CHAPITRE XVIII

Généralités

328. — Pour étudier les transformations chimiques produites par les microbes, il est nécessaire d’opérer sur des espèces isolées et bien caractérisées. On isolera les espèces par les procédés ordinaires usités en bactériologie, et l’on aura soin d’en contrôler la pureté aussi bien par la constance d’aspect des cultures dans les milieux appropriés que par les méthodes de coloration et l’examen microscopique.

Lorsqu’on sera en possession d’une espèce pure, on la fera agir sur la substance dont on veut connaître les transformations, préalablement dissoute dans un milieu aussi bien défini que possible. Ce milieu ne devra pas, en principe, contenir de substances qui puissent gêner la recherche et le dosage des produits dus à l’action du microbe.

D’après ce qui précède, on est conduit, dans l’étude des fermentations, à considérer successivement : la

2t)0 NOTIONS DE TECHNIQUE MICROIJIOLOGIOUE

préparation des milieux de culture, l'ensemencement et la séparation des bactéries, les méthodes de coloration, enfin, les caractères particuliers de chaque fermentation.

Il conviendra, dans cette étude, de faire une place à part aux espèces anaérobies, qui exigent une technique particulière.

Milieux de culture

329. — Les milieux de culture peuvent être liquides ou solides. Comme milieux liquides, on emploie des dissolutions contenant de petites quantités de sels minéraux, chlorure de sodium, phosphates, etc., et des substances organiques, sucres, substances protéiques, etc. On emploie beaucoup le bouillon de viande, les décoctions de levure ou de touraillons, additionnés ou non de divers corps nutritifs, glycérine, sucres, peptone, etc.

Habituellement, pour entretenir les cultures, on utilise des tubes à essai ordinaires, contenant 10 à 15 centimètres cubes de milieu liquide. Celui-ci y est introduit commodément au moyen d’un entonnoir de 250 à 500 centimètres cubes de capacité, dont la douille porte un tube de caoutchouc de quelques centimètres de longueur, pouvant être obturé au moyen d’une pince de Mohr et muni d’un ajutage de verre étiré. Le tube garni de liquide est ensuite bouché à l’aide d’un tampon d’ouate et stérilisé comme il est indiqué § 331.

330. — Les milieux solides peuvent être formés en solidifiant les liquides précédents au moyen de gélatine