ÉTUDE DU BOUILLON CULTIVÉ

Le bouillon dont nous avons plus haut indiqué la préparation a été ensemencé par MM.Richet et Héricourt avec du bacille de la tuberculose aviaire. Le bacille s’est parfaitement développé dans le milieu, puis, au bout d’une quarantaine de jours il a cessé de s’accroître. Les ballons ont été alors stérilisés dans l’autoclave à 120°, ce qui n’a fait subir à leur contenu aueune modification sensible à l'œil.

Le contenu des ballons a ensuite été filtré au papier pour se débarrasser de la plus grande partie des microbes. Il est resté un bouillon bien limpide, à peine alcalin au tournesol et possédant une odeur aromatique agréable, caractéristique.

Dans le but de rechercher la nature des composés volatils qui donnent son odeur au bouillon, j'en ai soumis une certaine quantité à la distillation. Il a passé un liquide fortement odorant parfaitement neutre que j'ai rectifié avec un appareil à boules Lebel et Henninger. Les premières gouttes qui ont passé ont été versées en même temps qu’une faible quantité d’iode dans un ballon contenant une solution bauillante de carbonate de sodium.

J'ai perçu immédiatement et d’une manière très nette l’odeur de l’iodoforme ; il est done permis de pen-

+. pe ser qu'il existait dans le liquide, soit de l'alcool éthylique, soit une acétone de formule générale R-—CO-—CH:. Où aurait, en effet, dans ce cas, la réaction suivante :

R-CO-CH°+-51+-2CO Na —R-CO*Na-+-5Nal + H°0-+-2C0?-+-CHF

Un fait m'a frappé immédiatement, je veux parler de la disparition complète des alcalis volatils existant dans le bouillon. J'ai constaté d’une manière extrêmement nette la présence dans le bouillon primitif d’une quantité très appréciable de bases volatiles ; ces composés font absolument défaut dans le bouillon cultivé. Afin d'en avoir une preuve plus évidente encore, j'ai distillé ce même bouillon après l’avoir additionné largement de potasse ; là encore le liquide distillé était parfaitement neutre. Cette remarque nous fournit des indications précieuses pour l’histoire du bacille; il est certain que ces matières basiques, il les a employées comme matériaux pour former soit sa substance propre, soit des produits de secrétion. [Il est même naturel de penser qu’il a cessé de végéter dès que ces substances lui ont fait défaut.

Il semble alors indiqué d’étudier le rôle des sels ammoniacaux et des sels d’amines dans les cultures de tuberculose.

Après m'être rendu compte de la modification si profonde des composés volatils contenus dans le bouillon, j'ai voulu étudier celles qu’avaient subi les produits non volatils.

La première expérience que J'ai faite a été la prise

HooS de la densité du bouillon; cette densité a varié dans des proportions énrermes. La densité du bouillon qui a été ensemencé était 1,09, celle du bouillon cultivé n’est plus que 1,05. Cette perte de densité correspondond à une destruction d'environ 40 gr. par litre de matières en dissolution dans l’eau. J’ai dosé dans une expérience le poids de :nicrobes par rapport au poids du bouillon cultivé.

1685 centimètres cubes de bouillon cultivé ont été filtrés au papier, les microbes soigneusement lavés à l’eau et exposés à l’air sur des feuilles de papier buvard J’ai obtenu ainsi 9 gr. de microbes séchés à l'air, contenant encore environ 85 0/0 d’eau, ce qui correspond à environ 1 gr. de microbe privé d'eau pour un litre de bouillon. Ce gramme de matière vivante contient à peu près 0 gr.20 d'azote, et, nous avons vu que la quantité d’ammoniàque contenue dans le bouillon est susceptible d’être mise en liberté par la baryte est également d'à peu près 0 gr. 20 par litre de bouillon.

Le déficit en matériaux fixes semble avoir surtout porté sur la glycérine dont on avait mis dans le bouillon une quantité considérable. J'ai d’ailleurs renoncé complètement à faire de cette substance un dosage même approché. Cette substance est en effet accompagnée dans le bouillon d’une foule de substances ayant les mêmes solubilités qu’elles et qui s’y dissolvent indéfiniment.

J'ai été plus heureux pour le sucre de canne, j al CONStaté avec étonnement qu'il n'avait pas le moins du monde été employé. Le bouillon cultivé ne réduit pas

DT la liqueur de Fehling, il donne simplement la belle coloration rose que donnent les peptones ; mais si on l’intervertit, il réduit alors abondamment.

Ainsi donc, non seulement le bacille n’a pas brûlé le sucre, mais 11 ne l’a mème pas interverti.

J'ai inververti une petite quantité de bouillon cultivé et J'y ai dosé le sucre, j’en ai trouvé 20 gr. par litre, j'ai répété la même opération sur le bouillon normal pour me rendre compte si les nombreuses matières existant dans le bouillon ne troubleraient pas le dosage et j'ai trouvé cette mème quantité, celle qu’on y avait mise. Je me suis trouvé dans ces dosages aux prises avec une petite difficulté. D'abord les solutions étaient trop fortes: je les ai diluées de 5 fois leur volume d’eau ; dans ces conditions, le dosage se faisait dans d’assez bonnes conditions sauf qu’à la fin de l'opération il se produisait dans le liquide une sorte de précipité blanc jaunâtre qui ne se rassemble pas et qui rend un peu indistinet le moment précis de la réduction complète.

J'ai pu éviter complètement cet inconvénient en emplovant un procédé indiqué par M. Causse et qui consiste à ajouter à la liqueur de Fehling un large excès de ferrocyanure de potassium. La liqueur ne cesse pas d’être bleue, mais la réduction, au lieu d’y faire naître un précipité, la décolore; j'ai pu apprécier très nettement la fin de l'opération.

M. Hammerschlag, qui a fait des expériences analogues sur la tuberculose humaine, a constaté également que le sucre était à peine attaqué (Centralblatt fur Klinischen Me-