‹ L'action du potentiel d'oxydation-réduction du milieu sur l'activité de différentes protéinases: hydrolyse et condensationChapitre 11 sur 43 · ME A · texte numérisé non relu

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Pour pouvoir suivre les évolutions du potentiel au cours de la digestion tout en laissant les échantillons réduits à abri de l'air, nous avons utilisé le dispositif reproduit par la figure 5, à savoir: un tube à essai de 10 cm? environ fermé par un bouchon de caoutchouc portant une électrode de platine et un tube coudé muni d’un robinet.

Ce dispositif permet de fermer le tube à essai rempli du milieu à étudier sans laisser de bulle d’air et d'établir le contact avec une demi-pile au calomel. pour les mesures de potentiel. Ce petit appareil dérive du tube de THUNBERG ; il est plus simple que celui de BorRsooKk-WUuRMSER, que nous avons ëgalement expérimenté, et s’est montré très maniable et suffisamment étanche à l’air pour nos besoins.

Nous avons suivi l’évolution du potentiel d’oxydation-réduclion des milieux en cours d'expériences. Avec certaines subslances, le potentiel s'établit vite à une valeur relativement stable, avec d’autres on assiste à une évolution très longue et Souvent de grande amplitude. Les milieux réducteurs maïintenus dans les tubes à l'abri de l'air sont très stables surtout si le potentiel est tamponné par des colorants. Mais même lhydrosulfite de Na seul produit des potentiels suffisamment Stables. Ainsi nous relevons dans une expérience de digestion de gélatine par la Papaïine les mesures suivantes :

Potentiel initial

Potentiel final

NEA +220 mV + hydrosulfite | +172 en quantité | —110 croissante — 390

Dans certains cas, l’autolyse produit des corps réducteurs ou des substances réagissant progressivement avec les oxydants ou les réducteurs introduits. Il en résulte une évolution, variable suivant les expériences, et qui peut parfois être gênante, notamment Pour le cristallin dans lequel, après broyage et sans addition d'aucun réactif, une réduction très importante du milieu se manifeste, Cependant, dans la plupart des Cas, le potentiel s’installe après quelques heures à un DIVEAU qui se maintient approximativement au cours de la fin de l’autolyse. Les potentiels indiqués, notés en millivolts mV) par rapport à l’électrode à hydrogène normale, sont

en conséquence toujours les potentiels finaux. Nous n’avons pas voulu réaliser un tampon d’oxydation-réduction en dehors de celui que les milieux possèdent spontanément et de celui que certains de nos réactifs introduisent, afin de modifier aussi peu que possible la composition chimique de nos extraits.

On remarquera que certains des oxydants que nous avons utilisés ne sont pas électroactifs dans le sens donné par WURMSER à ce terme. Il serait donc difficile, dans des milieux purifiés, de définir un potentiel. Mais, dans les milieux complexes que nous avons ulilisés, des réactions avec des substances électroactives présentes peuvent s’engager. Nous avons en fait toujours pu mesurer des potentiels de l’électrode de platine se présentant avec des caractéristiques telles (stabilité, reproductibilité et insensibilité à une polarisation de lélectrode) que nous pouvons les considérer comme des potentiels d’oxydation-réduction du milieu.

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