‹ Études chimiques de la racille de la tuberculose aviaireChapitre 8 sur 15 · ET · texte numérisé non relu

ET

J'ai fait chaque opération sur dix litres de bouillon que je concentrais à deux litres ; on ne peut pas aller plus loin aisément à cause de l'énorme quantité de gélatine eontenue dans ce bouillon. De plus, afin d'éviter le brunissement de la masse, j'ai renoncé à alimenter mon ballon d'une manière continue. Ce procédé a, en effet, Finconvénient de chauffer pendant plus longtemps qu'il n’est nécessaire les portions déjà concentrées. Fai préféré introduire à chaque opération deux litres et demi de bouillon dans le ballon et distiller jusqn'à ce que j'arrive à trois quarts de litre environ. Je vidais alors complètement le ballon et je le remplissais à nouveau avec deux litres et. demi de bouillon. Après quatre opérations de ce genre, qui duraient environ une heure chacune, je versais dans le ballon les trois litres de bouillon concentré et j'évaporais tant que l’ébullition n'était pas trop tumultueuse, c’est-à-dire à deux litres ou un peu moins.

Ces diverses distillations ne se sont d’ailleurs pas fartes sans quelques difficultés, à cause de la mousse. En effet, mon bouillon est alcalin et très chargé en matières albuminoïdes, aussi moussait-1l au point de rendre la distillation dans le vide impossible. Or, je ne voulais pas distiller dans un ballon presque vide, avec alimentation continue, pour les raisons que J'ai déjà exposées. Je suis arrivé à supprimer complètement la mousse en ajoutant environ un gramme d'huile de lin par litre de bouillon. L'ébullition se fait alors très régulièrement ; mais Femploi de l'huile n’est pas sans quelques inconvénients dont Je parlerai plus loin. Depuis l’époque où ce travail à été.

fait, j'ai eu occasion de me servi, d’un autre brise-mousse que j'ai trouvé bien préférable ; il consiste simplement en larges lames de liège que l’on introduit dans le ballon distillatoire ; l’ébullition en leur présence cesse d’être tumultueuse.

Pour résumer, la distillation dans le vide a séparé les dix litres de bouillon d’où j'étais parti en deux litres d'extrait concentré A et huit litres d’un liquide B.

Ce liquide possède une odeur assez agréable, mais ne rappelant nullement celle du bouillon, il est louche, comme s’il contenait en suspension une faible quantité de matière huileuse et possède une réaction nettement alcaline. Ce liquide précipite le réactif de Nessler en brun verdâtre, J'ai recueilli le précipité correspondant à huit litres de ce liquide ; je l’ai lavé soigneusement à l’eau-et décomposé par l'hydrogène sulfuré en présence d’acide chlorhydrique. :

Après filtration du sulfure de mercure la liqueur a été évaporée au bain-marie ; il est resté un résidu très faible presqu'uniquement constitué par de l’iodoforme. Je me suis proposé d'étudier les matières alcalines contenues dans le liquide distillé et j'indiquerai plus loin quel traitement je lui ai fait subir.

Traitement de l'extrait A. — L'extrait À qui est absolument solide à froid est fondu au bain-marie ; quand il est environ à 80°, on y ajoute par petites portions et en agitant à chaque fois, le double de son volume d’alcool à 80°, puis on abandonne le tout pendant quelques heures. Au bout de ce laps de temps, il s’est formé au fond du

TEA ie

ballon une masse spongieuse C três abondante qui constitue la presque totalité de la gélatine contenue dans le bouillon; le liquide qui surnage D est parfaitement limpide, on les sépare l’un de l’autre par simple décantation.

