CHAPITRE XII

PRODUITS D’HYDROLYSE DES PROTÉINES

Principaux produits de dédoublement des protéines

Acides mono aminés :

Glycine (glycocolle) CH2NH2-COOH

Alanine CH3-CHNH2-COOH

Valine (a. amino-valérique) C3H7-CHNH2-COOH

Leucine CiH9-CHNH2-COOH

Sérine CH2OH-CHNH2-COOH

Acide aspartique COOH-CH2-CHi\H2-COOH

— glutamique COOH-(CH2)2-CH.\TH2-COOH

Acides diaminés :

Lysine CH2NH2-(CH2)3-CHNH2-COOH

Arginine NH2-CNH-NH-(CH2)3-CHNH2-COOH

Acide thioaminé :

Cystine COOH-CHNH2-(CH2S)2-CHNH2-COOH

Corps cycliques :

Phénylalanine C«H3-CH2-CHNH2-COOH

Tyrosine C6HLOH-CH2-CHNH2-COOH

Proline C'H«N-COOH

Oxyproline C^H'N.OII-COOH

Histidine C3H3N2-CH2-CHNH2-COOH

Tryptophane C8H6N-CH2-CHNH2-COOH

PRODUITS D’HYDROLYSE DES PROTÉINES

Hydrolyse acide des substances protéiques du sérum

226. — Los albumines cl globulines solubles soûl coagulées par les acides minéraux ; si on chauffe, le eoagulum se redissoul eu se transformant en acidalbumine ; il y a ensuite formation d’albumoses, puis de peptoncs ; on obtient finalement un mélange d'acides mono et polyaminés. La formation de ces produits est directement en rapport avec la durée du chauffage.

227. — Pour étudier la marche de l'hydrolyse, on introduira, dans un ballon de 200 centimètres cubes de capacité, 50 centimètres cubes de sérum sanguin (de bœuf ou de cheval, par exemple), et G centimètres cubes d’acide sulfurique concentré (ce qui correspond à 20% en poids, à peu près). On bouche avec un bouchon de liège portant un long tube de verre qui sert de réfrigérant, et on porte à l'ébullition, en agitant sans cesse et en veillant à la formation de mousse.

228. — Après dix minutes, on relire du feu, et on prélève 10 centimètres cubes de liquide, auxquels on ajoute G grammes d’hydrate de baryum cristallisé, dissous dans le moins possible d’eau bouillante (20 centimètres cubes). On vérifie que le liquide est légèrement acide (acidulcr au besoin par l’acide sulfurique étendu) et on filtre.

Le liquide donne nettement la réaction du biuret ; un essai, saturé à froid de sulfate d’ammonium cristallisé, donne un précipité, dû à la présence d’albu-

HYDROLYSE DES SUBSTANCES PROTÉIQUES

moses; la formation d’un précipité bleu par addition d’une solution saturée d’acétate cuivrique, dans un deuxième essai, montre qu’il s’agit d’albumoses primaires.

229. — L’hydrolyse, interrompue après dix minutes, est reprise; le chauffage est poursuivi pendant* une heure; après ce temps, on prélève 10 centimètres cubes de liquide, que I on traite comme plus haut.

L’absence de précipité par le sulfate d’ammonium à saturation et par l’acétate cuivrique indique qu’il n’y a plus d’albumoses; en revanche, la réaction du biuret, très sensible, montre la présence des peptones.

230. — Le reste du liquide est maintenu à l’ébullition lente pendant six à huit heures ; après ce temps, on ne constate plus aucune réaction du biuret, donc les peptones ont disparu. Le liquide est additionné d’une solution saturée et bouillante d’hydrate de baryum, de manière à ce que la réaction devienne nettement alcaline ; on chauffe à l’ébullition en agitant sans cesse, et on constate le. dégagement d’ammoniaque. Lorsque ce dégagement a cessé, on ajoute assez d’acide sulfurique, goutte à goutte, pour rendre le liquide nettement acide, et on filtre. Le liquide filtré, additionné de 5 °/0 d’acide sulfurique et d’une solution d’acide phospholungstique, donne un précipité dû à la présence des acides diaminés. Ce précipité étant séparé par filtration, on ajoute au liquide restant une solution de sulfate de cuivre, puis assez de soude pour le rendre légèrement alcalin ; on obtient par chauffage au bain-marie un liquide coloré en bleu foncé par les; combinaisons cuivriques des acides monoaminés.

PRODUITS D'HYDROLYSE DES PROTÉINES

Caractères des albumoses et peptones.

Analyse d’une peptone commerciale

231. — Les albumoses et peptones sont solubles dans l’eau Q) et non coagulables parla chaleur. Les premières se précipitent de leurs solutions aqueuses, acidifiées par l’acide acétique, par saturation avec le sulfate d’ammonium, les secondes ne précipitent pas. Pour rechercher ces produits de dédoublement dans une peptone commerciale, on dissoudra 1 gramme de celle-ci dans 5 centimètres cubes d’eau, on acidifiera avec deux gouttes d’acide acétique et on ajoutera dans le liquide du sulfate d’ammonium pulvérisé, en agitant pour favoriser la dissolution. Quand il reste un petit excès de sel non dissous, la saturation est complète, eL la presque totalité desalbumoses est précipitée. On filtre, et dans le liquide on recherche la présence des peptones vraies par la réaction du biurel. On peut utiliser celle solution pour étudier les caractères des peptones.

232. — Le précipité resté sur le filtre esl lavé avec la solution saturée de sulfate d’ammonium, puis égoutté et essoré entre des feuilles de papier à filtrer. On le redissout ensuite dans quelques centimètres cubes d’eau, et cette solution peut être uLilisée pour l’étude des caractères des albumoses que l’on trouvera résumés dans le tableau ci-contre.

(') A l’exception des hétéro-albumoses, qui ne se dissolvent qu’en présence d’une petite quantité de sels neutres.

RÉACTIONS DÉS PHOTK1NKS, AÉHL'MOSÉS ICT PliPTONKS

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