RÉACTIFS

Nous donnerons ici une indication sommaire des principaux réactifs employés dans les observations microscopiques des végétaux, renvoyant pour leur mode d'emploi aux détails circonstanciés que nous donnons dans le cours de l'ouvrage.

Les réactifs utilisés pour l'étude des éléments et des tissus ou organes végétaux peuvent se classer de la manière suivante : d'après leur action, on distingue des réactifs colorants^ dur^ CissaniSf altérants.

BéaeUffl eoloranto. — Carmin, — 15 à 30 centigrammes de carmin sont dissous dans la quantité d'ammoniaque voulue pour avoir une liqueur neutre, et on ajoute 30 grammes d'eau distillée. On filtre et on additionne de 30 grammes de glycérine et de 8 à 10 grammes d'alcool. Beaucoup d'autres formules ont été proposées; ce qu'il faut rechercher, c'est que la solution ne soit pas alcaline. Le carmin colore le protoplasma et le nucléus.

Eau iodée. — L'eau iodée que l'on obtient en laissant un excès d'iode en contact avec de l'eau distillée sert à déceler la présence de l'amidon. Associée à l'acide suUurique, elle colore la cellulose en violet. L'eau iodée colore en jaune le protoplasma.

Chlorure de zinc iodé. — Réactif de la cellulose.

On peut préparer ce réactif de plusieurs manières; voici le

procédé de M. R^dlkofer. On fait à la température ordinaire, noe solution de zinc dans Tacide chlorhydrique, on évapore à une température qui ne dépasse pas 100*, et on Tamène à Tétat d un sirop dont la densité soit égale à 2.0; on étend alors ce sirop jusqu*à le réduire à la densité de i .8, en y ajoutant 12 parties d'eau pour iOO de solution. Dans 100 parties du liquide ainsi obtenu, on dissout, à une douce chaleur, 6 parties dModure de potassium et autant d'iode qu'il peut en prendre. Ainsi préparée, la solution de chlorure de zinc iodé a la consistance sirapeuse de Tacide sulfurique concentré; elle est colorée en brun jaunâtre clair. On peut l'étendre h différents degrés^ selon le besoin, son action variant sensiblement avec sa concentration.

Acide nitrique, — Colore en jaune les matières azotées, surtout si l'on fait suivre son action de l'addition d'un peu d'ammoniaque.

Réactif de Milon^ nitrite de mercure. — Ce réactif, qui colore en rouge les matières azotées, se prépare en dissolvant du mercure pur dans un poids égal d'acide azotique. La réaction s'établit à froid ; à la fin on chauffe pour achever la dissolution du mercure. On étend ensuite la liqueur de deux volumes d eau pour un volume de la dissolution mercurielle.

Nous indiquerons en lieu utile les réactifs colorants pi:opres à certaines substances et que Ton obtient par l'action successive de plusieurs agents chimiques.

WÈèmeUfm doreiMMBta. — AkooL — L'alcool à 90* durcit les tissus et coagule le protoplasma. Plus concentré, son action coagulante diminue, son action durcissante augmente. Nous verrons plus loin tout le parti qu'on peut tirer de ce réactif.

méacUfs latéraato. — Acide sulfurique. — S'il est assez concentré, il dissout la cellulose. Associé au sucre ou à l'iode, il devient an réactif colorant.

Acide acétique. — Cet acide est employé pour éclaircir les coupes en les rendant plus transparentes, et pour décomposer le carbonate de chaux dont on veut caractériser la présence dans certains tissus végétaux.

Potasse. — Employée pour dissoudre la matière incrustante des cellules, etc.

44 GUIDB DB HICaOCnÀPHlB.

Oxyde de cuivre atamôniacal. -^ Dissout la cellulose. Ge réactif se prépare en di&solvant de l'oxyde de enivre récem* ment précipité et encore humide dans de Tammoniaque liquide.

