CHAPITRE II
STREPTOCOQUE
En 1926, S. Ramsine à la station biologique de l'Etat Chabatz en Yougoslavie a été frappé du trouble qu’il vitse produire au sein d’une toxine issue de streptocoques hémolytiques de scarlatine souche « Dochez » et de quelques streptocoques autochtones isolés de Ja gorge de scarlatineux et servant à la vaccination préventive contre la scarlatine. Voici les conditions dans lesquelles ce produit se trouble. ‘
Après 24 heures passées à l’étuve, le bouillon contenant la toxine reste généralement liquide et le microscope ne décèle aucun élément, mais. après 3 ou 4 semaines malgré les contrôles de stérilité restés négatifs, ces tubes mis à la température de 6 à 8° montrent au fond du flacon, soit un dépôt soit un petit amas blanchâtre floconneux à contours indéterminés. Ce trouble apparait plus rapidement à l’éluve. Ramsine le rapprocha de celui signalé par Hauduroy dans ses études sur. les formes filtrantes des bactéries et étudia le dépôt qui se produisit dans ces tubes de toxines,
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Au microscope l’amas flottant a l'aspect du mycelium Gram négatif « dans lequel sont inclus des grains de deux sortes : les uns grands, Gram positif ; les autres petits, Gram négatif ».
Ramsine ensemença alors ces toxines sur milieu sucré préconisé par Hauduroy pour la culture des formes filtrantes des bactéries et oberva que l’ensemencement d’une toxineavec mycelium et d’une toxine sans mycelium en bouillon sucré montre au bout de 2 jours l'apparition d’un trouble du bouillon ; que ce trouble dans le liquide où a été ensemencé la toxine avec mycelium montre au microscope des aspects polymorphes, des fragments de mycelium, Gram négatif, des formes sporifères, des formes rappelant des streptocoques, celles-ci incluses dans une masse muqueuse, enfin des grains libres de différentes dimensions. Le liquide où a été ensemencé la toxine sans mycellium montre des grains «des spores » de grosseur variable, soit en amas comme les staphylocoques, soit en chaïnettes.
Cherchant le pouvoir pathogène de ces formes pour le lapin par injections intra-veineuses et pour la souris par injections intra-péritonéales, Ramsine constata qu’à la première génération elles n'étaient pas pathogènes pour les lapins mais que certaines le sont pour la souris ; que les hémocultures pratiquées chez les animaux présentant une infection permettaient d'isoler soit le streptocoque viridans ; soit le streptocoque non hémolytique « au cours des passages, dit Ramsine, les formes filtrables sont susceptibles d'évoluer des formes grossières banales aux formes plus perfectionnées qu’il
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est difficile morphologiquement de différencier du steptocoque typique ».
Les formes filtrables ne sont pas particulières aux streplocoques scarlatineux, elles sont propres à tous les strepltocoques.
Au point de vuesérologique elles donnent les mêmes réactions que les formes typiques « le sérum du lapin immunisé avec la toxine de Dick remarque Ramsine. agglutine les formes issues du filtrat à un titre plus élevé que les formes du streptocoque typique, c’est: à-dire que la toxine de Dick contient la culture vivante des formes primitives filtrables et Ramsine de conclure que « les streptocoques pathogènes donnent naissance à des formes filtrables qui traversent la bougie Chamberland F. vraisemblablement sous forme de grains visi bles. Ces formes sont très résistantes ét sont capables de se transtormer en formes typiques virulentes et d’rmmuniser l'organisme contre les streplocoques pathogèenes ».
Cette constatation de Ramsine relative à la présence de formes filtrantes du streptocoque dans la toxine de Dick avait une importance si considérable que différents auteurs voulurent répéter ses expériences: ‘
Palantes et Koudriatzeva n'ont pu confirmer entièrement les conclusions de Ramsine.
Pour eux : 1° la culture du streptocoque filtré montre quelquefois dans le filtrat des granulations ressemblant à des streptocoques ;
2° Mais le repiquage de ces formes sur milieux appropriés n’a pas permis de revenir au streptocoque.
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3° La présence du streptocoque au point d’inoculation du filtrat peut être due «au microbe de sortie » la souris ayant été prouvée par ces auteurs être un réservoir de streptocoques.
