DA!«S L^OEUF DES VERTÉBRÉS

Yons que faire des conjectures. Les trois œufs dans lesquels nous rayons trouvé étaient pourvus d'une zone pellucide bien développée. Il ne peut donc être question de le rapprocher des noyaux que Schâfer a observés dans le vitillus de tout jeunes œufs de Lapin et qui indiqueraient, d'après cet auteur, des cellules granuleuses d'origine ovulaire. Les dimensions considérables de notre second noyau s'opposent du reste à ce rapprochement. Gomme la présence de ce second nucléus est tout à fait exceptionnelle, que, sur des centaines d'ovules que nous avons examinés, nous ne l'avons trouvé que trois fois, nous devons nous refuser à le considérer comme un élément normal de l'œuf. »

Emery (22), dans sa belle monographie du Fierasfer, décrit et figure le noyau vitellin dans les jeunes ovules de ce Téléostéen sur des pièces durcies par le liquide de RIeinenberg; il apparaît comme une petite masse granuleuse, excentrique, se colorant fortement par la teinture de cochenille. Il augmente de volume, devient in*égulier, s'entoure de granulations vitellines et finit par disparaître.

De Gasparis (24), en i88d, signale dans des œufs de Gomatule, de 6»*»,03 à 0"",09, un noyau elliptique qui apparaît dans le voisinage de la membrane vitelline. Ce noyau s'accroît en même temps que l'œuf, se courbe en s'approchant de la vésicule germinative qu'il finit par entourer entièrement.

Jatta (34), en i883, trouve dans les œufs ovariens i'Asteracanthion glaciale^ une masse de substance homogène se colorant fortement par le carmin, qu'il considère comme un noyau vitellin. Cette masse peut prendre un grand développement, présenter des contours très irréguliersy ou se fragmenter en un grand nombre de petits noyaux répandus dans le vitellus. Dans l'œuf de Pholcus phalangioides, où M. Balbiani n'avait pas pu trouver la vésicule embryogène, Jatta décrit un noyau vitellin allongé, courbé en arc autour de la vésicule germinative.

Henking (27) signale dans l'œuf mûr du Trombidium fuliginosum, un noyau vitellin de couleur orangé, qui disparaît plus tard; le vitellus prend en général lui-même cette coloration.

lijima (32), en 1883, observe dans quelques œufs de Nephelis, mesurant environ 1 millimètre, un ou plusieurs corpuscules inclus dans le vitellus, généralement à la périphérie. Dans l'œuf fraîchement pondu il a pu compter jusqu'à cinq de ces corps : ceux-ci sont plus ou moins sphériques, réfringents et granuleux. Étant donnés

8 L.-F. HENNEGUY. — LE CORPS VITELIJN DE DALBIANI

leur nombre variable et leur absence totale dans certains œufs, lijima pense que ces corps sont de simples agrégations de matériaux nutritifs et n'ont pas une valeur morphologique spéciale.

Iwakawa (83) arrive à peu près à la même conclusion relative* ment à une petite masse ovalaire, granuleuse, qu'il a trouvée dans quelques ovales du Triton pyrrhogaster, récolté dans les environs de Tokio.

Schûtz (54), en 1883, publie un travail spécial sur le noyau vitellin. Il nie Texistence de ce corps chez Argulus, FÉcrevisse, les Aphidiens. Chez Tegenaria, le noyau manque complètement dans les jeunes ovules ; dans les œufs plus âgés, il est constitué par un ou plusieurs amas de granulations, qui s'orientent plus tard en couches concentriques, puis disparaissent; le noyau ne présente plus alors que des couches homogènes. Plus tard, ces couches se liquéfient du centre à la périphérie, de sorte qu'il se produit une cavité centrale. Chez les animaux privés de nourriture pendant trois ou quatre semaines, le noyau vitellin ne consistait plus qu'en une agglomération de granulations. Pour Schiitz, le noyau vitellin apparaît spontanément dans Tœuf ; il n'a pas la constitution d'une cellule, ne prend aucune part à la formation de l'embryon; c'est une réserve momentanée de matériaux nutritifs qui sont assimilés pendant l'évolution de Tœuf.

Valaoritis (59), sous le nom de noyau vitellin, décrit chez la Salamandra maculatay une masse jaunâtre, irrégulièrement délimitée, qui n'est pas formée de granulations vitellines et qui occupe la position de la vésicule germinative. Cette masse joue, par rapport au protoplasma de l'œuf, le même rôle que la vésicule germinative. Pour Valaoritis, le noyau vitellin de la Salamandre résulte d'une métamorphose de la vésicule germinative. Il n'a retrouvé une semblable formation que très rarement chez la Salamandre terrestre. Valaoritis représente également une coupe d'œuf de Salamandre à moitié mûr, dans laquelle, à côté de la vésicule germinative, se trouve une masse protoplasmique d'où rayonnent en divergeant de nombreux filaments protoplasmiques. Il rapproche son observation de celle deFlemming(23), qui a trouvé dans un œuf ovarien d'Ëchinoderme, une disposition radiée du protoplasma, à la périphérie de l'œuf.

Rein (48), en 1883, a trouvé chez trois Lapines, dans des œufs ovariens, le noyau vitellin; deux fois dans des œufs mûrs ayant

DANS l'OEDP DBS VERTÉBRÉS. 9

leur vésicule germinalive à la périphérie, et une fois dans un œuf tout à fait mûr, huit heures après Taccouplement. Ce noyau était dans deux cas situé à peu près au centre du vitellus, sa substance était très finement granuleuse et ne contenait aucun nucléole; examiné à l'état frais, le noyau vitellin présentait des mouvements amiboïdes. Étant donnée la ressemblance de ce noyau avec le noyau de Tœuf ou pronucléus femelle au moment de la fécondation. Rein se demande si ce dernier ne dériverait pas du noyau vitellin, au lieu de provenir de la vésicule germinative comme on Tadmet généralement.

