INFLUENCE DE LA QUANTITÉ DE SUCRASE
4.... 1 centimètre cube sucrase active -j- 4 centimètres cubes acide acétique à 1,5 %.
Alcalin 5 i centimètre cube sucrase active -f- 4 centi-
mètres cubes de soude décime.
Neutre G 1 centimètre cube sucrase + 4 centimètres
cubes d’eau.
Le volume est ainsi de 15 centimètres cubes dans chaque tube. Ceux-ci doivent être étiquetés avec soin, afin d’éviter les erreurs. On laisse le dernier tube (n° 6) à la température ordinaire, les autres étant maintenus à la température de 56° dans un bain-marie muni d’un régulateur. Après une heure, on mesure le pouvoir réducteur de chaque tube. Pour cela, il suffit de compter le nombre de gouttes nécessaires pour décolorer exactement 2 centimètres cubes de liqueur de Fehling (voir § 95).
On voit ainsi que ce nombre est infini pour 1 et 5, très grand pour 4, moindre pour 2 et minimum pour 3. Il est plus grand pour 6 que pour 2.
Par conséquent, la sucrase est plus active à 56° qu'à la température ordinaire ; de plus, elle est favorisée par la dose d’acide optima du tube 3 (1 p. 1.000), gênée par une acidité plus forte, entravée complètement par les alcalis.
Influence de la quantité de sucrase sur l’hydrolyse
du sucre
293. — L’action de la sucrase est proportionnelle à la quantité de diastase employée, tout au moins dans les premiers moments de la réaction. Pour le vérifier,
IIVDROLASES
on répartit dans quatre tubes à essai 10 centimètres cubes de solution de saccharose à 20 °/0 et on ajoute des quantités de solution diastasique proportionnelles aux nombres 1, 2, 3, 4; par exemple 0wn3,5; lcm3; l''m:{,5; 2cm3, en complétant le volume à 12 centimètres cubes avec de l’eau. On place au bain-marie à 50°; au bout d’une demi-heure, on arrête l’action en alcalinisant légèrement par addition de quelques gouttes de lessive de soude ou de potasse et on dose le sucre interverti formé ('). On trouve des quantités sensiblement proportionnelles aux nombres 1, 2, 3, 4, c’est-à-dire aux quantités de diastase mises en jeu.
Préparation de l’émulsine d’amandes
294. — On plonge un certain nombre d’amandes douces(10 à 12) dans 50 centimètres cubes d’eau bouillante, pendant une minute au plus. On les relire et, grâce à ce traitement, on peut les débarrasser facilement de leur enveloppe par simple pression entre le pouce et l’index. Les amandes sont broyées dans un mortier; lorsqu’on a obtenu une pâte fine, on dilue celle-ci avec 30 centimètres cubes d’eau, puis on ajoute 1 centimètre cube d’acide acétique à 10 °/0, qui détermine la production d’un coagulum de matière protéique, et on filtre. Le liquide filtré, additionné d’une goutte d’acide acétique à 10 0/'0, doit rester limpide. Si
(') En utilisant le pouvoir réducteur ou le pouvoir rotatoire. Dans ce dernier cas, on peut arrêter l'action de la sucrase en ajoutant à chaque tube, au lieu de soude, 1 centimètre cube de solution de chlorure merr, urique à 1 */,.
ACTION DE T. KMULSINE SUR DIVERS 01,1 COSIDES 22/
au contraire il se produisait un précipite, on ajouterait poulie à goutte, en remuant, assez de réactif pour amener une précipitation totale, et on filtrerait il nouveau. On obtient ainsi une solution parfaitement limpide et très active.
Action de l’émulsine sur divers glucosides
295. — On place dans une série de tubes à essai 10 centimètres cubes de solutions de divers glucosides, telles qu’un môme volume de solution fournisse à l'hydrolyse une molécule de glucose, soit :
10 centimètres cubes d’amygdaline à 2,3 °/0 pour le tube l
10 — de salicine à2,8°/0 — 2
10 — d’arbutine à2,7°/0 — 3
et on ajoute I centimètre cube de solution d'émulsine à chaque tube. On maintient au bain-marie à 45° pendant une demi-heure, puis on détermine le pouvoir réducteur du liquide de chaque tube en comptant le nombre de gouttes nécessaire pour décolorer 2 centimètres cubes de liqueur de Fehling.
On voit que la vitesse d’hydrolyse des divers glucosides n'est pas la môme : l’amygdaline est hydrolysée le plus rapidement, puis viennent la salicine et enfin l'arbutine.
11 faut s’assurer que la solution d’émulsine ne réduit pas elle-même; dans une recherche exacte, on doit, si l’on fait des dosages de sucre, déduire des quantités trouvées la quantité de glucose renfermée dans la solution diastasique employée.
IIYDROLASES
Formation de l’essence d’amandes amères
296. — Les amandes amères contiennent à la fois de l’émulsine et de l'amygdaline, localisées dans des cellules différentes; lorsqu'on les broie, la diastase vient au contact du glucoside qui est dédoublé suivant l’équation :
