Axenfeld, Ann. di chim, e di farmaCf 4^ série, V, p

résultat plus ou moins immédiat ^ A l'aide de ce corps employé à la dose de un demi-centimètre cube pour 20 cent, cubes de liqueur, j'ai constaté que la propeptone diminue constamment depuis le premier jour de la digestion sans jamais disparaître d'une façon absolument complète, même lorsque ropération est poursuivie un mois durant, et qu'on ajoute fréquemment de nouvelles quantités de pepsine '. On peut se demander alors si la propeptone constitue bien une individualité réelle, ou si, composée au début par un mélange de peptones et de syntonine restée dissoute dans la digestion neutralisée et salée à la faveur de la peptone, elle ne se réduirait pas, à la fin de la digestion, à des traces de peptones pures, précipitables jusqu'à un certain titre par l'acide nitrique, de même que ces corps le sont partiellement par l'acide phosphomolybdique^ le sublimé, etc.

Il est facile de répondre à cette question.

Préparons une solution de peptone pure. La propeptone d*albumlne passant à travers les meilleurs flllres de papier, J*al eu recours à Tartifice suivant *. Une solution neutre de peptone, salée, puis acidulée par l'acide nitrique pour précipiter les traces de propeptone persistante, est dialysée contre une solution saturée de sel marin aiguisée par l'acide nitrique. Au bout de quarante-huit heures, Teau d'ezosmose neutralisée est évaporée à sec. Le résidu repris par le moins d*eau possible ne dissout pas trace de syntonine et ne précipite pas par Pacide nitrique.

Donc la propeptone n'est pas un mélange.

On peut transformer partiellement en propeptone la peptone pure obtenue par ce procédé, en la desséchant d'abord, et en la traitant à plusieurs reprises par Talcoolabsolu bouillant; on chasse ensuite tout Talcool par la chaleur, et on reprend par Peau. La liqueur qui se trouve saturée de seli marin trouble légèrement par addition d'acide nitrique . Elle renferme maintenant de la propeptone.

La propeptone diffère donc de la peptone par de l'eau en moins; c'est un des termes d'hydratation intermédiaires entre l'albumine et la peptone.

i. Pekelharing {Pflûger't Arch» 1880, S. 198) a montré qoe les peptones pouvaient redissoudre le précipité des propeptones par le ferrocyannre et l*acide acétique.

2. Dans ces digestions prolongées pendant un temps considérable, il m*a semblé que la dyspeptone rassemblée au fond du vase augmentait légèrement avec le temps. Heissner et de Bary considèrent la dyspeptone comme un résidu de la digestion ultérieure de la parapeptone.

3. Je n'ai pas eu recours au sulfate d'ammoniaque pour séparer les peptones des albumo8e8;'€ar la deutéro-albnmose est incomplètement précipitée par ce réactif. Voir : Neomeister : ZeUschr. f, BioL^ N. P., 6d VI, S. 267, Bd X, S. 362 u. folg.; Pekelbaring : Ibidmf Bd X, S. 569.

DE U PHTSIOUNSIB DE L*ESTOMAG. 1(B

Qaelles sont les causes pour lesquelles la propeptone ne se transforme jamais complètement en peptone? Elles sont mnlUpIes. On sait depuis longtemps que la pepsine s'affaiblit en trayaillant, et que les peptones produites parla digestion paralysent, en s*accuma^ lant dans le liquide, Faction ultérieure de la pepsine sur les pro* duits non encore transformés. Du suc gastrique additionné de peptones perd de son activité.

Si Taddition de peptone pure a été faible, quelques grammes pour un litre de suc, Talbumine coagulée se dissoudra sensiblement aussi vite dans le suc peptonisé que dans le suc témoin; mais Tanalyse des liqueurs nous révèle que dans la digestion faite avec le suc peptonisé, il se trouve une quantité de propeptone supérieure à celle contenue dans la digestion témoin. Ceci nous apprend, en outre, que deux liquides digestifs d'énergie peu différente peuvent sembler également actifs, si on les essaie, comme cela se pratique babituellement, en comparant les poids d'albumine dissous dans le même temps par des volumes égaux de ces deux liquides, tandis que leur différence de qualité est toujours accusée par la présence plus ou moins abondante de propeptone dans les digestions avancées. J'ai reconnu en effA maintes fois que des solutions de pepsine contenant des quantités presque identiques de ferment, et placées dans des conditions semblables, dissolvent également bien l'albumine, mais les solutions plus riches en pepsine produisent toiiyours moins de propeptone que les autres. Nous avons donc là un procédé très sensible pour comparer l'activité de deux liqueurs digestives d'énergie voisine. Ce procédé m'a permis de reconnaître que Tacide chlorhydrique employé dans les digestions était un dois facteurs importants empêchant la transformation de la propeptone en peptone.

