CHAPITRE IV TÉTANOS

La nature infectieuse du tétanos, depuis longtemps soupçonnée, a été démontrée en 1884, par Nicolaïer, en provoquant la maladie chez des animaux auxquels il avait inoculé de la lerre des champs. Il constata en même temps dans cette terre un bacille spécial, qui porte aujourd'hui son nom, mais qui n'a réellement été isolé en cultures pures, qu'en 1889, par Kitasato.

Ge microbe se présente sous la forme d'un bâ* tonnet grêle terminé à une de ses extrémités par un petit renflement facilement colorable, qui renferme une spore* Il ne vit dans les milieux habituels que lorsqu'ils sont privés d'air. C'est un anaérobie absolu. Sur plaques de gélatine dans le vide, à 18 ou 22^, il forme, au bout d'une huitaine de jours, des colonies caractérisées par l'existence d'une auréole de rayons très fins autour d'un point foncé central. MaÎ3 à mesure, qu'il se développe

le centre devient indistinct, et lorsque la gélatine se liquéfie, il ne reste plus de la colonie qu*un flocon blanchâtre.

Par piqûre sur gélatine, il se développe autour du trait d'inoculatioû deà points 'nuageux, d'où émergent des petits rayons perpendiculaires au trait. La culture devient floconneuse, à mesure qu'elle vieillit.

Ensemencé par dilution dans la gélatine, il développe, après quatre à six jours, un nuage très fin autour de petits points blancs. On obtient des nuagds transparents sur de la gélose.

"' Sanchez-Toledo et Veillon ont signalé aux cul-* liires une odeur de corne bu de poils brûlés caractéristique. ' ' "' ' . : i ' , ; ; : :

f C'est de 36 à SS'^ que le bacille de' Nicolaïer prospère. le mieux. De même, Kitasato à montré que Faddition dé 5 p; 100 de glucose, de 0,01^ p. 100 de sulfo-indigotate de soude, où de 0,05 p. 100 d^ teinture de tournesol lui est très favo- ' rable. . > ' . • ;,

: Il possède une résistance extrême: Nicolaïer a cHaufTé pendant 1 heure, à 190®i de la terre qui n'en donnait pas moins le tétanos. Bonome a vu qU'ua dessèchement de 4 mois ne leur avait point enlevé leur virulence; et Sanchez-Tolèdo et iVeil-» Ion ont constaté lé même fait pour une période * encore plus longue, pour une période de 7 moisi . II résiste à la putréfaction, et à une chaleur-

humide de 80®» Oa> le rencontré dans les excréments, le foin, les toiles d*araignées, le fumier;

La souris^ le rat,' le cobaye sont très sensibles à son inoculation. L'âne, le cheval, le lapin, le chien présentent une plus grande résistance.

, Il est très ûuisible en injection hypodermique; mais inoffensif lorsqu'on l'introduit par la bouche, la trachée, la conjonctive.

Gomme le microbe de la diphtérie, il ne se dé*< ' veloppe que localement, et c'est grâce à ses pro* duits toxiques qu'il agit sur Toi^ganisme. C'est Brieger qui a, le premier, étudié ces produits. Il a.- vu que c'étaient des ptomaïnes, qu'il a nommées tétanine, tétatoxine et spasmotoxine, La première a la propriété de provoquer chez la souris les accès de trismus, la seconde des convulsions, suivies de paralysie, la troisième des crampes .cloniques et toniques. Une quatrième enfin stimule la sécrétion salivaire et lacrymale.

Lorsque Brieger publia son travail, on n'avait pas encore fait des cultures pures de tétanos. Kita-

i54 IMMUNISATION ET SÉRUMTHÉRAPIE

sato y réussit, et c'est alors qu'il chercha avec Weyl {Zeits. f. Hyg., t. VIII) si les ptomaïnes de Brieger se retrouvaient dans les cultures pures. Ils isolèrent une quantité notable de tétanine, des" traces de tétatonine et des produits volatils : acide sulfhydrique, acide butyrique, indol et phénol. Mais ils trouvèrent que les bases étaient peu toxiques, et conclurent que les ptomaïnes de Brieger ne sont pas le véritable poison tétanique.

