CHAPITRE XXXI

RÉACTIONS DE DÉFENSE DE L'ORGANISME CONTRE L'INFECTION TUBERCULEUSE (si/iYe).

ALEXINE ET SENSIBILISATRICES OU « ANTICORPS ». —

OPSONINES. -- CYTOLOGIE DES EXSUDATS OU ÉPANCHEMENTS

SÉRO-FIBRINEUX. — CYTO DIAGNOSTIC.

A. — ALEXINE ET SENSIBILISATRICES. — TITRAGE DE L*ALEXINE DANS LE SÉRUM DU SANG.

On sait que, parmi les substances de nature diastasique que renferment les sérums, il en est deux surtout qui jouent un rôle capital dans la défense de l'organisme contre les éléments infectieux : ce sont Valexine et les sensibilisatrices.

L'alexine, ainsi dénommée par Bûchner en 1892, — appelée cytase par METcnyiKOFF, complément (ou corps intermédiaire), par EnaLicH, — existe dans le protoplasma de diverses cellules de l'organisme et est surtout abondante dans les leucocytes polynucléaires qui la déversent dans le sérum après leur mort. Tous les sérums normaux en contiennent des quantités plus ou moins considérables. Elle est détruite par le chauffage à 55**, donc thermolabile. Elle est, par elle-même, incapable d'exercer aucune action de dissolution ou de digestion sur les éléments microbiens ou cellulaires étrangers, mais elle possède la propriété de se fixer sur ces éléments soit in vivo, soit in vitro, d'être absorbée par eux, comme par un phénomène de teinture (J. BORDET).

Les sensibilisatrices ou anticorps (auxquels Ehrlich a donné le nom d'ambocepteurs) sont excrétés dans les humeurs, principalement dans le sang, par les leucocytes et par d'autres cellules de divers organes (rate, ganglions lymphatiques, moelle osseuse). Ils se trouvent en petites quantités dans les sérums normaux et en beaucoup plus grande abondance dans les sérums de sujets vaccinés. Chez ces derniers ils présentent un caractère de spécificité tout à fait manifesle qui s'accuse davantage lorsque l'immunité est artificiellement conférée et renforcée.

Ils résistent au chauffage à 55° et ne sont détruits qu'au delà de 65° ; quelques-uns même supportent des températures encore plus élevées. Ils sont donc thermostabiles.

ALEXINË ET SENSIBILISATRICES. — OPSONINES. — CYTOLOGIE 371

Ces sensibilisatrices, comme l'alexine, n'exercent par elles-mêmes, isolément, aucune action sur les éléments microbiens ou cellulaires étrangers. Mais si elles sont mises en présence de Talexine, soit in vivo^ soit lorsque celle-ci a été préalablement Jixée in vitro (ou absorbée) par des microbes ou par des éléments cellulaires étrangers, elles rendent possible la digestion ou la dissolution de ces derniers. J. BoRDET interprète ce phénomène en disant que les sensibilisatrices opèrent une sorte de mordançage qui permet aux microbes ou aux cellules étrangères de fixer Valexine comme un tissu mordancé fixe une teinture. Les microbes et les cellules sensibilisés deviennent alors aptes à se laisser dissoudre par l'alexine ou digérer par les leucocytes.

Nous reviendrons plus loin {chap. XXXVII) sur Tétude des sensibilisatrices auxquelles on tend à attribuer actuellement des fonctions importantes dans la défense de l'organisme contre l'infection tuberculeuse. Voyons tout d'abord si l'alexine intervient de quelque manière dans cette défense-

II est facile de mesurer le pouvoir alexique d'un sérum en déterminant la quantité minima de ce sérum susceptible de dissoudre une quantité fixe d'hématies eu présence d'une dose convenable d'hémolysine sensibilisatrice (spécifique pour ces hématies). Pour effectuer cette mesure il suffit d*avoir à sa disposition :

i** Des hématies d'une espèce animale (mouton ou chèvre par exemple) autre que celle dont on étudie le sérum. Ces hématies, séparées par décantation de sang frais défibriné, doivent être préalablement lavées par plusieurs cenlrifuga lions successives avec de l'eau physiologique et mises en suspension dans un volume de cette eau physiologique correspondant à 20 fois le volume du sang initial d'où elles proviennent ;

2° Un sérum hémolylique préparé en inoculant 4 ou 5 fois, à 6 jours d'intervalle, un lapin par exemple, avec 2 ou 3 centimètres cubes d'émulsion d'hématies lavées de mouton ou de Chèvre. Six ou huit jours après] la dernière injection, le lapin peut être saigné et* son sérum est alors hémolytique pour les globules rouges de mouton ou de chèvre.

