I.- TECHNIQUE DU DOSAGE DE L'AZOTE TOTAL

La levure est recueillie par centrifugation à O0; on lave le culot à deux reprises à l'eau distillée glacée, de manière à éliminer rigoureusement toutes les substances azotées provenant du milieu de culture. Le culot est ensuite remis en suspension dans un certain volume d'eau distillée que l'on complète en génerel à 200 ml. De cette suspension - rendue parfaitement homogène, par agitation mécanique, d'abord, puis par agitation à la main au moment même du prélèvement - on

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mesure aussi rapidement que possible un volume e xact 5 ml. en général) pour le dosage de l'azote.

Ce volume est introduit dans un ballon de Kjeldahl; on y ajoute 3 ml. d'acide sulfurique pur et environ 0,1 g. du catalyseur de DUMAZERT (17). On minéralise au bain de sable jusqu'à décoloration totale de ls Zliquéur et on poursuit, par sécurité, la chaûtfe pendant quelques heures encore: au total, l'opération dure environ 2 h. Ensuite, on transvase quantitativement le contenu du Kjeldahl dans un ballon jaugé de 20 ml., on complète à ce volume avec de l'eau distillée et on dosera l'azote total dans des prises d'essai aliquotes par déplacement de l'ammoniaque et titrage volumétrique par l'acide sulfurique N/I00 dans l'appareil de PARNAS et WAGNER, modifié par LEVY et SAPIR (54). Nous avons employé comme indicateur du virage l'alizerine sulfonate de sodium sensibilisé.,

IL est nécessaire de rapporter le résultat du poids d'azote au poids sec de levure; on fait donc dans les mêmes conditions expérimentales que c él les indiquées dans le Chapitre III (Cf. p.35) - la détermination de l'extrait sec.

Les dosages d'azote total faits en double nous ont donné des résultats porfaitement comparables; l'erreur relative commise expérimentalement est de TU

Les deux rapports: azote total/cellule et stérols/cellule nous permettront de calculer le rapport cherché stérols/azote total , en divisant le deuxième par le premiere.

$ II.- RESULTATS EXPERIMENTAUX :

Le rapport azote total/poids de levure sèche a donné, comme il fallait sy attendre, des résultats très variables.

Avec la levure normale, les chiffres obtenus ont été exprimés en mg. par g. de levure lyophylisée:

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