Etuve de Hearsou pour l'étude des opsonines
ALEXINE ET SENSIBILISATRICES. - OPSONINES. - CYTOLOGIE 377
(tétine de Wright). On aspire, jusqu'à ce qu'elle affleure au trait de crayon bleu, une petite colonne d'émulsîon bacillaire. On laisse pénétrer une bulle d'air. On aspire une égale quantité d'émulsion de leucocytes et on ' " pénétrer une nouvelle bulle d'air. On aspire enfin une égale qu de sérum. {Fig. 26.)
Le tout es s refoulé sur une lame de verre et mélangé par une
série d'aspirations et de refoulements successifs et, la pipette étant tenue
La préparation, lavée et séchée, est portée enfin sous le microscope. On passe en revue loo leucocytes polynucléaires et on note au crayon le nombre de bacilles contenus dans chaque leucocyte, en inscrivant o pour chaque leucocyte qui n'a rien phagocyté. {Fig, 27,)
Si Témulsion bacillaire n'a pas été faite à une dilution convenable, la phagocytose est trop abondante ou ne Test pas assez, et c'est alors une cause d'erreurs dans la numération. Il faudra donc recommencer l'expérience en cherchant à obtenir une émulsion qui donne une moyenne de 2 à 4 bacilles phagocytés par leucocyte en présence d'un sérum de sujet normal.
Dans la numération, il ne faut pas tenir compte des amas de bacilles. On ne devra noter que les leucocytes bien distincts et bien colorés.
Certains polynucléaires renferment une grande quantité de bacilles qu'il est impossible de compter. Dans ce cas, Wuight et ses élèves ont adopté le chiffre 9 invariablement.
On établit le pouvoir opsonique ou quotient phagocytaire de chaque sérum en divisant par 100 le nombre de microbes comptés dans lOO polynucléaires, h* indice opsonique est ensuite déterminé en divisant le pouvoir opsonique d'un sérum pathologique, ou supposé tel, par celui d'un sérum témoin qu'on utilise dans toute la série des expériences.
Soit le sérum témoin T dont le pouvoir opsonique est, par exemple, déterminé ainsi :
3 00 bacilles
100 polynucléaires "~
et le sérum à étudier A et B. Si nous avons :
r» . . 1 A ioo bacilles ,
Pouvoir opsonique de A : -, yr- — = 4.
^ ^ . 100 polynucléaires
^ . . 1 11 100 bacilles
Pouvoir opsonique de B : -, rr—. — = i .
^ ^ 100 polynucléaires
Les indices opsoniques seront :
n , , , A Pouvoir opsonique de A 4
Pour le sérum de A : r; —^ ,—rr,=- - = 2,00.
rouvoir opsonique de 1 2
rt \ ' 1 r> Pouvoir opsonique de B \ ^
Pour le sérum de B : 75 ^~ r^ — -j— =.= z= o,o.
rouvoir opsonique de 1 2