4° Le passage du streptocoque à travers la bougie filtrante ne peut être démontré par les procédés biologiques.
Sedaillan- et Mile Gaumond ont voulu reproduire les expériences de Ramsine et de Jimkavitch, mais ils n'ont pu obtenir une végétation de streptocoques en cultivant une culture filtrée aussi riche soit-elle d’un germe de collection. Ils y parviennent en passant par l'animal et conduisent leurs recherches de la façon suivante :
Un streptocoque cullivé en bouillon est injecté dans le péritoine du cobaye ou de la souris à doses élevées (10 cc). L'animal meurt en quinze à seize heures, le liquide péritonéal contient des streptocoques et uniquement des streptocoques, il est filtré et le produit de l’opération est d’une part ensemencé et d’autre part réinoeulé au cobaye ou à la souris. Ces auteurs ont pu ainsi avoir, {4 fois sur 39, des résultats positifs. Les cultures qu'ils obtiennent sont pauvres, clairsemées, poussant lentement sur la gélose. Fes ensemencements n’ont pas été pratiqués sur milieux lactosés qui est le milieu de choix comme nous le verrons.
Hauduroy et Lesbre, reprenant les travaux sur la filtration du streptocoque, ont porté leurs recherches sur 26. souches. Ces souches sont ensemencées sur eau peptonée à 2 * et mises à l’étuve pendant trois ou quatre
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jours, puis filtrées sur bougies L3. Les filtrats sont portés à l’étuve à 37°. Après-sept à huit jours apparaît un dépôt au fond du tube, ce dépôt repiqué en bouillon ordinaire donne de nouvelles cultures mais qui sedéveloppent mal. Les repiquages sur gélose ordinaire ne donnentrien, mais ceux sur géloselactosée et tournesolée en boîte de Petri ont permis à Hauduroy et à Lesbre de constater des cultures à aspect anormal. Après sept ou huit repiquages en moyenne, ces cultures sont devenues des cultures normales de streptocoques, repiquables dans les milieux usuels.
Au point de vue évolution morphologique de ces Jormes, on trouve en partant du streptocoque typique dans le fiitrat, lors de l'apparition des cultures secondaires, une substance d'aspect muqueux, une gelée ne prenant pas le Gram et condensée en une sorte de gaine autour de grains Gram positif, alignés plus ou moins régulièrement. Le polymorphisme de ces grains est grand, certains sont bacillaires. Cette gaine disparaît à mesure que le nombre des repiquages augmente ; les chaînettes se régularisent et on voit apparaître un Streptocoque semblable au streptocoque originel.
Il ressort donc d’après les travaux de ces différents auteurs que les streplocoques humains sont capables de donner naissance à des formes filtrantes.
Urbain a reproduit ces études pour le streptocoques gourmeux, Dix huit cultures différentes de streptocoques gourmeux poussés sur bouillon sérum ou bouillon peptoné glucosé sont filtrées avec toutes les précautions voulues. Les filtrats sont placés à l’étuve et
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apres 7 à 15 jours, le troublé au fond du tube apparail.
L'examen microscopique de ce dépôt montre soit des cocei isolés ou associés par deux, prenant mal le Gram, soit des formes bacillaires mal colorées granuleuses à l’intérieur desquelles existent des points violets très petits et assez éloignés les uns des autres. Réensemencés en bouillon glucosé, ce sédiment après quatre à six passages donne la forme en chaïnétte typique du streptocoque. Au point de vue pathogène, les grains sont capables de provoquer chez les souris une scepticémie Streptococcique mortelle.
Ainsi donc le streptocoque équin, comme le streptocoque humain, nous apparaît capable de nous donner des éléments invisibles filtrables pouvant reproduire par culture des éléments granulaires petits ou gros des formes bacillaires avant d'aboutir par passages successifs au streptocoque classique. Ces phases d’invisibilité et ces formes anormales ont fait naître nombre d’hypothèses sur Je rôle qu'elles pourraient jouer dans la scarlatine. Les expériences sont encore trop peu probantes et trop inégales quant à leurs résultats pour que l’on puisse tirer des conclusions et jusqu’à preuves plus formelles, nous admettrons avec Hauduroy qu’elles n’apportent aucun appui à l'hypothèse du rôle des formes filtrantes du streptocoque dans la scarlatine.