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decin, 1891, n° 1,p. 9). Il a trouvé quela quantité de sucre, qui était détruite par le bacille, était toujours comprise entre 0 et 1/10 de la quantité totale, et que d’autre part cette quantité de sucre ne dépassait pas le quart du poids du bacille qui a pris naissance dans le bouillon. Malgré cela, M. Hammerschlag considère le sucre, de même que la dextrine et d’autres hydrates de carbone, comme des substances nutritives pour le bacille.

Üne des substances les plus abondantes, consistant dans le bouillon normal, était la gélatine, à telles enseignes qu'il se prenait en gelée par le refroidissement. La gélatine n'existe plus dans le bouillon cultivé qu’à l’état de traces. En effet, nous verrons plus loin que le bouillon concentré au dixième ne précipite que difficilement et fort peu l’alcool à 60°, dans lequel la gélatine est insoluble. Cette gélatine a sans doute été peptonisée, la quantité de peptone existant dans le bouillon cultivé est en effet considérable.

Enfin,je n’ai pu retrouver de créatinine dans le bouillon cultivé, l’extrait alcoolique par l'alcool absolu abandonne une petite quantité de matières solubles dans l’éther. Cette solution ne précipite pas par addition de chlorure de zine en solution alcoolique, ce qui permet de conclure à l'absence de la créatinine.

Il en est autrement de la sarcine, le bouillon concentré précipite encore abondamment par l’acétate de cuivre. J'ai fait dans ce précipité le dosage de la sareine et de la xanthine.

J'ai traité ce précipité bien lavé et en suspension dans

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l'eau par un courant d'hydrogène sulfaré, j'ai filtré pour enlever le sulfure de cuivre et j'ai concentré la solution au bain-marie pour chasser l’excès d'hydrogène sulfuré. La sarcine cristalise par refroidissement. J'ai précipité la solution par lazotate d'argent et l’ammoniaque, j'ai eu un précipité blanc que j'ai filtré et lavé.

Ce précipité est dissous dans l’acide nitrique de densité 1,1 puis porté à l’ébulition ; le nitrate de sarcine, argentique cristallise par refroidissement. Jai filtré, séché et lavé, pesé ce précipité.

J'ai pris 250 eme. de bouillon cultivé, j'ai obtenu un précipité argentique pesant 0 gr. 1140, correspondant à 0 gr. 064 de sareine. Le bouillon cultivé eontient done encore 0 gr. 2560 de sarcine par litre.

Quant à la liqueur argentique, elle ne donnait, avec lammoniaque, qu'un précipité presqu'impondérable, la xanthine a donc été à peu près complètement détruite.

Jai fait d’ailleurs les mêmes dosages dans le bouillon non cultivé. Jai obtenu, pour 250 cmc. de bouillon, 0 gr. 3 de sarcine argentique correspondant à 0 gr. 5332 -par litre de bouillon ; j'ai eu en même temps 0 gr. 041% de xanthine argentique, correspondant à 0 gr. 0065 de xanthine par litre.

Après m'être rendu compte de ce qu'étaient devenues les matières dont je connaissais l'existence dans le bouillon, j'ai voalu rechercher celles qui pouvaient y avoir été élaborées par le bacille; c’est pourquoi J'ai soumis ce bouillon cultivé à des précipitations fractionnées et méthodiques par l'alcool et l'éther aux différentes concen-

2bre trations, me réservant d'étudier spécialement chacune des fractions ainsi obtenues. Afin de ne pas être troublé dans ces opérations par les sulfates et phosphates de potasse qui sont très peu solubles dans l'alcool faible, je me suis proposé de les transformer en chlorures par laddition de chlorure de baryum. Afin de ne pas ajouter un excès de ce sel qui m'aurait gèné autant que ceux que je voulais enlever, j'ai fait au préalable un dosage approximatif pour me rendre compte de la quantité qu'il en fallait mettre. J’ai eu un abondant précipité blane que j'ai laissé quelques heures au contact de la liqueur chauffée au bain-marie, puis j'ai filtré au papier. J’ai obtenu une solution parfaitement limpide que j'ai évaporée au bain-marie dans une capsule tant qu’elle veut perdre de l'eau. Dans ces conditions, la solution se concentre au dixième de son volume.