La même année, i883, paraissent d'importants travaux sur la constitution et l'origine du noyau vitellin ; ceux de MM. Balbiani, van Bambeke et Sabatier.

M. Balbiani (7) reprend l'étude de l'œuf de Geophilus longicomisy G. carpophagus : il constate que la vésicule germinative bourgeonne; que les bourgeons détachés deviennent des centres de formation de cellules qui émigrent à la périphérie de l'œuf pour constituer Tépithélium folliculaire, et que le noyau vitellin n'est qu'une cellule du follicule qui se différencie des autres au sein du vitellus.

Van Bambeke (12) signale l'existence du noyau vitellin chez Leuciscus rutilns, Squalius leucisciÂS^ Modem amanju, il appelle Taltention sur une poche membraneuse renfermant la vésicule germinative et reliée au noyau vitellin situé à la périphérie de l'œuf.

Sabatier (49) décrit le noyau vitellin chez plusieurs Aranéides, Tegenaria doniesHca, T. agrestis, Agelena labyrinthicay Linyphia mantana, Theridium nervosttmj Pholcus phalangioides, Epeira diademùy E. fasciata, Tethragnatha extensa^ Thomisia citrina, plusieurs espèces de Lycosa, Phalangium Opilio. Cet élément, né dans le voisinage de la véhicule germinative, se porte à la périphérie de l'œuf, et s'y désagrège; c'est un élément de polarité mâle, qui se détruit comme tel pour accentuer et compléter la sexualité de la cellule femelle.

Will (03), en 1884, en étudiant la formation des éléments vitellins dans l'œuf des Amphibiens, arrive à cette singulière conclusion qu'ils proviennent tous de la vésicule germinative. De celle-ci se détachent des bourgeons renfermant des taches germinatives. Les taches germinatives, ainsi répandues dans le protoplasma de Tœuf,

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perdent leurs contours nets, et se résolvent en un grand nombre de petites granulations, et se transforment en noyaux viteilins, qui se fusionnent ensuite pour constituer la couche périphérique granuleuse de l'œuf, dans laquelle les granulations se transforment en tablettes vitellines. Suivant Will, il n*y a pas à proprement parler de noyaux vitellins, ou bien il faut donner ce nom à toutes les taches germinatives qui sortent de la vésicule germinative pour donner les tablettes vitellines.

Blochmann ^16), en 1884, fait connaître un curieux processas qui accompagne Toogenèse chez certains Hyménoptères, Campanotus Hgniperda, Formica, Myrmica, Vespa. La vésicule germinative bourgeonne et produit un grand nombre de petites vésicules renfermant une partie du réseau chromatique du noyau de l'œuf; ces vésicules se transforment en noyaux assez volumineux qui se dispersent dans le vitellus et subissent plus tard une dégénérescence. Bien que Blochmann n'assimile pas ces noyaux au noyau vitellin ou vésicule embryogène, et qu'il leur donne le nom de Nebenkerne, je crois utile de mentionner ici ses observations parce qu'elles ont appelé l'attention sur des productions intra-vitellines d'apparence similaire dont l'étude avait été jusqu'alors négligée. Stuhlmann (57) a retrouvé ces noyaux dans les œufs de différents Insectes, Aphrophora^ Musca, Periplaneta <, GryUotaipay Locusia, PieriSj Sphynx^ et plusieurs espèces de Coléoptères et d'Hyménoptères; il les a vus apparaître dans le voisinage de la vésicule germinative, puis entrer en dégénérescence. Il leur donna le nom de Reifungsballen et les considéra comme remplaçant les globules polaires chez les Insectes. Korschelt (36) et Lameere ont confirmé les observations de Blochmann, le premier chez la Mouche, le second chez CampanottiSj et font également dériver ces noyaux intra-vitellins de la vésicule germinative. J'ai pu moi-même les observer dans les œufs ovariens d'une reine d'Abeille, mais je ne puis me prononcer relativement à leur origine.

Dans le même ordre d'idées, 0. Hertwig (29), en 1884, constate dans les jeunes œufs ovariens des Amphibiens l'existence de productions vitellines, fusiformes, hyalines, tantôt rapprochées de la vésicule germinative, tantôt situées dans la couche corticale. Ces corps de forme variée, généralement allongés, mesurent en moyenne 0°'°',08 de long, et sont en nombre très variable. Us manquent dans les très jeunes ovules; à leur place on trouve, dans

DANS l'oeuf des VERTÉBRÉS. 11

le proloplasma ovulaire, des corpascnles ovales oa sphériques, ayant l'apparence des taches germinatives. Les corps fusiformes intra-vitellins sont très répandus dans les œufs de Rana temporafia; ils sont plus rares et plus petits chez R. esculenta et manquent chez le Crapaud, la Rainette et BomMnator. Hertwig ne se prononce pas sur le mode de formation et la signification de ces productions.

0. Schuitze (53), en 1887, observe le noyau vitellin dans Toeuf de Rana fusca^ et en outre, à la périphérie de Tœnf, des amas de petites granulations, qui sont probablement les premiers vestiges des éléments vilellins ; il a trouvé aussi d'antres formations granuleuses brunes on verdâtres.

