DOUBLE COLORATION

Gram (solution contenant 1 gramme d’iode et 2 grammes d’iodure de potassium pour 300 centimètres cubes d’eau), que l'on l’ait agir environ deux minutes. On lave alors la préparation, qui a pris une teinte brune mordorée, avec de l’alcool absolu, tant que ce liquide se colore, on sèche et. on examine au microscope. Le S. vini est coloré en violet foncé, le ferment acétique n'est pas coloré.

On peut alors teindre ce dernier en rouge en faisant agir sur la préparation la solution aqueuse saturée de fuchsine, pendant vingt à trente secondes ; on lave à l’eau, puis on fait sécher et on examine.

344. — La méthode primitive de Gram a été modifiée par Nicolle de la manière suivante : on emploie pour la coloration une solution phéniquée de violet de gentiane (préparée comme la fuchsine de Ziehl), que l’on fait agir quatre à six secondes seulement; on recouvré ensuite de solution iodo-iodurée (à 1 gramme d'iode et 2 grammes d’iodure pour 200 centimètres cubes d’eau) que l’on renouvelle deux à trois fois, et qui doit rester en contact avec la préparation pendant quatre à six secondes; enfin on verse goulte à goutte un mélange de 5 parties d'alcool absolu avec 1 partie d’acétone, tant que ce mélange s’écoule coloré. On lave à l’eau, on sèche et on examine. Le procédé de Nicolle est plus rapide, mais d’une exécution un peu plus délicate que la méthode primitive.

rant est assez grande lorsqu’il se forme à la surface une mince pellicule irisée.

Le violet commercial renferme toujours une certaine quantité de dextrine insoluble dans l’alcool; la solution alcoolique saturée contient donc un excès de matière non dissoute et doit être filtrée au moment de l’emploi.