GÉNÉRALITÉS SUR LES DIASTASES

une évaluation quanlitalivc de l’une au moins des substances formées.

393. — Dans les recherches dont la durée dépasse une à deux heures, on a toujours à craindre le développement des bactéries, surtout si on opère aux températures comprises entre 30® et oü®. Aussi, dans les cas où il sera impossible d’opérer aseptiquement, on devra avoir recours aux antiseptiques, choisis de telle sorte qu’ils n’entravent pas l’action de la diastase. Le fluorure de sodium, à la concentration de 1 “/(,, 2 ”/o au plus, peut être fréquemment utilisé; le chloroforme, employé en quantité telle que le liquide en soit saturé et à condition que les tubes ou vases utilisés soient bien bouchés, pour éviter l’évaporation superficielle de l’antiseptique, peut aussi rendre des services. Il convient de noter à ce propos que le chloroforme réduit la liqueur de Fehling; par conséquent, lorsqu’on aura à rechercher ou à doser un sucre parmi les produits d’une réaction diastasique, effectuée en présence de chloroforme, il conviendrade chasserd’abord ce dernier par une ébullition de quelques instants.

394. — D’après les transformations qu’elles accomplissent, les diastases peuvent être classées de la manière suivante (G. Bertrand) ;

1® Eydrolases, produisant un dédoublement avec fixation d’eau (ce sont de beaucoup les plus nombreuses) ;

2® Oxxjdases, fixant l’oxygène de l’air sur certains composés ;

3® Claslases, provoquant la rupture de la molécule, sans fixation d’aucune sorte.

HYDROLASlîS

Préparation d’une solution de sucrase de la levure

395. — Prendre 20 grammes de levure pressée du commerce et les mélanger dans un mortier avec 10 à 15 grammes de sable lin lavé, en ajoutant peu à peu 5 centimètres cubes d’eau, puis broyer le tout pendant quatre à cinq minutes. Ajouter 40 centimètres cubes d’eau, en plusieurs fois, bien mélanger et laisser en contact pendant une demi-heure en agitant fréquemment. Filtrer de manière à ne recueillir le liquide que lorsqu’il ne passe plus de débris cellulaires ou, mieux encore, centrifuger.

Dans le cas où la levure employée contient une quantité notable de glycogène, le liquide tillré ou centrifugé est opalescent.

Influence de la réaction et de la température sur la sucrase

396. — Préparer une solution de saccharose à 20"/,, et en introduire 10 centimètres cubes dans six tubes à essai. Préparer d’autre part une dilution d’acide acétique à 1,5 "/„, et faire les mélanges suivants :

1 centimètre cube sucrase bouillie -J- 4 centimètres cubes d’eau.

1 centimètre cube sucrase active -|- 4 centimètres cul)es d’eau.

1 centimèire cube sucrase active 1 centimètre cube acide acétique à l,5"/y 3 cen-

timètres cubes d’eau.

Témoin 1 . . .

>>cutre 2...

Acidité) g optimal