Legge (37), en 1887, décrit dans les jeunes oeufs ovariens de la Poule, dont le vitellus est encore transparent, une zone centrale conoïde, arrondie ou ovoïde, et une zone périphérique granuleuse se colorant en noir par l'acide osmique. Les granulations de la zone périphérique, de nature graisseuse, constituent pour l'auteur un noyau vitellin diffus. Au début elles n'existent qu'en petit nombre dans l'œuf, puis elles se multiplient, deviennent plus petites et se groupent autour de la zone centrale. Plus tard elles deviennent de très petits granules qui émigrent vers la périphérie sans toutefois l'atteindre ; elles disparaissent enfin complètement ; il est probable qu'elles sont assimilées par le protoplasma. Beaucoup plus tard se forment les premières sphères vitellines, qui, selon toute apparence, n'ont aucun rapport avec les noyaux vHeliins.

^ Schimkewitsch (52) affirme que chez les Araignées la vésicule embryogène ne se rencontre jamais dans l'œuf pondu, et il ajoute : « Je crois que la signification de cette formation a été suffisamment discutée par Schutz pour qu'il soit inutile de revenir sur ce point. »

La même année, je faisais connaître un procédé de fixation de la vésicule de Balbiani chez les Vertébrés et la structure de ce corps chez les Mammifères (28).

Winkler (64), en 1888, dans son travail sur les Gamasides, indique, dans les jeunes ovules des Uropoda, un noyau vitellin semi-lunaire qui se désagrège plus tard en sphérules de vitellus nutritif.

Scharff (51), dans son mémoire sur les œufs ovariens des Poissons osseux, ne parle pas de l'existence d'un noyau vitellin, mais il

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a VU à la surface de la vésicule germinative des bourgeons renfermant des nucléoles ; il admet que ces bourgeons se détachent et se transforment dans le plasma de Tœuf en sphères vitellines : il a retrouvé dans le plasma des corps colorables qui paraissaient avoir la même constitution que les nucléoles.

Leydig (41) admet dans les œufs ovariens, qui ne sont pas encore arrivés à la maturité, la présence de corps nucléaires et même d'élé* ments ayant un caractère cellulaire ou amiboïde. Ces corps intravitellins auraient une double origine; les uns ressemblent aux taches germinatives et proviennent très vraisemblablement de la vésicule germinative; les autres se forment directement dans le viteHus et sont des Nebenkerne, Ces dernières formations sont des points nodaux, épaissis et déformés, du spongioplasma du vitellus. Suivant Leydig, les noyaux intra-vitellins qui ont pour origine les taches germinatives deviennent les noyaux blastodermiques chez les Arthropodes; quant aux autres productions, il ignore leur signification. Dans beaucoup de cas le noyau vitellin n'est qu'un des noyaux intra-vitellins plus gros que les autres; ce noyau vitellin est pour Tauteur un corps énigmatique dont la fonction comme l'origine sont encore très douteuses.

HoU (30), en 1890, indique, dans les jeunes ovules de la Poule, le noyau vitellin comme une formation normale. Il est déjà bien visible dans les œufs ayant 0''"',04 de diamètre; il se distingue par sa coloration foncée, le reste du protoplasma de Tœuf étant incolore. Ce noyau vitellin est situé près de la vésicule germinative et se présente sous forme d'un renflement déprimé, ou d'une masse épaisse, striée. Il envoie des prolongements rayonnants dans le protoplasma de Tœuf. Holl a observé également un noyau vitellin annulaire entourant entièrement la vésicule germinative, et duquel partaient de nombreux prolongements rayonnants.

Tout récemment Monlicelli (44), dans un travail que je ne connais que par une courte analyse, vient de décrire un noyau vitellin dans l'œuf des Trématodes, Distomum veliporum et D. Richardi. Il le considère comme n'ayant aucun rapport avec la vésicule germinative, et comme un produit de différenciation protoplasmique, jouant probablement le rôle de centre de formation du vitellus.

Le court historique qui précède montre combien peu sont nombreux les auteurs qui ont signalé dans les œufs des formations

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spéciales différentes de la vésicule germinative, et combien sont variables et diverses les formations qui ont été décrites sous le nom de noyau vitellin. Ces deux faits tiennent évidemment à la difficulté que présentent la recherche et l'observation de la vésicule embryogène chez la plupart des animaux.

C'est dans les jeunes ovules de certaines Araignées, entre autres de la Tegenaria domestica, que la vésicule de Balbiani s'observe le plus facilement. Il suffit, en effet, d'examiner un fragment d'ovaire dans le sang même de l'animal, ou dans un liquide indifférent, pour apercevoir immédiatement le noyau vitellin, qui, par son aspect réfringent et sa structure spéciale, est plus apparent que lu vésicule germinative. Dans la plupart des œufs des autres animaux, cet élément, à peine visible comme une petite tache claire lorsqu'on examine la préparation à l'état frais, n'apparait nettement qu'après l'action des réactifs coagulant le protoplasma, tels que l'eau acidulée par l'acide acétique.

Pendant longtemps le noyau vitellin n'a pu être étudié que sur des préparations extemporanées qui ne pouvaient être conservées. Cependant M. Balbiani avait pu garder plusieurs années des jeunes ovules de CoHus Icevigatus dans le liquide de MûUer, et les ovules montés ensuite dans la glycérine montraient encore distinctement la vésicule embryogène. M. Ranvier, dans son Traité d'histologie, a donné une figure de jeune ovule de Souris, fixé par l'acide osmique, et dans lequel le noyau vitellin est visible.

L'emploi du liquide de Flemming, comme fixateur pour des pièces fraîches prises sur des animaux, très peu de temps après la mort, m'a permis d'obtenir de bonnes préparations du noyau vitellin chez certains Mammifères et quelques autres Vertébrés, préparations qui, colorées, soit par l'hématoxyline, soit par la safranine, soit simultanément par le violet de gentiane et l'éosine, puis montées dans le baume, se sont conservées depuis cinq ans aussi nettes qu'au premier jour.

