CHAPITRE IV
Formation et jTerminaiion de Tœuf sur feuilles. — Développement ultérieur. — Pouvoir nutritif des feuilles et influence des saisons.
Formation et g-ermination de l'œuf sur feuilles. — Les ensemencements faits au commencement de mai et en décembre-janvier, c'est-à-dire à l'époqtie la plus favorable, peuvent donner des sporules au bout de quinze à vingt jours au plus tôt. Ces œufs ne paraissent bien formés qu'après un délai clc huit à douze semaines depuis rensemencement.
Les ensemencements datant de juin-août, moment peu favorable, ne montrent des sporules, lorsq7c'ils réussissent, que huit à douze semaines après, au plus tôt. Celles-ci ne semblent arriver à maturité qu'en hiver.
De toutes façons la sporule semble avoir besoin de huit à douze semaines pour mûrir : donc en résumé, les ensemencements d'été ou d'automne produisent en janvier, février, mars, des œufs formés et mûrs ; les ensemencements de mai donnent fin juin des œufs formés et quelquefois germant en apparence.
La maturité des œufs parait se manifester par un certain grossissement aussi bien que par émission de filaments ; car ceux-ci peuvent manquer alors que l'œuf est mûr et facilement détachable, si le limbe reste absolument privé d'eau.
Le manque d'air, de jour, l'excès d'eau ont paru nuire à la germination ; le froid, même intense, ne semble pas avoir d'eftet. Jai ensemencé des feuilles sur arbre, en décembre, alors que le thermomètre marquait, la nuit, douze et quinze degrés au-dessous de zéro, température extrême pour les climats à vigne, la germination ne s'est pas arrêtée ; c'est tout au plus s'il y a eu du retard. Les premières gelées pa-
raissent avoir un effet favorable, soit qu'elles agissent sur la spore, soit qu'elles modifient avantageusement le tissu de la feuille (i i.
Une feuille ensemencée le 20 août montre en décembre des œufs bien formés ; une feuille ensemencée en mai montre fin de juin des œufs mûrs ; une feuille ensemencée en décembre montre en janvier des œufs prêts à germer ou germant, etc., etc. On pourrait citer une infinité de cas semblables.
Reste à savoir si ces germinations très ténues sont bien un début du mycélium ou l'extension d'un système radiculaire, d'un thalle destiné à nourrir et à grossir l'œuf. Considérant la déformation de l'œuf, nous serions portés à croire qu'il s'agit plutôt d'un mycélium naissant.
Développement ultérieur de l'œuf. — Que deviennent les œufs mûrs, prêts à germer ou germant ?
Nous admettons que, tombant en terre avec ou sans la feuille, ils forment, lorsque les circonstances s'y prêtent, le début du mycélium truffier.
Il aurait été intéressant de suivre sur la feuille même le développement de ce mycélium, de le voir s'étendre, gagner en force et en épaisseur ; sur ce point, des expériences réitérées n'ont donné qu'un résultat négatif.
Des feuilles portant des œufs mûrs ont été mises en tube fermé ou en boite, en atmosphère humide. Elles peuvent
I. Il arrive quelquefois pour des raisons inconnues, que l'ensemencement sur feuilles échoue complètement. Des feuilles iiréparées en décembre 1900, avec les précautions voulues^ ne laissaient rien paraître après quinze jours. A peine quelques filaments avortés, ni pseudo-spores, ni sporules, ni accouplements ! La truffe employée avait donné, dans de précédents essais, de bons résultats. A quoi attribuer cet insuccès et d'autres du même genre? On serait tenté de penser cju'ils tiennent à l'absence de froid et à la température chaude et humide de novembre et décembre igoo. Pas une fois il n'a gfelé pendant ces deux mois. Le froid serait donc nécessaire? Ajoutons que pendant ces périodes de tiède humidité, le limbe des feuilles se couvre de véjjétations parasites, visibles au microscope seulement, et que la gelée détruit. Ces mycélium parasites gèneraient-ils le développement des spores? C'est encore possible.
ainsi, se conserver des années sans pourrir, intactes, et même vertes. Observées après un an, dix-huit mois, deux ans, elles ne montrent que l'œuf d'origine, un peu grossi, et c'est tout. 11 faut ajouter que, dans ces conditions d'air raréfié, les mycélium de champignons, quels qu'ils soient, ne tardent pas à s'atrophier ou à périr. On se heurte à une insurmontable difficulté. Si la feuille reste exposée à l'air, elle pourrit, et l'observation devient impossible. Si on la protège de l'air, elle ne se trouve plus dans les conditions naturelles de son existence et l'observation est trompeuse.
