CRACHATS TUBERCULEUX
On verse dans une capsule de porcelaine ou de platine quelques centimètres cubes du liquide de Ziehl ; on place à la surface la lamelle, le côté enduit en dessous, puis l’on chaulfe, jusqu’à ce qu’il se produise un commencement d’ébullition, à deux ou trois reprises.
On achève de fixer la matière colorante en passant deux ou trois fois dans la flamme, et l’on lave à grande eau à l’aide de la poire en caoutchouc (58). Si l’on veut avoir une préparation élégante, on change une ou deux fois de place la pince qui tient la lamelle pour qu’il ne reste pas d’excès de couleur entre elle et le verre.
On décolore en mettant la lamelle dans la solution d’acide sulfurique au quart (50) et on l’y laisse quelques minutes ; on la retire et on la lave de nouveau à grande eau. Elle doit être alors incolore ou d’une teinte lilas très pâle. Si elle est encore trop rose, on renouvelle l’immersion dans l’acide.
Quand la lamelle est bien décolorée, on essuie sa face libre en la plaçant sur du papier buvard ; puis, si la préparation ne doit pas être conservée, on la renverse sur une lame de verre bien propre en interposant une goutte d'eau entre la lamelle et la lame.
On peut colorer à froid, mais alors il faut laisser la lamelle vingt minutes en contact avec le Ziehl.
On peut décolorer au chlorhydrate d’aniline (solution à 2 p. 100), en ne laissant la préparation en contact avec le bain décolorant qu’un temps très court (une à cinq secondes). A défaut d’auLre décolorant on se sert d’eau bouillante.
La préparation ainsi traiLée ne montre que les bacilles
tuberculeux colorés, s’il en existe ; les autres éléments figurés, cellules épithéliales, globules dé pus, microbes de .a suppuration, sont incolores, ce qui facilite la recherche de ces bacilles. Avec de l'habitude on arrive à décolorer imparfaitement de manière que le fond reste rose clair.
111. Double coloration. — Pour obtenir cet effet, on reprend la lamelle et on la fait tremper pendant deux ou trois minutes dans une solution aqueuse saturée de bleu de méthylène (36) ; on laTave de nouveau et on l’examine comme précédemment : les bacilles apparaissent en rose et les au 1res éléments forman Lie fond sont colorés en bleu.
Si l’on veut garder la préparation, on séchera avec soin les deux côtés de la lamelle, et au lieu d’une goutte d’eau, on interposera, entre elle et la lame de verre, une goutte de baume ou de gelée de glycérine (63).
Les bacilles se montrent dans les crachats sous forme de bâtonnets courts, généralement isolés ou en amas irréguliers, souvent réunis deux à deux à angle obtus. Avec les forts grossissements on voit quelquefois leur intérieur inégalement coloré, montrant des points et des espaces clairs interposés; à un degré de développement dus avancé le bacille est fragmenté, formant de courtes chaînettes. C’est cette apparence qu’il prend le plus souvent lorsqu’il est inclus dans les cellules de l’épithélium alvéolaire, reconnaissables à leur forme ronde, à leur gros noyau vésiculeux pourvu de nucléoles. Les globules de pus sont plus granuleux et ont de un à quatre loyaux qui fixent fortement le bleu il aniline. Ils peuvent aussi contenir des bacilles (fig. 2'2, a).