En effet, des liqueurs digestives également riches en pepsine, et acidu« lées à raison de 4 , 2, 8 et 4 grammes de CI H p. iOOO, recevant chacune la même quantité d'olbumine coagulée, fournissent à i*analyse, quelques jours après, des quantités de propeptone d'autant plus grandes que racidité de la liqueur est plus forte: le nuage produit par l'addition de 4/2 cent, cube de NO,H ù 20 cent, cubes de liquide digestif neutralisé et salé à saturation était d*autant. plus dense que la digestion contenait 'primitivement plus de GIH.

L'acide chlorhydrique ne peut empêcher la transformation de la propeptone en peptone en exerçant une influmce déshydrate sur

104 CH. CONTBJEAN. — COlfTRIBOTION A L'ÉTUDE

cette dernière, les acides dilués agissant en général comme hydratants ; d'antre part, Texpérience directe, addition d'acide chlortiTdrique à une solution de peptone pure, nous démontre Tinanité de cette Yue.

L'acide chlorhtfdrique^ même à faible dose, agit^lgne probabkmefU en paralysant Vactian de la pepsine^ action qui pourtant ne peut s'exercer que dans un milieu acide. Cette conclusion, paradoxale à première vue, nous est Imposée par les faits suivants :

Une infusion pepsique acidulée à 1 p. dOOO est divisée en deux portions és:ales : la première est acidulée à 4 p. iOOO, la deuxième sert de témoin. Ces deux liqueurs sont abtandonnées quelques jours à Tétuve. On ramène par la neutralisation Tacidité de la première liqueur au titre primitif et on distribue aux deux flacons la même quantité d'albumine coagulée. Le premier flacon fabrique plus de propeptone que le deuxième.

Un suc gastrique artificiel acidulé à i p. iOOO, et qui a séjourné huit jours à réluve, produit plus de propeptone en digérant la même quantité d*albumine qu'un suc récemment préparé et contenant le même poids de pepsine commerciale que le premier. Pourtant la pepsine est peu affaiblie par un long séjour à Tétuve, au contact d'une quantité d*acide ctilorhydrique à 1 p. iOOO insuffisante pour la dissoudre (â cent, cubes d'acide à 1 p. 4000 pour i gramme de pepsine). •

Les pepsines commerciales livrées en solution ctilorhydrique sont très peu actives.

Je rappellerai, à ce sujet, que d'après les travaux de Langley et Edkins S les solutions aqueuses de ferment gastrique {propepsine ou pepsinogène) résistent mieux aux alcalis carbonates que les solutions acidulées (pepsine). Il est vrai que les premières sont plus rapidement détruites par un courant d'acide carbonique.

J*ai constaté aussi que le ferment protéolytique d'une infusion aqueuse d'estomac résiste à trois jours de congélatiorif tandis que ce froid prolongé détruit presque complètement la pepsine d'une infusion acide.

Tous ces faits sont susceptibles d'être interprétés en admettant que la pepsine est affaiblie et gênée dans son action par f acidité du milieu dans lequel on est obligé de la placer pour qu'elle puisse peptoniser les albuminoîdes.

£n résumé, ces recherches montrent que, placée dans des conditions favorables, la pepsine transforme totalement f albumine coa-

4. J. N. Langley and J. S. Edkio», Jownal of Phi/iiology, 1886, t. VII, 371.

DE LA PHT»OLOGIE DE l'BSTOMAC. 105

gulée en sfffUanine^ la fyiUonine enpropeptone et enfin la prapeptene presque complètement en peptone K

La transformation du résidu de * parapeptone en peptone est empêchée par la présence dans les digestions artificielles des peptones et de Tacide cblorhydrique entravant plus ou moins la fermentation protéolyliqae.

Théorie de KUhne et Chittenden. — Ce n'est pas ainsi que Meissner et plus tard Kûhne et Chittenden (loc. cit) ont envisagé Faction de la pepsine sur les matières aibuminoides. D*après ces derniers auteurs, inspirés par les travaux de M. Schûtzenberger ' sur la constitution de Talbumine, et pénétrés de Tidée théorique que les ferments solubles n'exercent une action hydratante sur les matières organiques qu'après avoir scindé leur molécule, la transformation des albuminoïdes sous Tinfluence de la peptone donne lieu à deux produits de dédoublement : Vantialbumose et Vhémialbumose.