Avant d'exposer le résultat de mes propres recherches et de discuter les opinions de mes prédécesseurs, je rappellerai les observations de mon maître, M. Balbiani, observations dont n'ont pas tenu compte la grande majorité des auteurs qui se sont occupés du noyau vitellin, ce qui explique la confusion qui règne actuellement dans la science relativement à la nature de cette formation.

Abstraction faite des Aranéides, chez lesquelles von Wittich,

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Garas et Siebold avaient déjà reconnu qae le noyau vilellîn est constitué par une vésicule centrale entourée de couches protoplasmiques différenciées, tous les autres auteurs, sauf M. Balbiani, ont décrit le noyau vitelUn comme formé par une masse compacte plus ou moins granuleuse, tranchant par son opacité sur le reste du vitellus transparent. M. Balbiani a montré le premier que, chez la plupart des animaux dans les œufs desquels il avait rencontré cet élément, il existe dans la masse granuleuse, une vésicule centrale très délicate, transparente, autour de laquelle se déposent graduellement des granulations, ou des couches protoplasmiques différenciées.

Dans les jeunes ovules de Tegenaria domestica de 0"",028 à 0™™,030, la vésicule embryogëne apparaît sous forme d'une petite vésicule homogène et transparente, large de 0"",008 à O^^'jOO?, qui augmente ensuite de volume. Elle renferme une substance pUe et granuleuse, dans laquelle on aperçoit un corpuscule rond, faiblement réfringent, situé à son centre ou près de sa surface.

Chez les Iules et les Géophiles, le noyau vitellin se présente aussi comme une vésicule claire, renfermant un noyau assez large, pâle, granuleux, souvent entouré d'un cercle de petits grains brillants.

Dans les œufs de la Rana temporaria, M. Balbiani a vu également au centre de Tamas granuleux, décrit par Cramer, une petite vésicule claire, nucléée. Il en est de môme chez les Poissons osseux, la Raie, le Squatine ange, la Poule, le Moineau, la Gresserelle, le Vanneau, etc.

Enfin chez les Mammifères, M. Balbiani a décrit et figuré dans I06 jeunes ovules de la Femme et de la Vache un petit noyau vitellin vésiculeux, renfermant, chez le Veau, un corpuscule central, et entouré de granulations. « La vésicule embryogëne, dit-il, est une cellule, puisqu'elle est formée d'une masse de protoplasma, avec un noyau et un nucléole. Ces deux derniers éléments ne sont pas généralement difficiles à apercevoir, mais le protoplasma se confond souvent avec celui de l'œuf, parce qu'il possède la môme réfringence. U devient très visible lorsque sa structure est modifiée, comme chez l'Araignée. Le noyau se colore en rouge par le carmin, mais très lentement dans l'œuf de l'Araignée à cause des couches condensées qui l'entourent. »

Mes recherches personnelles ont porté exclusivement sur les Vertébrés; j'ai examiné un assez grand nombre d'œufs ovariens chez des Mammifères (Femme, Singe, Vache, Brebis, Antilope,

DANS l'ceuf des vertébrés. 1K

Chienne, Chatte, Tanpe, Musaraigne, Lapine, Cobaye, Souris, Rat, Chauve-Souris), d'Oiseaux (Poule, Moineau, Cigogne), de Reptiles (Lézard vivipare, Lézard vert, Orvet), d'Amphibiens (Grenouille verte, Grenouille rousse, Crapaud, Tritons), et de Poissons (Squales, Raies, Saumon, Truite, Ëperlan, Limande, Syngnathe, Reloue, Vairon, Gonelle, Rlennies, etc.).

Ce n'est que chez quelques animaux que je suis arrivé à trouver la vésicule de Ralbiani d'une manière constante dans tous les jeunes ovules; chez d'autres, je n'ai pu l'observer qu'exceptionnellement; chez beaucoup enfin je n'ai pu la voir, du moins dans mes préparations pelrmanentes, faites à l'aide d'ovaires fixés par le liquide de Plemming. Je décrirai d'abord la disposition que j'ai toujours rencontrée chez le Rat et le Cochon d'Inde, qui sont les Mammifères les plus favorables pour l'étude de cet intéressant élément.

Chez les Rats, âgés de quelques semaines, dont les ovaires ne renferment que des ovules peu avancés, on constate, après fixation par le liquide de Flemming, que tous les jeunes ovules contiennent, à côté de la vésicule germinative, un petit corps arrondi, nettement circonscrit, et un peu plus coloré que le reste du protoplasma ovulaire. Ce corps, que je désignerai dorénavant sous le nom de corps mtellin de Balbianiy mesure en moyenne 6 à 7fA de diamètre. Sur les coupes son aspect rappelle celui des globules sanguins contenus dans les vaisseaux; il est cependant un peu plus petit et un peu moins réfringent que ces derniers.

Le corps vitellin de Ralbiani ne s'observe plus dans les ovules entourés d'une granulosa constituée par trois ou quatre couches de cellules. On le voit au contraire nettement dans tous les autres ovules plus jeunes et même dans les ovules primordiaux contenus encore dans l'épithélium germinatif qui recouvre la surface de l'ovaire (fig. 2, op). Je n'ai jamais trouvé qu'un seul corps dans un ovule. Sa position est à peu près constante; il est toujours rapproché de la vésicule germinative; le plus souvent même en contact avec elle. Tantôt il est nettement arrondi, tantôt de forme ovalaire, rarement il présente des contours un peu irréguliers.