En 1890, Knud Faber avait déjà {Berlin, klin. Woch.) pu reproduire le tétanos par Tinjection de cultures passées au filtre Chamberland. Leur toxicité disparaissant par un chauffage de S minutes à 68<>, ou par l'addition d'alcool ; il conclut que le poison tétanique est plutôt une toxalbumine qu'une plomaïne.

Deins \Bi Ri formamedica, de 1890, eiArch. f. exper, path, (t. XXVII), Tizzoni et Cattani montrèrent que le bacille de Nicolaier produit dans la gélatine une diastase peptique, une zymase qu'il ne sécrète pas dans le bouillon.

Dans un mémoire sur les poisons bactériens^ {Berlin, klin. Woch.^ 1890), Brieger et Fraenkel ont filtré sur la bougie Chamberland des cultures faites dans du bouillon sucré, les ont fait évaporer dans le vide, et précipité par Talcool absolu. Ils ont aussi obtenu une toxalbumine soluble dans l'eau.

Ces données furent confirmées par les travaux

dé Vaillard et Vincent (Soc. de Biologie, 15 nov 1890 et Ann. Inst, Pasteur^ 1891). Ils trouvèrent que 1/50 et 1/100 de centimètre cube de culture dans le bouillon, filtrée, peuvent tuer le cobaye, que le poison résiste peu à la chaleur et est inactif par la voie digestive, que la lumière solaire le détruit, l'acidification ne le modifie pas, Talcool absolu le précipite en partie, et enfin qu'il est dans une certaine mesure entraîné par les précipités de phosphate de chaux ou d'alumine.

Kitasato a fixé [Recherches expérimentales sur le poison tétanique, Zeits f. Hygiène, t. X) le temps qu'il faut à la lumière, aux acides et aux alcalis pour détruire ce poison et trouve que l'alcool absolu le détruit, lorqu'on l'ajoute en quantité suffisante. Il n'a pu cependant isoler le poison tétanique de la culture.

Enfin, en 1893 (Société de Biologie. Voir aussi Archives de Physiologie), Courmont et Doyon ont donné une théorie fort originale sur la nature du poison tétanigène. D'après eux, le bacille tétanique sécréterait un ferment soluble, une diastase, qui, faisant fermenter certains tissus, donnerait ainsi naissance au poison tétanique. En effet, la culture tétanique ne produit pas la contracture immédiatement après son dépôt dans le muscle. De même, il se passe une période d'incubation variable avant que les accidents tétaniques n'éclatent après son introduction dans le sang. La gre-

nouille n*est jamais tétanique en hiver ; elle le devient facilement en été.

Donc, le poison tétanique n*agit point par luimême, mais il est produit au contact de l'organisme. L'intoxication tétanique est le résultat d'une fermentation, qui demande, comme tout phénomène chimique,, un certain temps pour se produire, et qui est favorisée par l'élévation de température.

L'expérience la plus concluante est la suivante. Si on transfuse le sang d'un chien tétanique à un autre chien, on détermine immédiatement chez ce dernier des accidents tétaniques, qui disparaissent au bout de quelque temps.

De pluSi Gourmont et Doyon ont extrait du muscle tétanique une substance résistant à une longue ébullition, tandis qu'une température de 6§^ détruit les produits microbiens directs. L'injection de cette substance donne le tétanos à la grenouille même en hiver. Parfois même, celle des urines tétaniques confère la maladie.

Dans des travaux antérieurs (Société de Biologie, 24 déc. 1892, et Arch. de phys., janvier 1893), Gourmont et Doyon avaient étudié la marche des contractures dans le tétanos expérimental

des solipèdes et la palhogénie de ces contractures.