Vantialbumose, très analogue à \(k parapeptone de Meissner, presque ioattaquabie par la pepsine, est transformée par le suc pancréatique en antipeptone résistant à l'action ultérieure de la trypsine. Elle précipite par la neutralisation exacte des digestions artificielles, entraînant avec elle de la syntonine.

Vhémialbumose est en réalité un mélange de quatre substances : la pro' talbumose^ Vhétéroalbumose et la dysalbumosej précipitables toutes trois de la liqueur neutralisée par le sel marin à saturation, et la deutéroalbumose (propeptone) précipilable par le sel marin et Pacide nitrique. Ces albumoses sont transrormées par la pepsine en ïiémipeptone^ que la trypsine attaque en produisant de la leucine, de la tyrosine et un corps que le brome colore en violet. L*hémiaIbumose renfermerait ainsi le noyau de Talbumine contenant la tyrosine mis en évidence par les recherches de M. Schûtzenberger '.

J*ai répété les expériences de Kûhne et Chittenden en opérant dans les mêmes conditions qu'eux; je suis arrivé naturellement

1. Ce fait qai est en désaccord avec la théorie de la digestioa de Meissner, et de Kiihne et Chittenden, a déjà été constaté par plosieurs aoteurg, entre autres : Briicke, SUzvngiber. dêr kaû. Aead. zu Wien, XXXVII, S. 130; — Hammarslen, Jahresb, ûber die Fortsdur. d. gti, Med., 1867, I; — Finkler, Jahrêsb. f. TkUrch. V, S. 163, 1875.

2. Schûtzenberger, BtUMin de la Soc, chimique de Paris, 1875, t. 23, p. 161.

3. C'est k dessein et pour éviter une trop grande complication inutile ici, que je n'emploie pas les nouvelles divisions des produits de la digestion mises en évidence par les derniers travaux de Kûhne et Chittenden, et étudiées par Neumeister {ZeUtchr. f. BioL, XXIII, S. 381, 1887, XXIV, S. 267, 1888, XXVI, S. 32i, 1890). On trouvera un résumé fort clair de ces travaux in : W. D. Halliburton, A textbook of chmical ph^tiology aiuLpatli4>logy, London, Longmans, Green and C, 1891, p. 646 et suiv.

106 CH. COimiBAPI. — COIITRIBOTION A L*ÉTUDE

aux mêmes résultats, mais je ne saurais admettre dans lear intégrité les conclusions de ces auteurs.

Dissolvons de Talbuniine purifiée, acidulée par de Tacide chlorhydrique et non coagulée dans une faible quantité de suc gastrique (10 œufs pour un demt-litre de suc). Interrompons la digestion au bout de deux heures. La neutralisation de la liqueur précipite Tantialbumose, souillée de 9yntonlne; on la purifie par plusieurs digestions de vingt-quatre heures chacune, et plusieurs précipitations successives. Après trois opérations, on obtient de l'antialburoose pure, presque inattaquable par le suc gastrique. Mise à digérer pendant deux semaines, elle précipite toujours abondamment par la neutralisation de la liqueur, mais Tanalyse de celle-ci nous révèle la présence de traces de peptone et de propeptone, corps identique h la deutéroalbumose de Kûhne et Ghittenden.

Nous voyons que la digestion pepsique transforme partiellement et lentement Tantialbumose en une hémialbumose, et que, par suite, il n'y a pas de différence bien tranchée entre les molécules de ces corps.

Nous allons faire voir maintenant que Tantialbumose n'existe pas dans les digestions. Ce corps n'est autre chose que de la syntonine modifiée par les précipitations successives que nécessite sa préparation, et rendue ainsi plus ou moins réfractaire à V action ultérieure de la pepsine ^

Préparons de Tantlalbumose pure avec l'albumine de trois œufs. Mettons en même temps à Pétuve deux vases identiques renfermant chacun un litre du même suc gastrique énergique. Dans Tun d'eux, plaçons Tantlalbumose, dans Pautre Talbumine purifiée provenant de trois œufs. Quatre ou cinq jours après, au plus tard, la neutralisation de la digestion d'albumine ne détermine plus la formation d'aucun précipité, tandis que la digestion d'antialbumose précipitait encore un mois après le début de l'expérience ^.