Examiné à un fort grossissement, avec le 1/18 à immersion homogène de Zeiss, ou le 1/12 de Leitz, le corps vitellin de Ralbiani se montre formé de deux parties distinctes; une partie périphérique plus claire et une partie centrale plus condensée, et plus fortement teintée par l'acide osmique. Le diamètre de ce noyau

16 L.-F. HBNNEGUY. ~ LE CORPS VITELUN DE BALBIANf

central mesure à peu près la largeur de la zone périphérique (fig. 3. cv).

L'aclion des réactifs colorants sur le corps vilellin est intéressante à considérer. La safranine le colore en rose pâle, le noyau central étant un peu plus foncé que la zone périphérique ; la teinte des deux parties est uniforme. Dans la vésicule germinative et les noyaux des cellules de la granulosa ou des cellules du stroma ovarique, la safranine ne colore que le réseau chromatique en rouge vif.

Le vert de méthyle et le violet de gentiane employés suivant la méthode de Bizzozero, sont sans action sur le corps vitellin ; si Ton fait une double coloration avec ces réactifs associés à Téosine, le corps vitellin se colore en rose, le réseau chromatique de la vésicule germinative et des noyaux étant vert ou bleu violet.

L'bématoxyline a une grande affinité pour le corps vitellin ; dans les coupes traitées par cette matière colorante, ce corps est plus visible que la vésicule germinative, dont le réseau chromatique reste pâle. La picro-nigrosine et en général toutes les matières colorantes qui colorent le protoplasma, sans présenter une grande affinité pour la chromatine, font apparaître nettement le corps vitellin.

Chez le Rat adulte, le corps vitellin se voit aussi bien que chez les jeunes animaux; de même que chez ceux-ci, il n'existe que dans les jeunes ovules entourés au plus d'une ou deux couches de cellules folliculaires.

L'ovaire du Cochon dinde, surtout celui des nouveau-nés, est aussi favorable que celui du Rat pour l'étude du corps vitellin de Balbiani. Il y présente l'aspect, la constitution et les mêmes dimensions que chez le Rat (fig. 1).

Parmi les Chéiroptères, l'ovaire d'une Pipistrelle m'a donné des préparations très intéressantes. Sur des coupes colorées à la safranine, dans le voisinage de la vésicule germinative, se trouve uu corps arrondi, réfringent, fortement noirci par l'acide osmique, et renfermant dans son intérieur un corpuscule arrondi (fig. 4, cv). Cet élément a la même constitution que le corps vitellin de Balbiani, chez le Rat et le Cochon d'Inde; il occupe la même position et n'existe aussi que dans les jeunes ovules. Il ne diffère de celui des animaux précédents que par la manière dont il noircit sous l'influence de l'acide osmique et son manque de coloration par la safranine.

DANS l'gBUF des VERTÉBRÉS. 17

Le corps \itellin se comporte donc dans l'ovaire que j'ai examiné comme un élément en voie de dégénérescence graisseuse.

Chez aucun autre Mammifère je n*ai pu observer le corps vitellin d'une façon aussi nette ni aussi constante que chez le Rat, le Cobaye et la Pipistrelle.

Dans Tovaire d'une Femme de trente-cinq ans, fixé immédiatement après la castration, les rares jeunes ovules qui existaient à la périphérie de l'organe montraient une petite tache plus fortement colorée par la safranine que le reste du vitellus, et dans laquelle on soupçonnait un corpuscule central peu distinct.

Chez une jeune Chatte de quatre mois, dans un seul ovule de 68p. de diamètre, dont la vésicule germinative mesurait 40[a, j'ai trouvé un corps arrondi de 10|jl de diamètre, finement granuleux et coloré par la safranine (Qg. 6). Dans l'intérieur de ce corps on ne pouvait observer aucun corpuscule central. J'ai retrouvé un corps à peu près identique dans un ovule d'un embryon de Mouton de 47 centimètres.

Chez un autre embryon de Mouton moins âgé, il y avait dans un ovule, à côté de la vésicule germinative légèrement rétractée, une tache un peu diffuse, semi-lunaire, légèrement teintée par Tacide osmique et contenant un corpuscule arrondi un peu plus coloré (fig. S).

Dans les nombreux ovaires de Lapine, de Chienne que j'ai examinés, en variant les modes de fixation et de coloration, je n'ai jamais vu dans le vitellus des ovules, même les plus jeunes, aucun élément pouvant être considéré comme un corps vitellin de Balbiani. Il en a été de même pour la Taupe, le Rhinolopbe, la Vache, une jeune Antilope d'espèce indéterminée et un fiabouin. Les ovaires de ces deux dernières espèces avaient été pris sur des individus morts de maladie et plusieurs heures après la mort; on ne peut donc conclure de l'absence du corps vitellin dans les préparations à la non-existence de ce corps chez ces animaux.

Chez les Oiseaux, la vésicule embryogène ne se présente pas, du moins sur les pièces fixées par le liquide de Flemming, avec la même netteté que chez les Mammifères que j'ai cités plus haut. Dans les ovules de la Poule et du Moineau, mesurant de fOO à ISOfA de diamètre, on trouve presque constamment, au voisinage de la vésicule germinative, un corps arrondi, plus petit que la vésicule (fig. 10, CD). Ce corps très finement granuleux se colore plus

JOURN. DE l'aNAT. ET DE LA PHYSIOL. — T. XXIX. 2

18 L.-F. HENNEGUY. — LE CORPS VITELLIN DK B\LBlAI<iI

fortement que le reste dn vilellus par la safranine ou le violet de gentiane. Il est souvent mal délimité et envoie des prolongements radiés dans le protoplasma ovulaire. Je n'ai jamais pu observer dans son intérieur soit une vésicule plus claire, soit une masse plus dense et plus colorée comme chez les Mammifères. M. Balbiani a cependant vu, à l'état frais, une vésicule claire au milieu de la masse granuleuse. Il est très probable que la vésicule centrale, très délicate, disparait sous Tinfluence du réactif fixateur, et que la zone granuleuse qui Tentoure reste seule visible.