En 1890, dans les Annales de micrographie y Bruschetini a trouvé que le poison tétanique se diffuse surtout le long du système nerveux. En 1892, il a vu {Deut, med. Woch.) qu'il était contenu dans le sang, le rein lavé à Teau salée et Turine.

En 1891, d'ailleurs (Soc. de Biol., 27 juin), Camara Pestana a vu que la toxine est absorbée par le sang, que les poumons, la rate, les reins, et principalement le foie rempruntent à ce milieu et le retiennent, et qu'elle ne^ s'élimine point par Turine. Il n'a pu arriver à la déceler dans le tissu nerveux et musculaire.

Bruschetini, Kitasato et Nissen ont également constaté la présence de la toxine dans le sang. Gomment agit le poison tétanique sur l'apparôil nervo-musculaire? Faber a pensé qu*il agissait comme le curare, sur les plaques motrices. Dans son livre sur les poisons bactériens, Gamaléia dit qu'Autocratow aurait trouvé, au laboratoire de Straus, que les contractures tétaniques sont d'ori-^ gine réflexe et disparaissent après la section des racines postérieures correspondantes de la moelle épinière. <

Les recherches sur les produits solubles du ba* cille du tétanos, que nous venons de passer briè-

vement en revue, ont conduit logiquement à la méthode d^immunisation, dont nous allons maintenant nous occuper.

C'est en décembre 1890 {DetU. med. Woch.), que Behring et Kitasato démontrèrent, que le sérum des animaux rendus réfractaires au tétanos par rinjection de trichlorure d*iode dans le sang est capable de détruire le poison tétanique, soit t'n vitro, soit dans le corps des animaux. Cette propriété antitoxique n'appartient pas au sang des animaux non vaccinés. ^

Non seulement ces auteurs parvinrent avec le sérum des vaccinés à prévenir le tétanos, mais ils lui reconnurent même un pouvoir curateur, car son injection guérit les souris tétaniques. Ainsi, le sérum des animaux vaccinés contre le tétanos est doué du pouvoir préventif et curateur.

En 1891 (Arch. ital. de biologie, et Centr. /". Bacter,, t. IX), Tizzoni et Cattani ont confirmé ces notions générales sur des pigeons et des chiens vaccinés par l'injection de petites doses de cultures virulentes; mais ils ne purent constater reffet thérapeutique du sérum sur les cas de tétanos déclaré.

Nous avons déjà dit que la mèmp année (Société de biologie) Vaillard vaccina contre le tétanos par Tinjection de ses cultures chauffées pendant une heure à 60^ et filtrées, et remarqua que l'immunité conférée par le sérum est peu durable et peut disparaître au bout de 15 jours.

Nous savons aussi que Kitasato a obtenu la vaccination contre le tétanos {Zeits. f, Hyg,^ t. X) par l'injection d*un mélange de culture vivante et de doses progressivement décroissantes de trichlorure d*iode.

Ce procédé a été perfectionné par Behring {Zeits, f, Hyg., t. XII), qui Ta appliqué à, la souris, au lapin, au mouton et au cheval.

Plus tard, dans la même revue, Brieger, Kitasato et Wassermann, reprenant les expériences de Wooldridge {Arch, f, Anat, und Phys., 1888) sur les cultures dans l'extrait de thymus, constatèrent que dans ces conditions les cultures tétaniques sont asporogènes et très peu toxiques, et que le mélange de l'extrait du thymus à la culture filtrée du tétanos détruit peu à peu sa toxicité,. L'injection de ce mélange, datant de deux jours, À des doses progressivement croissantes, permet de vacciner sans danger les animaux les plus sensibles, comme la souris.

