I>R LYON

(laboratoire do zoologio médicale et anatomie comparêA do la Faculté de niédocine de Lyon.)

L'un .de nous a publié dans ce recueil les résultats d'expériences entreprises sur la tuberculose chez les animaux vertébrés dits à sang froid. Cette étude, qui n'a pu être continuée faute d'avoir pu se procurer des sujets d'expériences nouveaux, avait établi pour les grenouilles et les tritons la possibilité de contracter la tuberculose et de transmettre cette maladie à des cobayes (1).

Nous avons entrepris des expériences analogues dans le but de rechercher si les lombrics étaient susceptibles d'être contaminés par le bacille de Koch, et s'ils pouvaient servir d'intermédiaires pour la transmission de la tuberculose.

Le 16 juin 1891, on remplit quatre vases de terre,

(1) De la tuberculose expérimentale chez les animaux vertébrés dits à sang froid, par M. le docteur V. Dkspkiones, licencié es sciences, chof des travaux à la Faculté do médecine de Lyon; in Études expérimentales et cliniques sur la tuberculose y X. III, 1«' fascicule, 1891.

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dits pots à fleur, avec de la terre ordinaire recueillie dans un des jardins de la Faculté, puis on mêle avec soin à la terre des crachats contenant des bacilles tuberculeux de Koch et provenant d'un malade phtisique en traitement à THôtel-Dieu; enfin dans chaque vase on introduit quatre ou cinq lombrics.

Le 28 juillet 1891, on choisit un lombric assez volumineux, et on pratique une asepsie soignée tant de la surface du ver, que du tube digestif qui est soumis à un lavage prolongé à Teau stérilisée : on broie ensuite le lombric privé de son tube digestif dans du bouillon stérilisé, et on se sert du liquide ainsi obtenu pour inoculer trois cobayes, chacun d'eux à la dose de 1 ce. sous la peau de la cuisse droite (observations n''i, 2 et 3).

Le 19 novembre 1891 , un premiercobaye meurt, et à Tautopsie on trouve les lésions suivantes : '

1° Les ganglions inguinaux droits sont augmentés de volume et ont un contenu caséeux;

2" Le foie présente un grand nombre de tubercules et quelques abcès raséeux ;

3 Lîi rate, hypertrophiée, présente également des tubercules et des abcès ;

i" A la surface du pancréas on constate quelque? gros tubercules;

5" Le lesticule gauche est complètement caséifié;

G' La paroi vésicalc porte également quelques tubercules, cl la vessie contient un liquide purulent:

7" Les ganglions mosentériques, péritonéaux, prélombaires et sous-diaphragmatiques sont fous fuberculeux;

8 I^ésions tuberculeuses peu avancées dans les poumons.

Il s'agit là évidemment d'une tuberculose généralisée, qui est prouvée par une inoculation faite à un autre cobaye au moyen d'une dilution de ces divers organes tuberculeux, et qui amène la mort en trois mois avec une tuberculose généralisée très accentuée : tuberculose des ganglions inguinaux, prélombaires, sous-diaphragmatiques, mésentériques, des médiastins, trachéo-bronchiques; foie, rate, poumons farcis de tubercules.

Le 1" décembre 1891, on sacrifie un des trois cobayes inoculés le 28 juillet 1891; depuis longtemps déjà cet animal présentait tous les signes d'une tuberculose avancée : amaigrissement, induration, puis suppuration des ganglions inguinaux droits ; à l'autopsie on trouve :

1** Induration des ganglions prélombaires, mésentériques, sous-diaphragmatiques, médiaslinaux et trachéo-bronchiques ;

2*" Suppuration et élimination des ganglions inguinaux droits : les ganglions inguinaux gauches et axillaires droits avaient un contenu caséeux;

3"" Tuberculisation du foie, des poumons, de la rate et du péritoine.

Dans toutes les préparations que l'on fait, on trouve de nombreux bacilles de Koch.

Enfin le 3' cobaye meurt le IG février 1892 avec une tuberculose généralisée se révélant par des lésions analogues aux précédentes.

Il était donc prouvé que les organes des lombrics nourris avec des substances tuberculeuses pouvaient transmettre la tuberculose.