Et pourtant, dans le cas de la digestion de l'albumine, l'action de la pepsine sur Tantialbumose, si elle eût existé, aurait été gênée

1. La pepioxine, poison que Brieger {Hoppê-Seyler't Zeittchrift, VII, S. 274, 1882-1883, et Vntertuehungen ûber Ptonu^ne, S. 14, Berlia, 1883) prèpanit, en croyant Textraire seulement, avec des prodoits de digestions artificielles, nous montre combien les matières aibaminotdes sont facilement modifiables par des réactifs en apparence anodins. Saikowski (Virchow's Arehiv., CXXIV, 4891, S. 409) n*a pn, avec Taide de Hnneo Kumagawa, obtenir ce corps en opérant avec précautions.

2. Dans ces digestions d'antlalbomose longtemps poursuivies, on voit asseï nettement s'accroître avec le temps le dépôt pulvérulent de dyspeptone que Ton trouve toujours an fond des vases ou Ton effectue une digestion artificielle. Cela est d*accord avec Topinion de Meissner faisant dèriter la dyspeptone de la parapeptone (antiilbnmose).

DE LA PHYSIOLOGIE DE l'ESTOMAC. lOT

par les peptones et les hémialbumoses présentes. L'antialbumose est donc une production artiQcielle.

Les hémialbumoses, à Texception de la deutéroalbumose, sont relativement peu abondantes dans les digestions interrompues deux heures après leur début. J'ai reconnu dans le précipité formé par le sel marin, la protalbumose soluble dans Veau froide et dans Teau chaude, et la dysalbumose insoluble. Je n'ai pu voir ïhétéroalbumose insoluble dans Feau pure, mais soluble dans l'eau faiblement salée. Du reste la dysalbumose ne parait pas différer de la syntonine et la protalbumose pourrait bien n'être que de la deutéroalbumose (propeptone) partiellement précipitée par le sel marin ; car ce dernier corps est très abondant à cette période de la digestion, et en solution aqueuse concentrée il précipite par le sel marin '.

Nous voyons donc qu'il nous faut rejeter la théorie de la digestion émise par Rûhne et Ghittenden et renouvelée de Meissner, et admettre avec la majorité des physiologistes, que l'albumine, sous l'influence de la pepsine acide, se transfoime totalement en syntonine puis en propeptone et en peptone, étapes d'hydratation successives.

Il est certain pourtant que l'action de la pepsine ne s'exerce qu'en scindant la molécule de l'albumine, la diffusibilité des peptones étant supérieure à celle de l'albumine, et leur poids moléculaire étant moindre ; mais les produits de dédoublement de la molécule d'albumine, les peptones, sont chimiquement très semblables entre eux ; et peut-être ils ne diffèrent que par des propriétés physiques, comme par exemple par leur pouvoir rotatoire '.

1. Dans ces recherches, nous n'avons pas eu recours au sulfate d'ammoniaque (employé pour la première fois par Méhn, Jonm, de pharm. et de ch,^ 1878, p. 159) pour précipiter les albumoses. U a rinconvénient de les précipiter tontes en bloc, et d'après Heynsius (P/lUger't Archio.y XXXIV, 1884, S. 330), il précipiterait aussi les peptones. Wenz {ZeiUchr, f, BioL, XXII, 1887, S. 10, u. 11) nie l'assertion de Heynsius; mais il ne prouve pas suffisamment que des peptones ne sont pas partiellement entraînées et il est certain, comme nous l'avons rappelé plus haut, que la deutéroalbuminose est imparfaitement précipitée par ce réactif.

2. Je crois utile d'indiquer ici une nouvelle réaction des peptones, ou plutôt une modification de la réaction du biuret à laquelle j'ai eu souvent recours. Dans la liqueur à essayer, on verse quelques gouttes d'acide phosphomolybdique, et, sans sMnqniéter du précipité, on ajoute quelques gouttes d'une solution très diluée de sulfate de enivre, puis une lessive de soude. On agite. La liqueur devient bleu intense. Elle reste bleue ou vire an vert lorsque le liquide contient des albuminoldes autres que les peptones ; elle se décolore en moins d'une heure et prend une teinte rose, si Ton a affaire à des peptones. Gomme on le voit, la différence des deux teintes est nettement tranchée, ce qui est un avantage si l'observateor n'apprécie que difficilement les couleurs voisines.

i08 CH. COMTEJBAR. — CONTRIBUTION A l'ÂTUDK