En 1892 [Ann. Inst. Pasteur), Vaillard est revenu sur cette question, et a indiqué 3 méthodes de vaccination : celle qu'il avait signalée et qui consiste dans l'emploi des cultures chauffées à 60^ et filtrées, une autre qui se rapproche de celle de

iùO nOtUNISATION £T SÉRUIITHÊRAPIE

Behring- Kitasato et qui consiste dans Tinocalation du mélange de cultures tétaniques et d'eau iodée, une 'dernière enfin, identique à celle de Tizzoni et .Cattani, et qui est l'infection répétée de très petites doses de virus, . •

Tizzoni et Cattani ont ensuite publié une étude {Centr. f. Bacter.^U IX) sur l'antitoxine du. sérum des chiens vaccinés. Us ont vu «que son activité diminue lorsqu'on la chauffe à 65^ pendant une demi-heure, et'disparait par un chauffage de même durée à 68^ Ils ont vu, de. plus, qu'elle ne dialyse pas, qu'elle est rapidement détruite par l'acide chlorhydrique, l'acide lactique en excès, )es alcalis, qu'elle est précipitée par un excès de sulfate d'ammonium, par l'alcool absolu. L'eau, la glycérine l'enlèvent à ce précipité. '• ■ , Dans le même travail, Tizzoni et Gattani ont constaté que le mélange du sérum avec les toxines soit in miro^ soit dans le corps des animaux, rend leur injection inoffensive.. \... ■■■ , ■

Ils ont également signalé {Centr. f. Bacter,^ t. XI) l'impossibilité de vacciner contre le tétanos après l'ablation de la rate.

En 1891 (Soc. de biol., 6 juin), Vaillard a montré que le sérum des animaux -naturellement réfractaires > n'est pas anti toxique, qu'il ^ne/ le devientqu'aprèsinjectiohd'unéforte dose de poison tétanique, que la rate et l'humeur aqueuse dés vac* cinés ne jouissent pas de propriétés antitoxiqueSi

Un point de la doctrine de Behring et KitfisçitQ restait vivement discuté. C'était la possibilité de guérir par le sérum des vaccinés. Tizzoni,Cattani et Vaillard n'avaient pu y réussir et avaient de plus reconnu que l'immunisation n'était que temporaire.

Ces doutes furent dissipés par les recherches d'Ehrlich {Deut. med Woch., 1891). Cet auteui; montra avec l'abrine et la ricine, que le pouvoir antitoxique et immunisant du sérum des vaccinés varie beaucoup avec le degré d'immunité acquise;

Behring avait affirmé avoir guéri un mouton et un cheval tétaniques, et, de -son côté, Kitasato avait obtenu des résultats positifs sur la souris. Comment expliquer que certains auteurs n'avaient pu guérir, mais seulement avaient immunisé par le sérum des animaux vaccinés ? C'est évidemment que ces animaux n'avaient pas été amenés à un degré d'immunité suffisant pour que leur sérum fût curatif.

D'ailleurs, plus tard, Tizzoni et Cattani et Vail-, lard sont arrivés à guérir du tétanos par le sérum des vaccinés.

Ehrlich vit encore {Zeits, f. Hyg,, t. XII) que l'immunité contre les toxalbumines se transmet

lUMUNlSATION. 11

aux descendants et qu'une petite souris ordinaire devient réfractaire lorsqu'elle est allaitée par une souris vaccinée. Cela démontre que la substance immunisante passe dans le lait et est absorbée par le tube digestif.

•Il démontra le même fait pour le tétanos. Avec Brieger, il a constaté (Deut, med. Woch., 1892) que le lait d'une chèvre pleine, vaccinée contre le tétanos, peut immuniser des souris. De même, Tizzoni et Gattani ont vu que les injections toxiques étaient inoffensives sur les petits d'une femelle, qui avait été rendue réfractaire.

D'après Behring et Frank {Deut. med. Woch., 1892), le sérum d'un cheval vacciné, additionné de 0,8 p. 100 d'acide phénique, a gardé pendant deux mois son pouvoir immunisant , bien qu'ils n'aient prîsaucuneprécaution contre l'accès des microbes. Ce pouvoir ne disparaît point par un chauffage de vingt-cinq minutes à 65^ ou par la dilution avec de l'eau distillée.