Par quelles lésions se révèle la présence des bacilles tuberculeux chez les lombrics? Malgré un exa-

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men attentif, jamais nous n'avons pu découvrir dans aucun organe des vers contaminés des productions pouvant être comparées à des tubercules. Par contre, l'emploi des colorants appropriés (méthode de la double coloration d'Ehrlich) nous a permis de constater aisément des bacilles de Koch dans le contenu du tube digestif; on en trouve également dans les deux poches séminales antérieures et postérieures, et enfîn dans la bouillie représentant le reste des organes génitaux raclés ensemble; il n'existe pas de microbes dans le liquide cavitaire. Il n'y a donc pas production de tubercules, et les bacilles se comportent ici comme cela a déjà été constaté dans les tissus de la grenouille et du triton : ils s'infiltrent entre les cellules des tissus, sans déterminer des altérations spéciales.

Dans cette première série d'expériences, qui a fait l'objet d'une communication à l'Académie des sciences (1), nous n'avons jamais pu tuberculiser les cobayes au moyen des excréments de lombrics nourris de matières tuberculeuses : les animaux périssaient en effet de la septicémie bien avant que Ton ail pu obtenir un résultat satisfaisant.

Le 26 janvier 1892, nous commencions une nouvelle série d expériences, pour lesquelles nous fîmes subir quelques modifications à notre manuel opératoire primitif.

A cette date, nous nous procurons un certain nombre de vases a Heurs d'une capacité de o à (> lilres environ: chacun de ces vases a son pelil orifice obturé à l'aide d'un tesson ou fragment de pot cassé.

'H Lrs n'vs (le tprn» et les hacilles de la tuherculosey par MM. Lortei et DKspKiiiNE.-^ ; in Comptes rejulus de l'Académie des sriert'f'\\ '■» ;;»nvior iH9-2.

TUBERCULOSE EXPÉRIMENTALE CHEZ LES LOMBRICS. o39

recouvert d'une faible couche de sable de rivière, ainsi que le font les jardiniers ; par-dessus ce sable, on dispose (à l'exception du vase nM) un peu de terre de bruyère sur laquelle on étend des fragments de poumons tuberculeux provenant d'une autopsie récente pratiquée à THôtel-Dieu; enfin on introduit 10 lombrics assez volumineux et tous bien vigoureux. Chaque vase plonge dans une assiette dans laquelle on a soin de tenir de l'eau destinée au maintien de l'humidité de la terre, humidité indispensable à la vie des vers de terre.

Les vases ainsi préparés sont ensuite divisés en 6 groupes, qui se distinguent par la manière dont on recouvre les vers et les organes tuberculeux destinés à les contaminer.

Le premier groupe ne comprend qu'un vase (vase n" 1), et nous le remplissons avec la terre végétale ordinaire qui nous avait servi pour nos expériences antérieures ; nous n'ajoutons pas de substances tuberculeuses, mais nous introduisons dix lombrics nouvellement recueillis.

Dans le deuxième groupe (vases n'^' 2, 3, i, 5 et 6) nous mettons de la terre de bruyère pure.

Dans le troisième groupe (vases n""* 7, 8, 9, 10 et 11) nous disposons à la surface de la terre de bruyère une couche de sable de rivière de 2 centimètres environ.

Les vases du quatrième groupe (vases n"* 12, 13 et 14) sont remplis uniquement de sable de rivière.

Ces différents vases sont placés à la température ordinaire du laboratoire, température assez variable, qui a oscillé entre quelques degrés au-dessus de zéro et + 20**C. environ; les cinquième et sixième groupes

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sonl au contraire installés dans une éluve chauffée à la température constante de -h 30 C. Ces deux derniers groupes peuvent du reste être éliminés dès à présent, car malgré le soin que Ton a eu d'éviter la dessiccation de la terre, les lombrics ont dû périr et se putréfier, et on n'a pu en découvrir aucun deux mois après.

On recouvre ensuite chaque vase avec un obturateur en papier percé de trous, et on laisse le tout en place jusqu'au 4 février 1892.

A celte date, on fait un examen des déjections de lombrics recueillis à la surface des vases n**' 2, 7, 10, 11, 12, 13, 14, 15 et 16. Les préparations sont traitées par les méthodes de double coloration d'Ehrlich (procédé lent) et d'Herman (procédé rapide, mais dans aucune on ne voit de bacille tuberculeux de Koch.

Le 29 mars 1892 on fait les expériences suivantes : 1' on recueille des excréments frais de lombrics à la surface des vases n ' 2 et 3 (deuxième grou|)e , Set 10 (troisième groupe) et 13 (quatrième groupe.. On fait une (lilulion de ces déjections dans du bouillon stérilisé, et, avec 1 ce. de la dilution ainsi obtenue, on inocule lecobave n" 1 : avec les excréments des vases n" 2 et 3, le cobaye n' 2 avec le mélange des déjections recueillies à la surface des vases n" 8 et 10 : enfin le cobaye n 3 avec les matières fécales provenant (lu vase n' 13.

