TECHNIQUES EMPLOYÉES

Les nombreux examens de sang que nous avons dû effectuer pour notre étude comprenaient : une numération des globules rouges et des globules blancs, un examen du sang : frottis pour la détermination de la formule hémoleucocytaire, dans quelques cas la détermination de la résistance globulaire, enfin l’étude spéciale du sérum consistant dans la recherche des précipitines.

Le sang, recueilli par piqûre du lobule de l'oreille, était étalé en frottis sur lames, soit par étalement direct, soit le plus souvent par le procédé « retro suivant la méthode préconisée par le Professeur Sabrazès.

La multiplicité de nos examens ne pouvait être possible qu’au moyen d’une technique de coloration rapide et permettant de différencier aisément les éléments leucocytaires.

La méthode de coloration du sang par le bleu de méthylène en solution aqueuse à 1/500 que le Professeur. Sabrazès a fait connaître depuis 1908 réunissait ces conditions. C’est grâce à son emploi que nous avons pu faire nos numérations leucocytaires sur un aussi grand nombre de frottis. Nous ne décrirons pas cette technique, qui a fait l’objet d'un certain nombre de notes et publications de la part de son auteur. La numération par millimètre cube des globules rouges et des globules blancs était faite avec l’hématimètre de Hayem, modifié par Nachet. L'appréciation du taux de l’hémoglobine, très approximative d’ailleurs, était faite au moyen de l'échelle colorimétrique de Talquist.

Perruchot 2

AO

La mesure de la résistance globulaire nous fut donnée par la méthode de Hamburger (immersion des globules rouges dans des solutions de concentration décroissante de chlorure de

sodium).

© Nous avons eu parfois quelques difficultés pour retirer du lobule de l'oreille chez l'enfant jeune une quantité normale de sang nous donnant suffisamment de sérum ; nous nous sommes servi dans ce cas du procédé de la ventouse de Bier, après une légère et anodine scarification. Les prises de sang ont été aussi multipliées que possible, avant l'injection de sérum, puis dans des délais assez rapprochés de cette injection, et en espaçant peu à peu au fur et à mesure que nous nous rapprochions de la convalescence et enfin au moment des accidents sériques.

Nous nous sommes efforcé de mettre chaque fois nos sujets dans les mêmes conditions physiologiques : les prélèvements étaient toujours effectués alors que nos petits malades élaient à jeun.

Les types leucocytaires que nous avons pu rencontrer au cours de nos examens de sang ont été décrits morphologiquement dans des travaux antérieurs ; répéter ici leur description serait à notre avis élargir démesurément le cadre de notre sujet. Nous voudrions cependant insister sur une forme leucocytaire que nous avons fréquemment rencontrée dans nos numérations et au sujet de laquelle de récentes communications ont attiré l'attention.

Ce sont des formes d’irritation, «véritables formes uninucléés, le plus souvent volumineuses (124. sur 15»), parfois plus pelites, possédant un noyau arrondi avec des blocs chromatiniens épais, tortueux, opaques ; leur protoplasma assez abondant, non granuleux, se colore en bleu très foncé par les colorants basiques, si bien que la structure du noyau peut être plus ou moins masquée, le cytoplasme est au moins aussi foncé que le noyau qui devient ainsi difficile à distinguer au milieu de la cellule » (Dupérié).

Pour rechercher l'existence des précipitines dans le sérum des enfants traités et présentant ou non des accidents sériques,

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après avoir recueilli aseptiquement le sérum nous avons employé Ja technique recommandée par H. Lemaire.

Nous avons mis en présence d’abord dans un premier petit tube stérilisé 5 gouttes de sérum antidiphtérique, puis 25 gouttes de sérum du malade: nous avions également deux tubes témoins, l’un contenant du sérum du malade seul, l’autre du Sérum antidiphtérique seul. Ces tubes étaient portés à l’éluve à 37° el, après une heure ou deux heures, nous observions les résultats. Dans quelques cas il y avait un précipité dans le tube -contenant le mélange des deux sérums ; dans tous les cäs les tubes témoins ne présentaient pas de précipité. Lorsque le précipité existait dans le premier tube nous pouvions conclure à l'existence de précipitines, c’est-à-dire d’anticorps précipitogènes provoqués par l'injection sérique.

Cette technique nous a paru remarquable par la constance et la régularité de ses résultats.