Les résultats obtenus sur les animaux deman* daient à être appliqués à l'homme.

La première tentative en fut faite par Kitasato, avec le sérum du lapin vacciné (Congrès int. d'hyg. de Londres, août 1891. Zeit. f. Hyg,, août 1892). Elle ne réussit pas, car la dose de sérum employée

fat trop faible relativement à la gravité du cas de tétanos.

Tizzoni et Gattani et d'autres, tels que Giovanni Gasali, Finotti, publièrent ensuite {Rif. med., 1892) 8 guérisons par leur antitétanine, préparée avec le sérum de chiens immunisés. Albertoni allégua {Therap. Monats,, sept. 1892) que les auteurs n'avaient publié que les succès. On vit aussi qu'il s'agissait de tétanos à forme lente et progressive.

Le 16 février 1893, Rotler inséra, dans Deut. med. Woch,y le cas d*un individu de vingt-cinq ans, chez qui Tinjection de sérum, vingt-deux jours après la blessure, quatorze jours après les premiers accidents, produisit au bout de deux jours une amélioration. La même objection pouvait lui être faite qu'aux auteurs italiens.

En France, Renou injecta, dans le service de Dieulafoy, du sérum immunisé à 2 tétaniques. Ils succombèrent {BulL méd,, 1892). Malgré les injections, un tétanique mourut au bout de six jours dans le service de Grancher, un autre au bout de cinq dans celui de Polaillon, un troisième en cinq jours également dans celui de Th. Anger, un quatrième en trois jours dans celui de Letulle. Néanmoins, Barth et Maget rapportrèent, le 3 mars 1893, à la Société médicale des hôpitaux, qu'un jeune homme de vingt ans, atteint du tétanos grave non traumatique, et peut-être d'origine buccale, dû à la gingivite qu'il présentait,

|6i IMMUNISATION ET SÉRUMTHÉRAPIC

fut manifestement amélioré par Tinjection sous la peau de Tabdomen, en trois jours, de 300 centimètres cubes de sérum de cheval immunisé.

Schwartz communiqua aussi à la Société de chirurgie (29 mars 1893) la guérison au bout de vingt jours d'un malade traité par le chloral et Tantitoxine.

Le 3 juillet 1893 (dans la Rif. med,)y Ricardo Gattai cite le cas d'un enfant de quinze ans, qui fut pris de tétanos huit jours après une blessure à la main par la pointe d'un compas. Le lendemain, on lui injecta 10 centimètres cubes de sérum de lapin immunisé, et le soir 08^^50 d'antitoxine de chien. On fit quelques autres injections semblables, et le malade fut rapidement guéri.

Enfin,, Roux et Vaillard mirent la question au point (Ann. Inst. Pasteur^ 1893), en se plaçant à un point de vue systématique et expérimental. Us indiquèrent le mode de préparation du sérum antitétanique, ses propriétés, son application à la guérisonde Thomme et des animaux.

1° Préparation du sérum. — On injecte une forte dose de poison tétanique à un animal réfractaire, la poule, et quatorze jours après, son sérum possède un grand pouvoir antitoxique. On peut aussi

employer le sérum d'animaux sensibles, rendus réfractaires par le procédé de Behring et Kitasato (mélange de toxine et de trichlorure d'iode), ou mieux par celui de Roux et Vaillard (mélange de la toxine à une solution iodée et injection de 5 centimètres cubes de toxine mélangés à 1 centimètre cube de solution de Grâm). On diminue la dose de solution iodée jusqu'à création de Tétat réfractaire, et on inocule alors la toxine pure.

Le pouvoir antitoxique du sérum croît avec le temps, et avec chaque nouvelle injection de toxine. On obtient ainsi du sérum antitoxique au millième, au millionième, au cent millionième, c-'est-à-dire que 1 gramme de sérum peut immuniser 1,000, 1 million, 10 millions de grammes d'animal. C'est la notation de Behring.