Les Reptiles que j'ai examinés, au point do vue du corps vitellin de Balbiani, l'Orvet, le Lézard vert et le Lézard vivipare, ne m'ont présenté, dans les jeunes ovules, aucun corps rappelant celui que j'ai observé chez les jeunes Oiseaux. Le vitellus était ou entièrement homogène, ou renfermait des couches concentriques fmement et grossièrement granuleuses, mais sans masse arrondie finement granuleuse et distincte.

Il en a été de même dans les ovaires de Plagiostomes, Galeus canis, Raja clavata, Scyllium canicula que j'ai étudiés après fixation par le liquide de Flemming.

Parmi les Amphibiens, ce n'est que chez Rana temporaria, ainsi que l'ont constaté mes prédécesseurs, que le corps vitellin est facile à observer. Sa présence est constante dans tous les jeunes ovules. Situé dans le voisinage de la vésicule germinative, mais non loin de la périphérie de l'œuf, le corps vitellin de Balbiani de la Grenouille rousse a le môme aspect que celui des Oiseaux. Ses contours sont souvent mal délimités et offrent de petits prolongements irréguliers dans la masse vitelline. Il est constitué par une masse finement granuleuse prenant, sous l'action de l'acide osmique et de la safranine, une teinte beaucoup plus foncée que le reste du vitellus. J'ai pu voir plusieurs fois dans son intérieur un corps plus coloré et nettement délimité qui me paraît devoir être identifié avec le corps central du corps vitellin du Rat et du Cobaye (fig. 11).

La masse granuleuse du corps vitellin, examinée à un fort grossissement, sur de bonnes préparations traitées par le liquide d'Hermaqn, le permanganate de potasse et la safranine, offre une structure assez complexe (fig. 16). Elle est constituée par une substance homogène très finement ponctuée, assez fortement colorée par l'acide osmique; dans l'intérieur de cette substance sont renfermées de nombreuses vacuoles claires se présentant sous forme de vési-

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cules arrondies ou allongées dont le centre est occupé par des granulations safranophiles, disposées en chapelet. Les vésicules arrondies ne sont très probablement que des vacuoles allongées, vues par Tune de leurs extrémités. En faisant, en effet, varier la mise au point, on constate que les vacuoles ont une tendance à s'enrouler en spirales et sont enchevêtrées les unes dans les autres. Celte structure est identique à celle découverte par M. Balbiani (8 bis) dans le noyau du Loxophyllum Meleagris. En traitant le noyau de cet Infusoire par Tacide osmique, le vert de méthyle, puis par une solution très faible d'ammoniaque et enfln par Feau distillée légèrement colorée par le vert de méthyle, mon savant maître a obtenu une figure (fig. 7 de son Mémoire), qui offre la plus grande analogie avec notre figure 16. M. Balbiani a constaté que cet aspect du noyau est dû au gonflement et â la rupture sous Tinfluence des réactifs, d'un cordon nucléaire formant des circonvolutions plus ou moins nombreuses au sein d'un suc nucléaire très riche en granulations.

En traitant de jeunes ovules de Rana temporaria, pris sur l'animal vivant, par une solution faible de chlorure de manganèse additionnée de violet dahlia, suivant la méthode employée par Pictet (45) pour Tétude de la spermatogenèse chez les Invertébrés, j'ai pu retrouver, à l'état frais, la structure de la masse granuleuse que j'avais observée sur des coupes. On constate, en effet, que cette masse renferme dans son intérieur un grand nombre de petits corps figurés, allongés en bâtonnets sinueux et enchevêtrés dans tous les sens. Ces bâtonnets se colorent par le violet dahlia, tandis que la substance homogène dans laquelle ils sont plongés demeure incolore. Ils paraissent être libres et ne pas appartenir à un cordon continu, enroulé en peloton sur lui-même (lîg. IS).

J'ai retrouvé une structure identique dans le corps désigné généralement sous le nom de Nebenkern ou de noyau accessoire des cellules séminales des Insectes et de quelques autres animaux. Elle y avait du reste été déjà indiquée par Platner (46) et par Prenant (47), mais d'une manière beaucoup moins nette. Il s'agit très probablement dans ce cas d'une structure protoplasmique particulière qui peut se rencontrer, ainsi que je le démontrerai plus tard, dans beaucoup de cellules.

La masse granuleuse qui entoure le corps vitellin ne se montre pas toujours avec l'aspect que je viens de décrire. Généralement

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elle est simplement finement granuleuse, mais elle renferme souvent de gros grains irréguliers, se colorant fortement par la safranine (flg. 14). Ces grains sont disposés sans ordre dans la masse, et occupent de préférence la périphérie.

Outre le corps vitellin de Balbiani, entouré de sa masse granuleuse, on trouve dans les jeunes ovules de Rana temporaria^ les productions vilellines signalées par 0. Hertv^rig (29) et présentant tous les aspects décrits et figurés par cet auteur. Dans des œufs plus avancés en développement j'ai rencontré des corps intra-vitellins, fusiformes ou arrondis, occupant la même situation que les corps d'Hertwig et se colorant alors plus fortement par la safranine que le reste du plasma ovulaire. Examinés à un fort grossissement, ces corps se montraient remplis de jeunes tablettes vitellines disposées en séries. Ces tablettes orientées parallèlement à leur grand axe et placées les unes à côté des autres conslituent des chapelets enchevêtrés, plongés au sein d'une substance très finement granuleuse. Chaque groupe de chapelets est entouré d'une zone claire, hyaline, due probablement à une rétraction de la masse plasmique sous Tinfluence du liquide fixateur, qui, pour les œufs, dans lesquels j'ai observé le plus nettement cette disposition, était le liquide de Ripart et Petit. Je suis porté à admettre que les corps intra-vitellins d'Hertwig ne sont que des parties du plasma ovulaire plus condensées dans lesquelles se formeront plus tard les'premiëres tablettes vitellines (fig. 12).

