B II.- TECHNIQUE DU DOSAGE DES STEROLS
Nous voulions voir si la teneur en stérols de la levure était susceptible de se modifier sous l'influence du rayonnement ulbtra-violet:; nous avons donc cherché à doser les sbtérols totaux sans nous préoccuper de la nature de chacun d'eux. Bien que la méthode par combinaison avec le disitonoside soit plus spécifique, nous avons préféré la méthode colorimétrique classique basée sur la réaction de LIEBERMANN-BURCHARDT en raison de sa commodité. D'autres auteurs préconisent le dosasc de l'ergostérol par absorption ultra-violette au spectrophotomètre [ (SHAW et JEFFERIES)(79)].
La réaction de LIEBERMANN-BURCHARDT consiste à additionner une solution chloroformique de stérols d'un peu d'anhydride acétique et d'acide sulfurique concentré: la couleur du mélange évolue avec Le temps, passant par un maximum et sa cinétique est très variable suivant les stérols mis en oeuvre.
Avec certains stérols, tel le lathostérol contenu
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dans la peau, la réaction est très rapide et atteint son maximum au bout de une à dewxminutes; au contraire, le cholestérol ne donne son maximum de coloration qu'en IO à 30 minutes suivant les conditions expérimentales. En ce qui concerne les stérols extraits de le levure de bière, l'ergostérol donne un maximum d'intensité en 4 à 5 minutes, le zymostérol donne une coloration à peu près aussi rapidement, mais cette coloration est beaucoup plus fugace: elle est d'ailleurs à poids égal, 2,2 fois nlus faible que celle donnée par l'ergostérol [ (GALIMARD , 1934) (27)].
Le dosage des stérols totaux de la levure comporte deux phases:
À - l'extraction B - la réaction colorée proprement dite.
ÀA.— Modes d'Extraction des Stérols de la Levure:
On était tout d'abord en droit de se demander s'il fallait employer la levure sèche ou humide comme matériel d'extraction. La dessccetion, et par conséquent la conservation de la levure, ne va-t-elle pas modifier la teneur en stérols ? BAKÏ (I1939)(5)}) l'affirmait, mais ses résultats ont éte infirmés par la suite { (TRAININA)(82)] et nous-même n'avons pas trouvé de différences dans les dosages que nous avons faits sur la levure fraîche et sur la même levure séchée à condition de faire un séchage et une extraction convenables.
GALIMARD | (1934)(27) | dans une longue étude à ce sujet, constate, dans ses conditions expérimentales, que la levure desséchée cède ses stérols aux différents solvants employés, alors que la levure fraîche n'abandonne pas la totalité de ses stérols à l'acétone et au chloroforme. La levure sèche permettrait donc, selon lui, une meilleure extraction, et GALIMARD établit une technique consistant à dessécher la levure après l'avoir diluée au préalable dans une matière inerte très fine, la terre d'infusoires,
Dans la méthode que nous avons mise en oeuvre, nous avons préféré, par sécurité, employer la levure
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