La masse spongieuse C se rédissout dans l’eau chaude très aisément, mais elle se dissout très lentement dans l’eau froide; elle consiste presqu’exclusivement en gélatine. Je m'étais proposé de rechercher si elle ne contenait pas d'autres principes immédiats, mais elle ne m’a donné que les réactions de la gélatine. L'emploi de l'huile a rendu très difficile la recherche de ses diverses réactions, en effet, pendant la distillation une partie de cette huile: a été saponifiée par la petite quantité de baryte libre qui existait dans le bouillon ; il a pris naissance un savon de baryte insoluble, sous forme d’une poudre blanche extrèmement ténue, qui, avecla gélatine et huile non saponifiée a formé une emulsion blanche extrêmement solide, iraversant tousles filtres et, que je n’aijamais pu détruire. La masse spongieuse de gélatine a entraîné complétement et l'huile et le savon barytique en laissant une solution alcoolique parfaitement limpide; mais quand on redissout dans l’eau la masse précipitée ; l'émulsion primitive se reforme aussitôt.

Je n’ai pas poussé plus loin l'étude de cette portion gélatineuse.

Étude du liquide D. — La solution alcoolique D est distillée au bain-marie dans le même appareil qui a servi

à évaporer le bouillon primitif ; en diminuant de moitié

MST

la‘ pression atmosphérique au moyen de la trompe on äbaïsse la température d’ébullition du liquide et on distille l'alcool avec une très grande rapidité. On peut distiller # ou 5 litres dans une heure, parce que sa chaleur spécifique de volatilisation est de beaucoup inférieure à celle de l’eau. Le premier alcool distillé est à 80° environ ét peut servir pour une nouvelle précipitation ; il passe ensuite de l’alcool de plus en plus faible et enfin de l’eau. Cétte solution peut aisément être réduite au dixième de son volume ; dix litres de bouillon fournissent environ un demi litre d'extrait E qu'on précipite à chaud par deux fois son volume d’alcool à 90°. Après refroidissement, le ballon eontient un liquide clair F et une masse visqueuse plus lourde que lui G dont nous indiquerons plus tard le traitement.

Le liquide clair F est äistillé également à pression réduite ; on recueille séparément l'alcool qui distille au début et celui qui distille à la fin de l'opération et on amène le résidu à occuper un volume de 250 centimètres cubes; on additionne ensuite l’extraitobtenu et encore chaud de la moitié de son volume d’alcool fort et l'on abandonne le tout dans un endroit frais pendant 24 heures. Au bout de ce temps il se fait dans la masse une cristallisation assez abondante de créatine. Les cristaux sont essorés à la trompe et lavés avec quelques gouttes d'alcool étendu de son volume d’eau. 10 litres de bouillon m'ont donné environ 10 grammes de créatine sèche.

Les eaux-mères alcooliques de la créatine sont ensuite traitées par un grand excès d'alcool fort ; il se forme des

M7 ou

cristaux noyés dans une couche huileuse. Les cristaux sont séparés de cette couche huileuse ; ils sont constitués par de la créatine; quant au liquide qui les baignait, ila été joint à la solution de la masse visqueuse G dont nous reparlerons plus loin,

Quant à la solution alcoolique forte H, elle est ramenée à un litre par la distillation, puis additionnée d’une solution alcoolique de chlorure de zinc contenant 10 grammes de chlorure de zinc. La solution louchit immédiatement; mais le lendemain on y trouve un abondant précipité blanc [.

Le précipité I est séparé des eaux-mères alcooliques par filtration et repris par l’eau. Il se dissout partielle- ‘ ment, il reste une poudre cristalline constituée par du chlorozincate de criatinine. On le purifie aisément par cristalisation dans l'eau bouillante.

Les eaux-mères qui ont abandonné ce chlorozincate sont assez fortement acides ; or, les acides dissolvent le chlorozincate de criatinine. On fait bouillir au réfrigérant ascendant ces eaux-mères avec un léger excès d'oxyde de zinc et l’on abandonne le mélange au froid pendant 24 heures. Le lendemain on filtre et l’on a un mélange de l'excès d'oxyde de zinc et de chlorozincate de criatinine; on l’épuise à l’eau bouillante et on en retire aisément tout le chlorozincate que l’on joint à celui qui s'était déposé le premier.

10 litres de bouillon du veau donnent entre 7 et 8 grammes de chlorozincate de criatinine.

La partie soluble dans l’eau du précipité I est consti-

Page 1