2 On recueille d'autre part un lombric dans les vases n' 1 premier groupe), n' o (deuxième groupe . n 9 troisième groupe) et n' li i quatrième groupe), et, après avoir opéré une stérilisation et un lavage aseptique prolongé de ces vers, à l'eau chaude, à

ralcool et à Teau stérilisée, on supprime le tube digestif, et on dilue les organes génitaux dans du bouillon stérilisé ; on se sert de cette dilution pour inoculer les cobayes n*" 4 (vase nM), n** 5 (vase n*" 5), n'^ 6 (vase n° 9), n* 7 (vase nM4). C'est à cette époque que Ton s'aperçut de la disparition totale de tous les lombrics renfermés dans les vases n""* 15 et 16 qui avaient été déposés dans une étuve à + 30* C. Des préparations furent faites avec les déjections de lombrics d'une part, avec les organes raclés d'autre part ; mais malgré l'emploi des procédés de coloration habituels, il fut impossible de déceler la présence du bacille tuberculeux de Koch.

Les cobayes n°* 1, 2, 3, 4 et 5 furent inoculés le 29 mars 1892 ; les cobayes 6 et 7, seulement le 31 mars 1892. A l'heure actuelle, tous ces animaux sont morts ou ont été sacrifiés, et tous ont présenté à l'autopsie les lésions caractéristiques de la tuberculose.

Obs. I. Cobaye n* 1. — Inoculé le 29 mars 1892 sous la peau de la cuisse droite avec 1 ce. de dilution de déjections de lombrics nourris de substances tuberculeuses et placés dans de la terre de bruyère pure (vases n"** 2 et 3, 2* groupe).

Dès le 26 avril 1892, on constate une induration ganglionnaire considérable dans Taine droite. Le 5 mai 1892, on constate que les ganglions inguinaux droits ont suppuré; il existe dans cette région une eschare et un trajet ûstuleux. La persistance du môme état est notée àla date du 14 mai 1892.

Mort le 20 juin 1892.

Autopsie le 21 juin 1892.

1® Les ganglions inguinaux droits ont un contenu caséeux; ceux du côté gauche sont indurés et hypertrophiés.

2** Tous les ganglions sont tuméfiés ou caséeux : ganglions mésentériques, prélombaires, médiastinaux, sous-diaphragmatiques.

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3"^ Le foie présente quelques tubercules dont une partie a un contenu caséeux.

4® La rate, très volumineuse, est farcie de petits tubercules à contenu caséeux.

5^ Les poumons renferment un grand nombre de tubercules volumineux ayant subi la transformation caséeuse.

Obs. il Cobaye n"* 2. -- Inoculé le 29 mars 1892, sous la peau de la cuisse droite, avec 1 ce. de dilution de déjections de lombrics nourris de substances tuberculeuses et placés dans un vase contenant de la terre de bruyère surmontée d*une couche de sable de rivière (vases n^ 8 et 1 0, 3* groupe).

Le 26 avril 1892, on constate dans la région inguinale droite de cet animal plusieurs ganglions indurés qui ultérieurement suppurèrent et donnèrent naissance à une ûstule et à des eschares.

Ce cobaye est sacrifié et autopsié le 5 juillet 1892.

Autopsie. — 1^ Les ganglions inguinaux droits et gauches ont un contenu caséeux ; à droite il y a eu suppuration et eschare.

2"* Tuberculisation avancée des ganglions prélombaires, mésentériques, sous-diaphragmatiques et médiastinaux.

V Le foie renferme deux grosses masses caséeuses du volume d'un petit pois et de nombreux tubercules plus petits disséminés dans les différents lobes.

4° La rate, peu volumineuse, renferme plusieurs tubercules assez petits.

S"" Au niveau du cardia, la paroi stomacale présente un gros tubercule du volume d'un pois.

6° Les poumons présentent un grand nombre de tubercules caséeux.

Obs. 111. Cobaye n* 3. — Inoculé le 29 mars 1892 avec des déjections recueillies sur le vase n'^lS (4* grouj)e) dans lequel ont été renfermés des vers de terre nourris de substances tuberculeuses. Le vase n** 13 ne renferme que du sable de rivière pur.

Ce cobaye présente dès le 26 avril 1892 un peu d'induration des deux ganglions inguinaux droits. Cet état est constaté de nouveau les 10 et 14 mai 1892.

L'animal meurt le 20 juin 1892.