A la vérité, dans la plupart des cas, le limbe de la feuille est couvert d'un inextricable réseau de filaments dont l'existence ne peut être soupçonnée à l'œil nu. Le microscope, même avec de forts grossissements, ne révèle rien ; à l'aide de colorants tels que le violet de méthylène, on les fait cependant apparaître.
La feuille non pourrie et suffisamment transparente est trempée deux ou trois minutes dans un bain préparé comme suit, au moment de s'en servir :
Alcool absolu saturé de violet de méthylène, deux ou trois gouttes ;
Eau, quinze à vingt cent, cubes.
On passe quelques secondes à l'eau et l'on observe.
Ce réseau de filaments que les colorants font apparaître, est-il pour tout ou partie issu du germe truffier ? Comment le savoir ? Sans doute on aperçoit, en certains cas, croyonsnous, l'œuf germant, et pour cela il n'est besoin d'aucune préparation. Le simple examen de la feuille par transparence suffit. On voit les filaments partir; mais quant à les suivre dans l'inextricable réseau, cela nous paraît impossible.
Les filaments sortent peut-être en partie du germe truffier, peut-être n'en viennent-ils pas ; beaucoup sont des mucédinées simples, des parasites cjuelconques.
Des œufs qu'on a essayé de déposer par frottement sur racines n'ont pas paru se développer mieux que sur feuilles. On observe bien, courant sur radicelles ainsi préparées, des
filaments ténus, brun clair, qui pourraient venir de l'œuf, mais rien n'est certain.
Quant au mycélium brun-rouge , armé de griffes et de suçoirs, décrit par le docteur Ferry de la Bellone comme étant celui de la Truffe, je crois l'avoir observé sur des radicelles qui n'avaient jamais produit de truffe ; il se rencontre même occasionnellement sur les feuilles et paraît tenir à une mucédinée du genre altenarta.
En résumé, des observations faites, on serait tenté de conclure :
Que la feuille peut servir de soutien et d'aliment momentané au mycélium truffier ;
Que Tœuf n'augmente pas, ne devient pas truffe, mais qu'il est simplement le point de départ de la truffière ;
Que le mycélium est très ténu et de développement assez lent sur feuille ;
Enfin, il a semblé que la spore de Truffe était exigeante quant à la propreté du substratum. Elle s'accommode mal des concurrents parasites ousaprophites, et leur cède la place. De là peut-être sa germination plus énergique et plus forte quand la feuille sèclie reste à l'arbre. Celle-ci, en effet, dans cet état, n'est humide qu'accidentellement et garde plus longtemps son limbe intact.
Pouvoir niitritif des feuilles et influence des saisons. — Il est à remarquer que si de juin à novembre on cueille des feuilles sur lesquelles les spores sont en train de germer et si on les place en atmosphère humide, dans les conditions les plus favorables, tout s'arrête ; autant du moins que l'on peut en juger, jusqu'au moment où la pourriture de la feuille rend l'observation impossible.
Sur feuilles sèches de l'année précédente et ensemencées en cette saison, l'évolution paraît également s'arrêter après quelques jours.
Le contraire a lieu sur feuilles sèches ensemencées de décembre à janvier, la germination se continue.
On pourrait conclure de là que l'état de la feuille, pourvu qu'elle ne soit ni anémiée ni malade, n'a pas grande importance ; la saison est tout ; bonne en mai et de décembre à janvier, elle est défavorable le reste du temps.
Si le pouvoir nutritif des feuilles constituées paraît être sensiblement toujours le même, leur état physique influence la germination. Celle-ci est lente, pénible, et ne s'achève pas sur feuilles affaiblies, diaphanes, comme on en voit sur les petits chênes qui végètent au pied des arbres verts. De même, lorsque la feuille a été cueillie trop jeune, l'évolution se fait difficilement.
Il me reste à dire que le développement des spores fraîches n'est pas différent de celui des spores de l'année précédente. Il y a moins de manquants, et c'est tout. Les différences constatées dans les délais et le mode d'évolution ne viennent donc pas du degré d'ancienneté des pores, au moins dans une mesure raisonnable.