M. Koch a publié récemment ses études sur le bouillon de cuiture de la tuberculose humaine (Deutsche und Wochenschrift. 1890, n° 46, et 1891, n° 17). Il employait des bouillons de culture en tout semblable à celui dont nous nous sommes servi. Le bouillon, une fois cultivé, était stérilisé, filtré et évaporé au bain-marie. C’est cet extrait qui constituait la tuberculine ou lymphe de Koch. Dans le but d'obtenir un composé plus actif et plus pur que cette tuberculine qui est un mélange d’une complexité effroyable, il l'a soumise à l’action de l'alcool de manière à ce que le liquide total fùt à 60° centésimaux. Cet alcool dissout la plus grande partie du produit, il s’y produit un précipité qui, lavé à refus par l'al-

NT — cool à 60°, puis avec de l’alcool absolu, a été séché dans le vide au-dessus de l'acide sulfurique. Le produit final constitue une poudre blanche dont la quantité est environ le centième de celui de la tuberculine; ce composé, que M. Koch désigne sous le nom de tuberculine purifiée, possède des propriétés physiologiques extrêmement intéressantes, pour la description desquelles je renvoie le lecteur au mémoire original. Quant aux propriétés chimiques, qui m'intéressent plus particulièrement, elles montrèrent que le composé en question était loin d’être pur.

Cette tuberculine se comporte comme une sorte de matière albuminoïde jouissant de propriétés extrèmement singulières. L'eau, et surtout l’eau chaude la dissolvent, puis la dissolution se coagule en partie ; ia glycérine la disssout aisément et sa solution peut se conserver indéfiniment, même portée à une haute température. Enfin, la matière à l’état sec contient environ 20 o/, de cendres constituées principalement par du phosphate de potassium.

‘C'est la présence de ce phosphate de potassium qui m'a poussé à employer le chlorure de baryum ; j'espère obtenir ainsi une matière moins riche en cendres.

J'ai répété la première expérience de M. Koch, avec cette seule différence de l’emploi du chlorure de baryum, afin de savoir si le bacille de la tuberculose aviaire secrétait un produit identique ou analogue à la si active tuberculine.

J'ai donc précipité par l'alcool le bouillon concentré

Be 0 “au dixième de son volume ; je calculais le volume de l'alcool à ajouter et son titre de manière à ee que l'alcool final fût à 60 °/, de concentration et que le volume final de la solution alcoolique fût de 800 centimètres cubes pour 200 cmc. de tuberculine correspondant à deux litres de bouillon de culture.

En faisant cette opération dans une éprouvette à fond plat, le précipité se dépose parfaitement et l’on décante aisément la liqueur claire alcoolique qui le surnage. On lave une dizaine de fois ce précipité et chaque fois avee une centaine de centimètres cubes d'alcool à 60° ; enfin quand lalcool de lavage est devenu tout à fait incolore, on le remplace par de l'alcool de plus en plus fort et enfin par de l'alcool à 95°. On lave deux ou trois fois à l’alcool à 95° toujours par décantation et l’on fait tomber la bouillie obtenue dans une capsule que l’on met dans le vide au-dessus de l’acide sulfurique.Au bout de quelques

jours l’alcool est complètement absorbé et il reste dans la capsule une masse légère extrèmement dure et se cassant seulement au pilon.

Ce composé se redissout très lentement dans l’eau; il est constitué surtout par de la gélatine qui n’a pas été transformée par le bacille. La solution contient une matière albuminoïde qui se coagule par la chaleur ou l’action des acides minéraux forts.

Avant de préparer cette tuberculine purifiée par le chlorure de baryum, j'ai préparé un échantillon en tendant textuellement les indications de Koch.

J'ai fait dans la matière sèche un dosage de cendres.

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J’ais pris Og. 082 de matière que j'ai calcinée dans um creuset ouvert jusqu’à disparition complète du charbon, il restait Om.02 de cendres, ce qui revient à une teneur de 2%,38 °/, de cendres. J’ai constaté d’ailleurs que ces cendres étaient constituées principalement par des phosphates. En effet la solution aqueuse traitée par le nitrate d'argent donne un précipité jaune entièrement soluble dans l'acide nitrique, ce qui démontre l’absence de chlorures. Ge précipité jaune, abandonné à lui-même se réduit partiellement, réaction due à certains composés oxydables qui n’ont pu encore être déterminés.

La solution aqueuse de cette tuberculine n’est pas stable, elle abandonne un coagalum quand on la chauffe, mais la solution dans l’a glycérine à 50 °/, est beaucoup: plus stable et peut être chauffée longtemps à 100° sans. être modifiée; cette propriété lui est commune avec la tuberculine purifiée de Koch.

Cette tuberculine a été étudiée au point de vue physiologique par M. le professeur Richet.Il a constaté qu'elle était à peu près sans action sur les lapins non tuberculeux, mais qu’elle tuait assezrapidement les lapins tuberculeux.

Il est difficile de comparer son énergie avec celle de La fameuse tuberculine du savant allemand; car M. Koch. opérait sur des cobayes avec de la tuberculine humaine, tandis qu'il s’agit ici de la tuberculine aviaire sur des lapins.

Les eaux-mères alcooliques ont été réunies aux alcools de lavage du précipité obtenu par l'alcool à 60°, le tout