Chez la Rana esculenta on ne trouve pas en général de corps vitellin de Balbiani dans les ovules. J'ai observé cependant une seule fois, sur des coupes de l'ovaire d'une très jeune Grenouille verte, dans un ovule, mesurant environ 20 ;x, dont la vésicule germinative occupait la plus grande partie du corps de l'ovule, une petite tache granuleuse faiblement colorée, occupant le centre d'un croissant également granuleux mais non coloré (fig. 13). Cette formation me parait devoir être assimilée à celle qui se rencontre normalement chez la Grenouille rousse, et être considérée par conséquent comme un corps vitellin accidentellement développé dans une espèce qui en est dépourvue.

Dans les œufs de Bufo vulgam, de Triton tœntatus, de T. cmtatus, je n'ai observé aucune formation rappelant de près ou de loin le corps vitellin.

Chez les Poissons osseux, au contraire, il est très facile devoir le

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corps vitellin soit à Tëtat frais, soit après fixation par le liquide de Flemming. Je ne parlerai ici que des espèces qui m'ont donné les préparations permanentes les plus favorables pour Tétude.

Sur des coupes d'ovaires de Truite recueillis après la ponte, au mois de janvier, les ovules déjà assez avancés dans leur développement et mesurant en moyenne 0"'',3 à 0"",4 présentent autour de la vésicule germinaiive qui occupe une position centrale, deux couches concentriques d'aspect différent (fig. 17). La couche externe est finement granuleuse et se colore faiblement par la safranine en rose pâle, quand on pousse la décoloration jusqu'à ce que le contenu de la vésicule germinative, à l'exception des nucléoles, reste incolore. La couche interne, plus grossièrement granuleuse et plus colorée que la précédente, est séparée de celle-ci par des formations fusiformes irrégulières, constituant par leur ensemble une sorte d'anneau présentant une teinte plus foncée que le reste du vitellus. Cette disposition du vitellus est la même que celle observée par Scharff (51) chez plusieurs espèces de Poissons osseux, avec cette différence que Tauteur anglais ne mentionne pas les corps fusiformes. C'est dans la partie externe de la zone interne que se trouve le corps vitellin de Balbiani. Il est constitué par une partie centrale fortement colorée, entourée d'une zone moins foncée, mais cependant plus teintée que le reste du vitellus. On retrouve donc chez la Truite la même structure du corps vitellin que chez le Rat ; mais chez les Poissons ce corps est beaucoup plus volumineux que chez ' les Mammifères ; il mesure en effet 20 [». de diamètre tandis que celui du Rat n'a que 6 à 7 (a. En outre, chez la Truite, le corps est moins nettement circonscrit que chez les Rongeurs.

J'ai retrouvé une structure des ovules et un corps vitellin identique dans les ovaires de jeunes Salmo quinnat, qui n'étaient pas en état de se reproduire.

Les jeunes ovules de BeUme longirostris montrent aussi de la façon la plus nette, après fixation, un corps vitellin identique à celui des Salmonidés (fig. 19, cv). J'y ai de plus constaté dans quelques cas ta structure alvéolaire que j'ai indiquée plus haut pour Rana temporaria. Chez Limanda vulgariSy le corps vitellin est aussi très visible dans la plupart des jeunes ovules, mais je n'ai pu réussir à y découvrir le corps central (fig. 18, cv).

Parmi tous les Téléostéens que j'ai examinés, le Syngnathe {Syngnathw acus) est celui qui m'a donné les faits les plus intéres-

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sâQts. Les OYttles primordiaux de ce Poisson ne sont constitués que par une petite masse protoplasmique homogène, munie d'un noyau assez volumineux et renfermant un réseau chromatique bien développé (fig. 20, op). Dans les ovules un peu plus avancés, le noyau a changé d*aspect ; la membrane nucléaire est tapissée par un grand nombre de taches germinalives ; le centre du noyau est occupé par une petite masse finement granuleuse et teintée en rose par la safranine, tandis que le reste du contenu demeure incolore (fig. 24). Le protoplasma ovulaire est également faiblement coloré et renferme un corpuscule arrondi, réfringent comme les taches germinalives et retenant la safranine avec la même intensité que ces dernières. Dans les ovules encore plus développés, mesurant en moyenne 60 (x de diamètre, le corpuscule coloré intra-vitellin a subi d'importantes modiflcations ; il est devenu elliptique, son grand axe étant parallèle à la surface de Tœuf. Il est de plus au contact immédiat par son bord externe avec un amas arrondi, constitué par une substance fondamentale d'apparence homogène, mais remplie de granulations très colorées (fig 2g, cv). k un stade plus avancé tout le corps réfringent s'est transformé en un amas tel qu'on Tobserve dans la plupart des ovules des Poissons..

