RÉACTION DE LA GUANINE ET DE LA XANTIIINE

par rammoniaque après refroidissement. Sous cette dernière forme, la réaction est donnée seulement par l’acide urique, la caféine et la xanthine.

Réaction de la guanine et de la xanthine

356. — Lorsque l’on chauffe avec précaution une parcelle de guanine ou de xanthine avec une goutte d’acide nitrique fumant, on obtient par évaporation de l’acide en excès une teinte jaune citron ; cette tache se dissout en orangé dans une goutte de lessive de soude. Si on évapore à nouveau la solution dans la soude, on voit la teinte devenir de plus en plus rouge et môme violacée. Celle réaction se distingue facilement de celle que donne l’acide urique dans les mêmes conditions.

L’adénine et l’hypoxanthine ne donnent pas de coloration lorsqu’on les traite de la même manière.

Dosage de la caséine dans le lait

357. — On opère sur 10 grammes de lait qui sont traités par un mélange d’alcool et d’éther, comme il est dit au § 213, afin d’en extraire la matière grasse.

La solution contenant la caséine est aussitôt précipitée par addition d’acide acétique à 5 'Yq, ajouté goutte à goutte, en remuant sans cesse. II en faut un volume égal à celui de la solution de soude à 1,5 employée au début pour dissoudre la caséine. Lorsque la précipitation est totale, on centrifuge, on décante le liqviide surnageant, et on délaie le précipité dans 20 à 30 centi-

PROTÉIDES ET DÉRIVÉS

mètres cubes d’eau ; on centriruge de nouveau et on recommence ce lavage encore une lois.

Les liquides décantés sont passés à travers un filtre i

taré ; on délaie finalement la caséine dans 50 à GO centi- j

mètres cubes d’alcool à 96'’, on la jette sur le filtre, et | on la lave, d'abord avec un peu d’alcool, puis avec 20 à 23 centimètres cubes d’éther. :

Le filtre et son contenu sont enfin séchés à l’étuve à lOo" jusqu’à poids constant.

On peut ensuite calciner, peser les cendres résiduelles et déduire leur poids de celui de la caséine.

Ouand on opère sur du lait bouilli, on pèse à la l'ois l’albumine coagulée et la caséine.

Dosage de l’acide urique et des bases puriques dans l’urine

358. — L’urine humaine renfermede 0^'', 3 à Oe'', 8 de corps puriques par litre; les trois quarts sont formés par de l’acide urique et le reste par des bases, xanthine, hypoxanthine, etc. Lorsque la proportion d'acide urique est assez élevée, une partie de ce corps se dépose par refroidissement de l’urine à l’état cristallisé ; sa forme est alors très caractéristique {fi(j. 33).

On peut doser rapidement et avec une exactitude suffisante l'acide urique et les bases puriques en bloc en précipitant ces com[)osés à l’état de combinaisons argento-magnésiennes, au moyen d’un volume connu de solution argentique employée en excès ; on déter- ’ mine ensuite la quantité d’argent restée en solution t (Procédé Haycraft modifié par Denigès).

DOSAGI^ DE l’acide UBIQUE DANS l’cRINE

359, — On commence par préparer une solution argenlo-magnésienne de la manièi*e suivante : on fait dissoudre 75 grammes de chlorure d ammonium et 50 grammes de chlorure de magnésium dans 400 centimètres cubes d’ammoniaque à 22“ B., en chauffant

Fig. 3.^. — Acide urique.

très légèrement; on ajoute de l’ammoniaque de manièreà amener le volume à 510 centimètres cubes environ, 011 mélange, puis on filtre la solution dans une üole jaugée de 1 litre contenant 500 centimètres cubes exactement mesurés d’une solution décime de nitrate d’argent (voir § 63).

Lorsque la fiole est remplie jusqu’au trait de jauge, on mélange bien son contenu et on a ainsi 1 litre de solution N '20 d’argent.

360. — Dans un verre à pied de 250 centimètres cubes, on verse 25 centimètres cubes exactement me-

PROTÉIDES ET DÉRIVÉS

surés de la liqueur argenlo-magnésienne, puis on y fait couler, en agitant, 100 centimètres cubes d’urine. On agite encore pendant quelques, instants, puis on filtre (à travers un filtre à plis) dans une fiole jaugée de 100 centimètres cubes. On prélève ainsi 100 centimètres cubes de liquide filtré correspondant à 80 centimètres cubes d’urine et on y dose l’argent. Pour cela, on les verse dans un verre à pied, on ajoute 10 centimètres cubes de solution N/ 10 de cyanure de potassium (^), 1 centimètre cube de solution d’iodure de potassium à 10 "/„ récemment préparée, et on fait couler une solution décinormale de nitrate d’argent, contenue dans une burette, en agitant sans cesse jusqu’à ce qu’il se forme un léger précipité persistant.