2° Propriétés du sérum. — Le mélange de parties égales de toxine et d'antitoxine est inoffensif. Cela tient à ce que la toxine est neutralisée par l'antitoxine ou la toxine dédoublée par l'antitoxine, comme le ferait un ferment.

Les animaux, auxquels on a préalablement injecté une faible doâe de sérum, résistent à une dose de culture mortelle pour les témoins.

Cette immunité ne dure pas plus de cinquante

jours. Elle apparaît immédiatement après Tinoculation du sérum ^ et est proportionnelle à sa dose.

3<^ PréTention du tétaii03. — II y a prévention certaine, lorsqu'on injecte le sérum, même à très faible dose, avant la toxine tétanique. Si on les injecte simultanément, on produit un tétanos local, même pour une très forte dose. Lorsque rinjection précède Tapparition des accidents tétaniques, le tétanos est toujours local. La dose préventive est d'autant plus considérable qu'on la pratique tard. Après un certain temps même, la prévention est impossible. Elle est, d'ailleurs, plus ou moins facile suivant le lieu d'inoculation du tétanos. Elle réussit quand la marche du tétanos est lente, mais non quand elle est rapide.

4° Traitement du tétanos. — Roux et Vaillard ont inoculé à 9 souris des quantités moyennes de toxine, 3 éont prises comme témoins, et 6 injectées avec du sérum dès la première apparition de tétanos. 2 des souris témoins meurent, 1 guérit. Des t> autres, 4 meurent, 2 guérissent.

Ils ont également inoculé 3 cobayes, 1 fut pris comme témoin, 2 furent traités. Tous les 3 succombèrent.

Ils répétèrent leurs expériences sur la souris, en inoculant les spores tétaniques, mais sans obtenir de meilleurs résultats.

Après les avoir encore multipliées sur le lapin, et le mouton, ils furent forcés de conclure que € quel que soit le mode d'infection, il est très difficile de guérir le tétanos déclaré chez les animaux >.

Traitant 7 malades par le sérum, Roux et Vaillard obtinrent S décès et 2 guérisons. Le traitement ne fut donc pas plus brillant sur Thomme que sur Tanimal. Néanmoins, ces auteurs persistèrent à croire que le seul traitement rationnel du tétanos est l'emploi du sérum antitoxique. Son injection est absolument inoffensive et. aura surtout de bons effets, si elle est pratiquée avant que le poison tétanique n'ait eu le temps de léser des cellules nerveuses.

En 1893, nous avons encore à signaler la guérison de 4 cas de trismus et de tétanos des nouveau-nés par Emmerich [Wien. Klin. Woch., 1893) au moyen de l'antitoxine de Tizzoni.

La Riforma medica publia de nouveaux cas de guérison par Magagni (3 février 1893), Galtai (3 juillet), Lési (18 août 1893).

Nous trouvons encore des contributions nou-

velles à cette question dans le Centr. f. Bactériologie^ t. XV, par Uemesoff et Fedoroff, dans Mûnch. med. Woch., de la même année, par Moritz.

En 1894, d'autres travaux ont été signalés. Ce sont, par exemple, celui de Huebner {DetU. med. fTocA., 1894), sur lesquels Tizzoni et Cattani ont publié quelques remarques, dans Deut, med.

Woch, (1894), celui de Tavel (Corresp. BlaL f. schweif. Aerzt.^ 15 fév. 1894), celui de Percy Dean {Brit. med. jotirn., 15 sept. 1894), et de Evans, dans le même journal, etc...

Nous croyons que de nouvelles expériences faites avec plus de précision et plus de persévérance donneront des résultats plus brillants. D'abord a-t-on injecté des doses assez grandes de sérum immunisateur ? A-t-on renouvelé assez souvent cçs injections? On comprend l'importance de ces desiderata, aujourd'hui qu'on est certain de rinnocuité de cette méthode.