Autopsie le ai juin 1892.

1® Les ganglions inguinaux droits sont tuméfiés, mais n'ont pas de contenu caséeux.

2® La cavité abdominale est le siège d*un épanchement ascitique assez considérable.

3** Le foie est farci de gros tubercules à contenu caséeux, dont quelques-uns atteignent le volume d*un petit pois. On constate des adhérences de l'extrémité supérieure du foie avec les dernières côtes droites.

4® La rate, très volumineuse, renferme un grand nombre de tubercules identiques à ceux du foie, et, de même que pour ce dernier, l'extrémité supérieure de la rate adhère aux dernières côtes gauches.

5*^ Aux points de contact du foie et de la rate, la face inférieure du diaphragme porte quelques gros tubercules.

6^ La cavité thoracique renferme un liquide pleurétiqne.

7® Les poumons portent plusieurs grosses masses caséeuses.

8* On note de l'induration des ganglions prélombaires, sous-diaphragmatiques, médiastinaux, mésentériques, etc.

9® A la surface du rein droit on trouve quelques tubercules.

Obs. IV. Cobaye n* 4. — Inoculé le 29 mars 1892 avec une dilution des organes génitaux d'un lombric nourri de matières tuberculeuses et provenant du vase n"* 1 (1" groupe). Ce vase renferme la terre qui a servi aux premières expériences au sujet de la tuberculose chez les lombrics.

L'animal meurt le 24 avril 1892, et à l'autopsie on trouve une superbe tuberculose généralisée se traduisant par toutes les lésions ordinaires de la tuberculose et en outre par la transformation de la paroi stomacale tout entière en une masse tuberculeuse.

Obs. V. Cobaye n° 5. — Inoculé à la môme date que le précédent et de la môme manière, sauf que le lombric provenait du vase n* 5 appartenant au 2' groupe, c'est-à-dire ne renfermant que de la terre de bruyère.

Quoique l'on ne signale pas dans l'observation de l'induration ganglionnaire dans l'aine avant la fin du mois de juin,

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on peut constater, après avoir sacrifié Tanimal le 5 juillet 1892, que les divers organes présentaient des tubercules : foie, rate et poumons, et que la plupart des ganglions étaient tuméfiés.

Obs. VI. Cobaye n* 6. — Inoculé le 31 mars 1895 au moyen d*une dilution d*organes d*un lombric provenant du vase n^ 9 (3^ groupe, terre de bruyère et couche de sable à la surface).

Le 26 avril 1892 et le 5 mai 1892, Tobservation porte qu*il n*a pas été constaté d*induration ganglionnaire dans Taine droite.

L*animal meurt dans la nuit du 9 au 10 mai 1892 et ne présente à l'autopsie que des lésions tuberculeuses peu accentuées :

1^ Les ganglions inguinaux sont normaux;

2^ La rate est normale ;

3^ Le foie porte quelques petits tubercules peu nets;

4° Les poumons sont sains : il existe pourtant un ganglion induré dans le médiastin ;

5"^ Quelques ganglions mésentériques.

Le diagnostic de tuberculose est confirmé par Texamen microscopique, qui montre, après double coloration des préparations, des bacilles de Koch dans le foie et les ganglions mésentériques.

Obs. VII. Cohai/e n°7. — Inoculation le 31 mars 1892 avec les organes d'un lombric traité comme les précédents et recueilli dans le vase n° 14, rempli de sable de rivière.

Aux dates des 26 avril 1892, 5 mai et 14 mai 1892, on signale la présence dans Taine droite d'un ganglion induré qui ne suppuro pas.

L'animal o^t sacrifié le 5 juillet 1892, et on ne trouve à Tautopsie que de la tuberculose de quelques ganglions, de la rate et des poumons.

Dans toutes les expériences que nous avons faites, nous avons toujours réussi à rendre des cobayes tu-

berculeux par l'intermédiaire de lombrics nourris de substances tuberculeuses.

Tout d'abord, remarquons que jamais nous n'avons obtenu d'insuccès, ce qui nous permet d'écarter de suite une objection qui pourrait nous être faite, à savoir que nos expériences ne sont pas concluantes en raison du petit nombre d'observations. Nous avons varié nos procédés d'expérimentation, néanmoins les résultats ont toujours été les mêmes.