Les 10 centimètres cubes de cyanure de potassium N/10 correspondant exactement à la quantité d'argent introduite au début de l’opéiTition, il en résulte que le volume de nitrate d’argent ajouté correspond à la

(1) Pour préparer la solution décime de cyanure de potassium, on dissout 16 à 18 grammes de cyanure pur du commerce dans 1.100 centimètres cubes d'eau, on ajoute 10 centimètres cubes de lessive de soude à 36“ B., on mélange et on filtre s'il est nécessaire. Pour le titrage, on mesure 10 centimètres cubes de liquide que l’on verse dans un verre avec un égal volume d'ammoniaque à 22“ B., 50 centimètres cubes d’eau et 1 centimètre cube d’iodure de potassium à 10 “/o. On agite et on fait couler la solution de nitrate d’argent N/ 10 jusqu’à trouble persistant.

Soit n le volume de solution argentique employé; pour que la solution de cyanure soit décime, c’est-à-dire corresponde exactement à celle d’argent, it faut ajouter à 1 litre de solution de cyanure un volume d’eau égal à :

Cette solution se conserve assez bien ; il est prudent de vérifier son titre tous les quinze jours environ.

DOSAGE DE I.ACIDE UltlOUE DANS l’uRINE

quanlilé d’argent utilisée pour précipiter les corps puriques. (;ha(iue centimètre cube de solution décime d’argent correspondant à d’acide urique, la

quantité totale de corps purique (exprimée en acide urique) est donnée, en grammes par litre, par :

n étant le volume de nitrate d’argent N/10 utilisé.

361. — Pour doser seulement l’acide urique dans l’urine, on peut employer la technique suivante. On précipite l’acide urique à l’état d’urate d’ammonium ; ce sel, redissous en milieu alcalinisé par du borate de sodium et du bicarbonate de potassium, est titré au moyen d’une solution décinormale d’iode (Ronchèse).

A 100 centimètres cubes d’urine, on ajoute 15 centimètres cubes d’ammoniaque à 22^* B. et 15 grammes de chlorure d’ammonium; on laisse en contact une demiheure, puis on filtre, et le précipité (recueilli sur un filtre sans plis) est lavé avec 30 centimètres cubes d’une solution contenant, pour 1 litre, 130 centimètres cubes d’ammoniaque et 150 grammes de chlorure d’ammonium.

Le filtre bien égoutté est retiré de l’entonnoir, déplié avec précaution, puis son contenu est détaché complètement au moyen d’un jet de pissette (en opérant au-dessus d’un verre à pied) et la suspension intro- «luile dans un ballon de 500 centimètres cubes. On ajoute goutte à goutte de l’acide acétique à 10 jusqii’ù redissolution du précipité, puis assez d’eau

PUOTÉIDES ET DÉRIVÉS

pour amener le volume à 300 cenümèlres cubes environ ; on alcalinisc alors par addition de 20 centimètres cubes d'une solution saturée à la fois de borate de sodium et de bicarbonate de potassium et on verse une solution décinormale d’iode ('j, jusqu'à coloration nettement jaune de tout le liquide, persistant pendant une minute. Le virage ne pré.sente pas une très grande netteté. Chaque centimètre cube d’iode décinormal correspond à 0s'',0084 d’acide urique. Comme il reste en solution, lorsde la précipitation de l'urate d’ammonium, une quantité de ce sel correspondant à 0‘>''',001 d’acide urique, on voit que la teneur de l’urine en acide urique est donnée, en grammes par litre, par la formule :

dans laquelle n est le nombre de centimètres cubes de solution d’iode employés.

Dosage de la caféine

362. — La caféine est un dérivé purique (triméthylpurine) qui existe en proportion variable (1 à3 "/o) dans le café, le thé, le maté.

Pour la doser, on fait bouillir 10 grammes de produit réduit en poudre fine avec 100 centimètres cubes

(I) La solution décinormale d’iode est préparée en triturant dans un mortier d’iode pur et sec avec 25 à 30 grammes d’iodure de potassium et 10 centimètres cubes d’eau, puis amenant au volume de 1 litre avec de l'eau distillée.

DOSAGE DE l’aCIDE URIQUE DANS u’URINE 283

(l’eau. Après dix minuLes, on décante le liquide dans une fiole jaugée de 500 centimètres cubes, et on fait encore quatre extractions de la môme manière. On ajoute au liquide du sous-acétate de plomb en très léger excès, pour précipiter les matières étrangères, on complète au trait de jauge avec de l’eau, on mélange et on filtre. On recueille 400 centimètres cubes de liquide, auxquels on ajoute de l’acide sulfurique, goutte à goutte, pour précipiter le plomb; on filtre, on lave le précipité trois à quatre fois, et on concentre le liquide avec les eaux de lavage, de préférence dans le vide, jusqu’au volume de 30 à 40 centimètres cubes. On filtre dans une boule à décanter, on lave le ballon et le filtre, et on épuise le liquide par agitation avec 40 à 30 centimètres cubes de chloroforme. On décante le dissolvant dans un ballon, après l’avoir filtré, et on recommence l’épuisement trois à quatre fois, avec le même volume de chloroforme.

Les solutions chloroformiques sont distillées; le résidu est transvasé dans un vase à extrait et évaporé sur le bain-marie. La caféine cristallise; on la sèche jusqu’à poids constant et on pèse. Le poids multiplié par 12,5 donne la caféine rapportée à 100 grammes de produit.