Ce sérum doit être inactivé (c'est-à-dire qu'on en détruit l'alexine) par une demi-heure de chauffage à 55". Il ne contient donc plus que la sensibilisatrice spécifique, qui, dans ce cas particuliei, est V hémolysine antimouton ou anlichèvre. L'expérience est alors conduite de la manière que voici :

Dans une série de 10 tubes à essai on introduit, au moyen d'une pipette graduée, i ce. d'émulsion au vingtième d'hématies lavées de mouton oîrde"chèvre, et ensuite une même dose d'un sérum hémolylique inactivé, dont on a préalablement établi par titrage le pouvoir

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hémolysant vis-à-vis des globules rouges de mouton ou de chèvre *.

Puis à chaque tube, sauf dans le premier qui restera comme témoÎD, on ajoutera des doses progressivement croissantes du sérum alexique à étudier, qu'on aura préalablement dilué au dixième dans l'eau salée physiologique (à 8 gr. 5 de NaCl par litre).

Le second tube recevra ainsi o ce. i de la dilution de sérum au dixième (correspondant à o ce. oi du sérum initial), le troisième o ce. 3, les autres respectivement o ce. 3, o ce. 4> o ce. 5, o ce. 6, oec. 7, o ce. 8, o ce. 9. On égalisera, enfin à 3 ce, par addition d'eau physiologique, le volume de liquide contenu dans tous les tubes, et on les portera à l'étuve à 37** pendant une demi-heure.

Si, après ce délai, l'observation montre que l'hémolyse est totale dans les tubes qui ont reçu o ce. o5 d alexine (o ce. 5 de la dilution) ou davantage, et qu'elle est incomplète ou nulle dans tous les autres, nulle aussi dans le témoin qui n'a pas reçu d'alexine, on en conclura que le

f pouvoir alexique du sérum étudié est de g-g> = SO unités.

Plusieurs expérimentateurs ont montré que la teneur des sérums en alexine varie suivant les espèces animales et suivant certaines conditions physiologiques (digestion, état de jeûne, âge, etc.) ou pathologiques. GoussEW 2 a pensé qu'on pourrait utiliser ces variations pour établir le pronostic de la tuberculose. Mais A. Jousset et ParajsxeeopouLOs 3 nient leur spécificité.

Dans mon laboratoire, M. Breton, L. Massol et Minet ^ ont tait porter à ce sujet leurs recherches sur une centaine de sérums de tuberculeux aux différentes périodes, en suivant les oscillations de l'alexine chez les mêmes malades. Ils ont constaté que le pouvoir alexique est plus élevé chez les fébrieitants que chez les apyrétîques, mais qu'il n'y avait aucun rapport entre la marche de la tuberculose, le stade de révolution et la teneur du sérum en alexine.

Il ne semble donc pas que le titrage de l'alexine contenue dans le sérum des tuberculeux puisse fournir d'indications utiles pour le diagnostic ou pour le pronostic de la tuberculose.

Mais nous allons voir que cette alexine intervient pour une pari importante dans les phénomènes de phagocytose in vilm, attribués par Wright à d'autres ferments hypothétiques auxquels il a donné le nom à*opsonines.

I. Si, pir oxomple,. o ce. 01 de ce séram est la quantilé minima capatbie d*béiBoljMi' en 3o minutes, à la température de 870, i ce. démulsion d'hématies en présenco d'une quantité fixe de sérum frais de coba^'e (soit o ce. 026 d'alexine diluée au quart dans l'eau salée physîdogiquc), on répartira dans chaque tube dix fait c«lto dose minima de sérum hémolj^tique, toit o ce. i.

a. Thèse Kazan, 1902.