Deux faits découlent de ce travail. Tout d'abord il est établi que le bacille tuberculeux de Koch peut vivre dans les tissus d'animaux possédant une température peu différente de celle du milieu dans lequel ils vivent ; ce fait avait été établi déjà pour la grenouille et le triton : ces nouvelles expériences montrent qu'il en est de même pour un invertébré inférieur, le lombric. Là encore nous voyons que le bacille de Koch ne donne pas naissance à des productions morbides particulières comparables à des tubercules : il n'y a donc pas tuberculisation à proprement parler, mais bien infiltration du microbe à travers les tissus. Non seulement le microbe de Koch peut vivre dans les tissus d'animaux à température variable, mais il y persiste longtemps à l'état actif, soit qu'il conserve sa virulence, soit qu'il se reproduise, ce qui n'a pu être constaté; dans notre première série d'expériences, on voit qu'un lombric mis en contact avec des matières tuberculeuses le 16 juin 1891 contient encore dans ses organes le 28 juillet 1891 des bacilles de Koch capables de rendre tuberculeux trois cobayes (observations 1, 2 et 3, première série).

Dans notre deuxième série d'expériences, qui da-

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tent du 26 janvier 1892, nous voyons que, deux mois après, les organes de lombrics renferment encore des bacilles tuberculeux (observations 5, 6 et 7) et que leurs déjections en contiennent également (observations 1, 2 et 3, deuxième série).

Le deuxième fait établi par nos expériences et qui intéresse surtout Thygiène, c'est que les déjections de lombrics nourris de substances tuberculeuses et ramenés à la surface de la terre contiennent des bacilles tuberculeux de Koch, etcela deux mois encore après que Tenfouissement a eu lieu. Il s'ensuit que les lombrics semblent pouvoir être des agents actifs de dissémination de la tuberculose en ramenant à la surface les bacilles des substances tuberculeuses enterrées. D'autre part, les bactéries tuberculeuses peuvent vivre longtemps dans la terre, puisque la terre du vase n*" 1 dans notre deuxième série d'expériences, avait été chargée de produits tuberculeux le 16 juin 1891 (crachats) et le 19 novembre 1891 (poumons), et que le 29 mars 1892 les lombrics qui y. ont été déposés ont pu être infiltrés par le bacille de Koch et infecter le cobaye n^ 4. 11 semble donc tout k fait rationnel de supposer que les lombrics peuvent avec leurs déjections ramener à la surface de la terre les bacilles de Koch recueillis sur les cadavres phtisiques enfouis dans les cimetières. Il est certain que, quelle que soit la composition delà terre, pourvu qu'elle soit assez perméable pour permettre au lombric d'expulser ses excréments, ceux-ci conservent la même virulence; dans les observations n"*' 1,2 et 3 en effet, l'on avait de la terre de bruyère, pure dans le 1" cas. avec une couche de sable à la surface dans le 2* cas, enfin du sable pur dans le 3' cas.

Nous nous croyons donc autorisés à poser les conclusions suivantes :

i"" Les lombrics peuvent être infectés dans leurs

DIVERS ORGANES, ET SPÉCIALEMENT DANS LEURS ORGANES GÉNITAUX, PAR LE BACILLE TUBERCULEUX DE KOCH INTRODUIT PAR LA VOIE DIGESTIVE ;

2"" Le BACILLE DE KoCH NE DÉVELOPPE PAS CHEZ LES LOMBRICS DES PRODUCTIONS COMPARABLES AUX TUBERCU- LES : IL s'infiltre seulement dans LES TISSUS ;

S'* Les ORGANES de lombrics NOURRIS AVEC DES MATIÈ- RES TUBERCULEUSES, AINSI QUE LEURS DÉJECTIONS, INO- CULÉS A DES COBAYES, RENDENT CES ANIMAUX TUBER- CULEUX;

A-" Il EST PERMIS DE CONSIDÉRER LES LOMBRICS COMME DES AGENTS POSSIBLES DE DISSÉMINATION DE LA TUBER- CULOSE EN RAMENANT A LA SURFACE DE LA TERRE, AVEC LEURS EXCRÉMENTS, DES BACILLES RECUEILUS SUR LES CADAVRES DES TUBERCULEUX ENFOUIS DANS LES QMETIÈ- RÊS: CES BACILLES, UNE FOIS A LA SURFACE DU SOL, PEU- VENT SE COMPORTER COMME CEUX DES CRACHATS TUBER- CULEUX, EN SE MÊLANT COMME EUX AUX POUSSIÈRES ATMOSPHÉRIQUES, QUI, RESPIRÉES OU AVALÉES PAR UN SUJET PRÉDISPOSÉ, PEUVENT DÉTERMINER CHEZ LUI LÉ DÉVELOPPEMENT DE LA TUBERCULOSE.

Juillet 1892.