RECHERCHE DU GLYCOGÈNE

lion bleue due à la formation d’iodure d’amidon. Toutes les trois à quatre minutes, on prélève dans le ballon 1 centimètre cube de liquide que l’on traite de même par la solution d’iode. On obtient ainsi une série de teintes : bleu, violet, rouge violacé, rouge clair, acajou et marron clair. Lorsque le liquide ne se colore plus par l’iode, ce qui a lieu après vingt-cinq à trente minutes environ, on arrête l’ébullition et on vérifie que le liquide réduit fortement la liqueur de Fehling. L’amidon a été transformé par l’acide en dextrine, puis en glucose :

(C6Hl0O3)'1 -f- nH20 = nCfiH,206.

On voit, d'après celte équation, que 162 grammes d'amidon donnent 180 grammes de glucose, ou, ce qui revient au même, que 9 parties d’amidon donnent 10 parties de sucre réducteur. On peut se baser sur cette transformation pour doser l’amidon ; toutefois on n’oblienl un résultat quantitatif que si l’on opère la saccharification à l’autoclave ou si l’on fait bouillir assez longtemps.

Recherche du glycogène

113. — Extraction du glycogène des mollusques . L’hépatopancréas de la moule, de l’huître, de la coque, etc., est extrêmement riche en glycogène. Pour extraire ce dernier, on commence par broyer le corps du mollusque à l’aide d’un hache-viande ; on prend 30 grammes, par exemple, fie cette pulpe que l’on chauffe avec un poids égal de lessive fie potasse très concentrée (faite avec

100 POLYSACCHARIDES ÉLEVÉS

60 grammes de potasse en plaques pour 10 centimètres cubes d’eau), dans une pelile capsule de porcelaine, jusqu’à dissolution totale du tissu (quarante-cinq minutes à une heure). Pendant ce chauffage, on remplace au fur et à mesure l’eau qui s’évapore. On ajoute ensuite 00 centimètres cubes d’eau et on filtre sur un tampon d’amiante, en repassant sur le filtre les premières parties. On ajoute à 50 centimètres cubes du liquide filtré 25 centimètres cubes d’alcool à 95° (soif un demi-volume). Le précipité blanc jaunâtre de glycogène se rassemble; on décante sur un petit filtre sans plis le liquide surnageant, on lave le précipité avec 10-15 centimètres cubes d’alcool au tiers, et on le jette sur le filtre. Celui-ci est bien égoutté et essoré entre des doubles de papier à filtrer. Le contenu est redissous dans un peu d’eau tiède, ce (pii donne une solution opalescente, tpie l’on neutralise par l’acide acétique. Une goutte de solution d’iode donne une coloration rouge acajou; le liquide, additionné de 2 à 3 gouttes d’acide chlorhydrique et porté à l’ébullition pendant quelques minutes, réduit la liqueur de Fehling, par suite de la transformation du glycogène en glucose.

114. — Comme les filtrations ci-dessus sont toujours assez difficiles, il est préférable de centrifuger. Dans ce cas, on verse les liquides à éclaircir dans l’un des vases en verre du centrifugeur, on place ce vase dans son étui métallique, et on porte le tout sur le plateau d’une balance Roberval ; sur l’autre plateau, on place un second tube avec son étui métallique et on y verse de l’eau de façon à obtenir exactement l’équilibre des poids. 11 ne reste plus qu’à disposer la paire de tubes aux deux extrémités d'un même diamètre de k centrifugeuse et à