PRÉPARATION DES PIPETTES

soufflant par le robinet, mais surtout à l'aspect du jet gazeux. Tant que celui-ci est formé par un mélange d’air et de vapeur, le nuage produit par condensation varie sans cesse d’aspect; ce nuage prend une opacité constante dès que tout l'air est expulsé. A ce moment, on ferme le robinet, et on attend que l’aiguille du manomètre marque la température désirée (*). Dès que celle-ci est atteinte, il faut la maintenir constante en diminuant convenablement la hauteur de la flamme.

Après un chauffage de durée suffisante (pendant lequel on doit surveiller très fréquemment le manomètre), on éteint le feu et on laisse refroidir. Lorsque l’aiguille, du manomètre est revenue au zéro, et .seulement à ce moment, on ouvre avec précaution le robinet de vapeur, puis on desserre les écrous et on enlève le couvercle.

Préparation et stérilisation des pipettes Pasteur

332. — On coupe, au moyen d’un couteau h verre, des fragments de tubes de verre de 20 à 25 centimètres de longueur. Le diamètre le plus convenable est de 7 à 8 millimètres. On arrondit les extrémités en les flambant au chalumeau, puis, après refroidissement, on introduit aux deux extrémités des tampons d’ouate assez serrés, de 2 centimètres environ de longueur, qui ne doivent pas déborder. Cetle opération se fait très bien

(«) Si, pendant ce temps, il se produit une fuite de vapeur en un point quelconque de la circonférence du couvercle, on l'arrête en resserrant légèrement les écrous correspondants soit à la main, soit à l’aide d'une clé.

en poussant les tampons avec un morceau de gros fil de fer ou un fragment de baguette de verre effilé. Lorsque les tubes sont garnis d’ouate, on les stérilise en les plaçant dans une étuve à air chaud, en tôle, dans laquelle on les porte à la température de 180° pendant quinze minutes. Si la stérilisation est suffisante, les cotons doivent être légèrement roussis, à peine teintés de jaune clair. Après refroidissement, on conserve les tubes dans cet état.

On peut également stériliser les pipettes en les chauffant à l’autoclave vers 120°, par exemple, mais il faut alors les laisser sécher à l’étuve avant de s’en servir.

Lorsqu’on a besoin de pipettes stériles, on chauffe l’un de ces tubes par le milieu, en le tournant sans cesse dans la flamme du chalumeau; quand le verre est bien ramolli, on retire de la flamme et on étire, de manière à avoir une partie effilée de -40 à 50 centimètres de longueur, pas trop mince. On coupe celte effilure au milieu en la fondant au bord de la flamme, et on a deux pipettes stériles, dont il suffit de briser la pointe après refroidissement, au moment d’en faire usage.

Ensemencement des milieux de culture

333. — Celte opération a pour but de porter une semence dans un milieu de culture stérile, en évitant la contamination par les germes étrangers. On devra donc porter la semence, soit avec une pipette stérile, soit avec un fil de platine préalablement porté au rouge, puis refroidi, et éviter l’introduction des germes de l'air, en particulier.