Chhrate de potasse. -^ Il sert dans le procédé de macération de Schulze. On prend Tofajet que Ton coupe en tranches minces. On les dépose sur le porte-objet et on tes couvre 'd*une quantité de chlorate de potasse égale à leur volume, f^ts on ajoute quelques gouttes d'acide nitrique. La lame de verre est ensuite exposée pendant une à trois minutes à la chaleur d'une lampe à alcool. Après la réaction, on lave, en répandant à plusieurs reprises de Teau au moyen d'un pinceau, sur la préparation. On parvient de cette façon à isoler les cellule^. La macération de Schulze doit toujours se faire loin du micros* cope, les vapeurs qui se dégagent pouvant endommager les lentilles.

Lorsqu'on a procédé à l'application du réactif, xl s'agit de monter la préparation, c'est^-dire de la placer dans ira véhi* cule approprié sur le porte^objet, et de la recouvrir d'une lamelle. Le véhicule a pour but d'unepart de conserver la préparation, d'autre part de constituer un milieu entre les deax lamelles, dont l'indice de réfraction se rapproche de celui du verre ; sans ce liquide l'effet du couvre-objet sur l'émergence des rayons transmis, dont tious avons parlé phis haut, serait à peu près nul.

§ 2i. VÉHICULES OU LIQUIDES CONSERVATECRS.

Les véhicules employés pour conserver les préparations végétales ne sont pas très-nombreux. On est guidé dans leur choix par la nature de la préparation que l'on veut conserver. Mais il faut bien se rappeler que certains de ces véhicules qui sont inoffensifs pour une préparation donnée, deviennent de véritables réactifs pour d'autres, ainsi que nous allons le montrer.

Les liquides conservateurs les plus employés sont les suivants.

caiycériae. — On emploie la;glycérine pore et neotre« Ce liquide agit à la fois comme conservateur et comme éclaircissant.

CBAP. I. — DES HICBOSOOPBS ET M LEUR EMPLOI. 4&

Sa densité étant assez considérable, on ne doit pas remployer pure lorsqu*on veut conserver sans altération des coupes de jeunes tissus, car elle eoBirackepiiil \e protoplasma. On Tadditionne d'eau ou Ton se sert d'un autre véhicule. La glycérine est souvent additionnée de quelques gouttes d'aeidQ acétique.

aim«i. ^^ 11 ne peut être employé pur parce qu'il agit comme réactif ; on peut en former néanmoins divers liquides conservateurs.

VmMmm^w evéM«té, --^ A été employé par Thwaitespour la préparation des algues avee leur matière colorante.

Alcool..,., ,., ,,., l

E4adi9UUée....,..,,.. , ,, H

Créosote jusqu'à saturation.

Oq filtre et on laisse reposer.

Emm cmmpbrée. — Ce liquide est souvent employé pour la conservation des algues ou des préparations délicates que la glycérine pourrait altérer. On peut le préparer au moyen de l'eau et de Talcool camphré jusqu'à précipité, ou mieux, afin d'éliminer Talcool, en laissant dans un flacon rempli d*eau un excès de camphre en poudre, etçn agitant de temps en temps.

Chlorav« a» calciuia. — S*emploie en dissolution peu concentrée.

Cblorure de cUciam seç. •...,.« t . 1 partie.

Eaa distillée,, ,.,...... 3 —

Ce véhicule ne doit pas êtrç employé pour conserver les préparations qui renferment de ramidon.

Ij»f ne de Cop«l et Bni&me de Canada. — Servent auSsi pour

conserver les préparations microscopiques, principalement les coupes de bois.

■nile dne des horlof^ri. — Cette huile sert à conserver certaines préparations, pollen, spores, etc. Elle est préférable aux huiles essentielles de citron ou d*anis autrefois conseillées, qui ont Finconvénient d'attaquer les vernis employés à clore les préparations.

46 GUIDE DE MICROGRAPHIE.