs désalbuminants : les filtrats tungstiques sont les moins chargés en azote résiduel.
On l'emploie en général suivant la technique indiquée par Cristol.
SE ANT ER E Sr 1 vol Eau distillée............. 2 vol.
Tungstate de soude à 10 %. 1 vol.
SON RE RS 1 vol.
Lorsqu'on traite une solution de gélatine suivant cette technique, on obtient un précipité blanc abondant. Si on agite, le précipité s'agglomère en une masse molle d'aspect visqueux. Jetonssur un filtre, on a une filtration rapide et un filtrat bien limpide. Le précipité obtenu est facilement soluble dans les alcalis, mais il n'est pas soluble dans l'eau distillée froide.
Nous avons étudié cette précipitation en faisant varier
les quantités relatives des divers éléments réagissants et leur concentration.
20 Quantité de tungstate nécessaire à la précipitation. — Expérience. — Dans 4 tubes numérotés de 1 à 4, plaçons 5 cc. de solution gélatinée à 10 % (1 solution gélatinée à 10 % présente à peu près la même concentration en matière protéique que le sérum sanguin.)
En I mettons 12 cc. d’eau et 3 cc. de tungstate à 10 %
II 11 ce » 4 ce. »
III 10 cc. » 5 cc. »
IV 5 cc. » 10 ce. »
et dans chaëun 5 ce. de SOH2 2 N/3
Nous obtenons 5 tubes contenant la même quantité de gélatine, d’acide et le même volume d'eau.
Il se produit:
En I, une précipitation abondante, mais le liquide filtre mal. Au filtrat ajoutons un peu de tungstate, il y a encore précipitation. Donc la précipitation est incomplète.
Dans les 3 autres tubes la précipitation se fait bien, le précipité est facile à séparer du liquide par filtration. Les filtrats donnent une réaction du biuret négative et ne contiennent pas d’azote.
En IV, l'excès notable du tungstate resté en solution constitue un obstacle aux recherches ultérieures, dosage de N par exemple, mais ne gêne pas la précipitation.
L'expérience montre que 3 ce. de tungstate à 10% dans 25 ce. de liquide sont insuffisants pour précipiter complètement 0 g. 5 de gélatine (5 cc. de solution à 10 %) contenus dans ces 25 ce., il faut au moins 4 cc. de tungstate à 10% pour obtenir la précipitation totale. |
Voyons maintenant ce qui se passe si nous faisons varier la quantité de gélatine.
30 Influence de la concentration en gélatine. — Expérience. Prenons 3 tubes à essai de 30 cc., et mettons dans chacun 10 cc. de gélatine à 10 %.
