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Leursexpériences ont montré également que ces formes anormales sont très résistantes puisqu'ils ont pu repiquer en série une culture secondaire après filtration du bacille de Shiga vieille de dix ans. On”peut dès lors se poser cette importante question, qui sera du reste la même pour tous les microbes que nous avons et allons étudier : la forme granulaire n'est-elle pas un des principaux vecteurs de la maladie : celle qui résiste, qui

vit, qui se propage, qui se développe ?

IT. — BACILLES TYPHIQUES ET PARA-TYPHIQUES

C’est en recherchant l'existence des formes filtrantes des bactéries dans la nature qu'Hauduroy a montré que les bacilles typhiques et para-typhiques pouvaient présenter des formes invisibles.

Cet auteur n'est pas parti dans ses expériences de produits de cultures, mais d'eaux de puits des environs de Paris qui avaient propagé la dothiénenterie et qui s'étaient montrées impures à l'analyse bactériologique. Les fravaux de ce biologiste ont élé largement exposés dans sa thèse d’agrégalion, nous essayerons de résumer ici ses nombreuses expériences.

Les eaux de puits suspectes sont divisées en. deux parts. L'une est filtrée imniédiatement, lautre ensemencée en eau peptonée donne une abondante culture. Cette culture est filtrée. Une partie du filtrat est mise à l’étuve, le reste ensemencé en eau peptonée. Il existe

donc en somme pour l’expérimentation trois filtrats un peu différents, mais qui en fin de compte conduisent aux mêmes résultats, c'est-à-dire à l'obtention d’un germe identifiable après beaucoup de difficultés et un temps assez long.

Les premiers éléments apparus rappelèrent à l’auteur les cultures qu’il avait obtenues lors de la filtration et de la Iyse du bacille dysentérique. C’étaient des grains de grosseur plus ou moins variable, des filaments très ténus, des agglutinats informes ne troublant jamais le milieu et rassemblés au fond du tube. Repris sur eau peptonée ce dépôt produisit une culture très pauvre et très lente à pousser. Hauduroy chercha à réaliser un milieu qui lui permit d'obtenir des cultures plus riches capables de rappeler le type classique.

Après une longue période de tâtonnements pendant laquelle furent essayés différents milieux, soit liquide, soit solide, soit semi-liquide, ikse fixa d’abord au mélange à partie égale de gélatine et de sérum de cheval ou à chacun d'eux employés séparément. Ces milieux étaient très propices au développement des germes, mais ils présentaient un gros inconvénient : celui de ne pas permettre à l’expérimentateur de voir le développement des cultures, ce qui obligeait à faire des repiquages sur d’autres milieux. Hauduroy parvint cependant à trouver un milieu banal : la gélose lactosée tournesolée. Sur ce substrat les résultats qu’it obtint sont les suivants :

Des cultures qu'on va d'ailleurs obtenir sont au début tout à fait particulières. Supposons qu'on parte d'un tube ense. mencé avec un filtrat et contenant des grains assez nom-

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breux où présentant un aspect « ascite dilué ». On ensemence à la pipette cette culture sur de la gélose lactosée tourneso'ée qu'on à coulée dans une boîte de Pétri. On porte à l'étuve sans retourner la boîte, le couvercle en dessus, contrairement à la technique habituelle. Après vingt-quatre heures on retire de l'étuve et au premier abord il semble qu'il n'y ait rien sur le milieu, aucune culture n'apparaît et il faut regarder de très près pour apercevoir un léger dépoli à l'endroit-même où l'on a fait l'ensemencement. La gélose au lieu d’être brillante est terne à la loupe. C’est à jour frisant surtout, qu'il faut observer pour s'apercevoir de cette modification. Si on examine à la loupe on ne voit pas de culture mais un petit granité extrêmement fin qui ne ressemble à rien de connu.

Si ce dépoli est légèrement raclé et, à l’aide d’un fil de platine, émulsionné dans de l’eau peptonée ensemencée immédiatement dans une autre boîte de gélose lactosée tournesolée, on voit « en vingt quatre-heures un dépoli se former plus intense que dans la première expérience, dépoli dans lequel la loupe permettra d'isoler de très petites colonies et qui s’il est repiqué en eau peptonée ordinaire donnera «en vingt-quatre heures, quarantehuit heures, une culture abondante ».

Ce n’est qu'après de nombreux essais qu'Hauduroy est.parvenu à identifier le germe cultivé. La description qu'il en a donnée est la suivante : il s’agit, ditil, € d’un bacille mesurant deux à trois ; de long, très mobile, se colorant par la méthode de Gram, poussant bien en eau .peptonée, en bouillon, donnant un trouble homogène et des ondes par agitation. Les cultures sur gélose ordi-

naire sont assez abondantes et ressemblent à celles

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d'un bacille d'Eberth. La gélatine n’est pas liquéliée: Les fermentations sucrées sont les suivantes lactose — 0, glucose — + sans gaz, maltose = 0, lévulose — + sans gaz, saccharose = 0, gélose au rouge neutre = pas de virage, pas de fluorescence. Il ne produit pas d'indol. L'agglutination par les sérums spécifiques anti-typhiques, anti-para À, anti-para B donne les résultats suivants ; sérum agglutinant le B lyphique — agglutination + au 1/50 très faiblement positif au 1/100 et 2/100 ; Sérum agglutinant le bacille para À + agglulination négalive, sérum agglutinant le para B, = agglutination négative ». + 1

En présence des caractères de ce germe Hauduroy à pensé qu'il s'agissait là d’un bacille d'Eberth. *

Il apparait donc que le bacille de la typhoïde présente des formes invisibles non seulement au laboratoire mais encore dans la nature et que c’est par leur intermédiaire que se transmettrait la maladie.

C'est l'avis de Pauteur des expériences que nous avons relatées et qui a été amené à se demander siles selles des : -convalescents'de fièvre typhoïde possédaient des formes filtrantes. Ces recherches lui ont permis de trouver les formes invisibles dans les filtrats de cultures obtenues en partant des matières fécales, cultures qui ne lui avaient pas permis d'isoler un bacille typhique. Les formes granulaires ressemblant en tous points à celles qu'il avait obtenues en partant des eaux de puits lui permirent de les identifier à celles du bacille d’Eberth.

I put également les retrouver dans le sang des malades convalescents de typhoïde. A la période où l'hé-

moculture est négative, c'est-à-dire-une huitaine de jours après le début de l'infection, au moment où seule la séro-réaction permet un diagnostic possible, Hauduroy à voulu essayer de recherchèr les formes fillrantes. Ces résultats ont été positifs une fois et il est à supposer que si les hémo-cultures restent négatives à cette période, c'est probablement que l’action bactériophagienne se fait sentir à ce moment, que le bacille typhique est 1ysé par le bactériophage anti qu'Hauduroy du reste à pu isoler à la fin du deuxième septenaire. On est en droit de penser que pour avoir des hémocultures positives il faudrait rechercher non seulement le bacille classique mais encore les formes filtrantes et invisibles du typhique sur gélose lactosée et tournesolée avec autant de soin qu'Hauduroy en a apporté pour leur découverte dans les eaux de puits.”

Cette notion de cycle évolutif du bacille d’Eberth que l'auteur précédemment cité a fermé pour la première fois ; bacille d’Eberth — formes filtrantes du bacille d’Eberth — bacille d Eberth permet d'éclairer d’un jour nouveau l’étiologie de la typhoïde transmise soit par des eaux reconnues souvent propres à la consommation ou par les huîtres chez lesquelles on ne trouve “que très rarement le bacille typhique et qui n'en sont pas moins pathogènes.