En examinant un très grand nombre d'ovules de Syngnathe, j'ai pu trouver toutes les phases de transition entre les quatre stades que je viens de décrire, l'absence du corps réfringent dans le vitellus, la présence du corps réfringent, sa résolution en granulations et sa transformation en corps vitellin. On voit, en effet, un certain nombre de très jeunes ovules dans lesquels le réseau chromatique du noyau a en grande partie disparu et se trouve pour ainsi dire rétracté sur la paroi interne de la membrane nucléaire, sous forme de petits points fortement colorés. Dans des ovules un peu plus gros, il existe immédiatement au contact avec la vésicule gcrminative, accolé à sa surface externe, un corpuscule réfringent, aplati, ayant le même aspect que les grains chromatiques tapissant la face interne de la vésicule germinative, et qui deviendront plus tard les taches germinatives. Ce corps réfringent ne diffère des futures taches germinatives que par ses dimensions plus considérables (Ag. 21 et 22).

Le corpuscule réfringent qui apparaît ainsi en contact avec la vésicule germinative s'en éloigne, grossit, s'arrondit et se place à peu pré» à égale distance de la vésicule et de la périphérie de l'œuf

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(fig. 24). Avant que ce corpuscule commence à se résoudre en granulations, on voit sa partie tournée vers la surface de l'œuf s'hypertrophier et se creuser de vacuoles irréguliëres. A cet état succède le stade dans lequel au corps réfringent est accolée une petite masse homogène, remplie de granulations. Ces granulations paraissent provenir de la désagrégation des travées de substance réfringente et colorable qui séparent les alvéoles creusées dans la portion excentrique du corpuscule réfringent (fig. 25, 26,' 27 et 28, cv). Lorsque ce travail de désagrégation a envahi toutes les parties du corpuscule, celui-ci se trouve transformé en corps vitellin finement granuleux.

Tels sont les faits que j'ai pu observer relativement à la présence, la structure et le mode d'apparition du corps vitellin de Balbiani dans les œufs des Vertébrés. Avant d'exposer les conclusions que je crois pouvoir tirer de ces observations je résumerai les diverses opinions émises sur la signification et l'origine de cet élément.

Un grand nombre d'auteurs en signalant dans les œufs des ani* maux qu'ils étudiaient la présence d'un corps vitellin, ou de formations qu'ils considéraient comme telles, se sont bornés à en donner une description, sans formuler aucune appréciation sur son rôle et son mode de développement ; ils l'ont désigné souvent sous le nom de corps énigmatique.

L'hypothèse la plus ancienne, émise par Siebold, adoptée par Carus et par M. Balbiani, est que le corps vitellin est le centre de formation des éléments plastiques de l'œuf. Autour de lui se disposeraient des globules, qui se résoudraient plus tard en granulations pour constituer le germe aux dépens duquel se développera l'embryon, d'où le nom de vésicule embryogènc donné à ce corps par Milne-Edwards.

Une autre hypothèse, inverse de la précédente, consiste à considérer le corps vitellin comme le centre de formation des éléments nutritifs du vitellus ; elle est due à Allen Thomson.

Pour Lubbock, von Ihering, Schûtz, Schimkewitsch et Monticelli, le corps vitellin ne serait autre chose qu'une portion épaissie du vitellus de l'œuf, une accumulation de matériaux de réserve qui seraient résorbés, assimilés, pendant la croissance de l'œuf. Cet élément ne jouerait aucun rôle important dans la formation de Tembryon, ni dans la coustilution du vitellus.

M. Balbiani, le premier, s'est occupé de l'origine du corps vitellin ;

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après avoir établi que ce corps est une cellule, formée d'une masse de protoplasma avec un noyau et un nucléole, il décrivait ainsi, en 1879, son mode de développement. « La vésicule embryogène naît par bourgeonnement de Tune des cellules épithéliales qui entourent l'œuf dans le follicule de Graaf. En pénétrant dans Tœuf, cette cellule conserve son individualité : son protoplasma ne se fusionne pas avec le vitellus ; celui-ci est refoulé par la cellule, qui s'y creuse une cavité et y est comme enchâssée. Quelquefois le canal par lequel a pénétré la vésicule embryogène reste visible pendant quelque temps, comme je l'ai observé chez le Geophilus electricus et chez le Pleuronectus limanda ; le plus souvent ce canal s'oblitère par le rapprochement de ses parois et sa cavité devient virtuelle. »

Cette origine, admise alors par mon savant maître, l'avait conduit à émettre une hypothèse des plus ingénieuses et des plus séduisantes sur le réle du corps vitellin. « L'origine épithéliale de la vésicule embryogène, dit-il, en fait un élément analogue à une cellule séminale, qui doit exercer sur l'œuf une action semblable à celle d'un spermatozoïde.... C'est sous l'influence d'une sorte de fécondation exercée par la vésicule embryogène, représentant Télément mâle, que se forme le germe dans l'ovule femelle. On constate, en effet, que c'est toujours autour de cet élément que se

déposent les granulations plastiques La cellule embryogène

étant un élément mâle primordial, on comprend que, chez certains êtres, et dans certains cas, son action ne se bornera pas à déterminer la formation du germe. Elle pourra suffire à déterminer d'une manière plus ou moins complète, soit seulement les premières phases du développement de l'œuf, soit même ce développement tout entier et produire un animal parfait, ce qui constitue la parthénogenèse. »

En reprenant l'étude de l'origine du corps vitellin chez les Géophiles, M. Balbiani est arrivé à modifier sa première manière de voir relativement à son mode de développement. Il a reconnu, en effet, que ce corps ne dérive pas de l'ëpithélium du follicule, mais provient au contraire de la vésicule germinative. Celle-ci, dans l'œuf du Geophilm longicomis, envoie dans le vitellus un prolongement en forme d'entonnoir dans lequel pénètre un prolongement du gros nucléole ou tache germinative. Souvent l'appendice nucléaire a la forme d'un cordon plus ou moins long, enroulé ou pelotonné diversement à son extrémité. Ce cordon se morcelle en