I. Société de biologie, 9 avril 1910, p

LES « ANTiCORtS » TVBEHCLLELX 483

est environ deux fois plus grande que celle délernunée immédiatemenl (Calmette» L. Massol et V. Grysez).

Titrage de Calexine, — On fait une dilulion au centième du sérunade cobaye dans de l'eau salée physiologique k 8,5 de NaCl pour i.ooo. On introduit dans une série de petits tubes à essai o cc^ i, o ce. 2, o ce. 3, etc., jusqu'à i centimètre cube de celte alexine diluée (ou de pltks fortes doses si Ton fait usage d'alexine. vieille). On complète tous les tubes à 2 centimètres cubes avec de l'eau salée physiologique. On ajoute partout 20 doses minima hémolytiques de sérum hémolysant inactivé, puis, également dans chaque tube, une goutte d'én^ulsion d'hématies lavées (diluées à 5 p. 100 dans l'eau salée physiologique), et on complète le volume à S centimètres cubes, toujours arec de l'eau salée physiologique. On porte k Kétuve i heure à 57*.

La dose d'alexine restée libre (non lixée) est indiquée par le premier tube de la série où l'on constate l'hémolyse. Oa prendra une dose double de celle-ci comme dose minima dans les expériences de fixation.

Pour ne pas enrployer l'alexine sous un trop grand volume, on en fera \nie dilution telle que o ce. 1 contienne la dose minima. Avec l'alexine fraîche de cobaye, la dilution à effectuer varie en général de i p. 6 à ip. 10.

C. — PRÉPARATION DES SÉRUMS DESTINÉS A LA RECHERCHE ET AU TITRAGE DES ANTICORPS.

S'il s'agit d'effectuer la recherche des anticorps dans le sang d'un malade ou d'un sujet suspect de tuberculose, on pratiquera chez celui-ci soit une ponction veineuse à la seringue stérile, soit une prise de sang au moyen d'une ventouse scarifiée *. Dans tous les cas, i5 à 20 centimètres cubes de sang sont nécessaires pour en obtenir 5 à 8 ce. de sérum. Ce dernier sera séparé, soit par défitrination immédiate et centrifugation, soit par coagulation du caillot et décantation en 18 à 24 heures. On le recueillera dans des pipettes stériles qu'on scellera ensuite k la lampe et qu'on plongera pendant 3o minutes dans un bainmarie à 56** pour détruire l'alexine.

Le sérum ainsi préparé peut être conservé pendant plusieurs jours et même pendant des semaines à la glacière sans que sa teneur en anticorps soit modifiée.

Les sérums d'animaux tuberculeux ou suspects devront être recueillis dans les mêmes conditions et également privés de leur alexine par chauffage préalable k 56 ou 58' pendant une demi-heure.

Toutefois, lorsqu'il s'agit de rechercher et de doser les anticorps dans des sérums qui ne peuvent en contenir que de très minimes quan-

I. Mézis a fait construire ^ cet effet des ventouses spéciales munies d'un réser voir spEkérique pour recueilirr le sang el d'une tubulure pour faire le vide au roojcn d'une pompe à air ou d'un aspirateur Potaiîi, {Société de biologie, •) janv. 19 ir).

tités, par exemple chez les malades qui n'ont pas reçu d*injections de luberculine ou chez les petits animaux de laboratoire auxquels ou a injecté de faibles doses d*antigènes, il faut s'abstenir du chauffage préalable à 58** qui détruit toujours une proportion appréciable de sensibilisatrices. 11 est alors recommandable de conserver les échantillons de sérum à étudier pendant lo jours à la température du laboratoire, pourvu qu'ils restent absolument stériles. Dans ces conditions Talexine normale disparait presque en totalité et on peut ne pas tenir compte de celle qui persiste si l'on fait, pour les réactions de Cxation, des dilutions suffisamment étendues.

D. - CHOIX ET PRÉPARATION DES ANTIGÈNES. - MESURE DE LEUR VALEUR. — LEUR FIXITÉ ET LEUR SPÉCIFICITÉ RELATIVES.

On peut utiliser comme antigènes soit les bacilles tuberculeux, soit diverses substances qui en dérivent, par exemple la tuberculine ou les produits extractibles des corps microbiens ; mais les tissus, même riches en granulations tuberculeuses, et aussi les cires ou les graisses provenant des bacilles et débarrassées de corps microbiens, sont inutilisables (E. Grancher, h. Salin et G. Bricout S K. Bierbaum et G. Berdel *, M. BtiRGERet B. MôLLERS ^, bien que Hammers^ ait prétendu les employer avantageusement à Tétat d'extrait alcoolique ou acétonique.

Les qualités d'un antigène dépendent :

1*" De son aptitude à provoquer la formation delà plus grande quantité possible d'anticorps dans l'organisme vivant ;

2"" De son affinité pour les anticorps tuberculeux lorsqu'il se trouve mis m vitro en présence de ceux-ci et d'une quantité convenable d'alexine.

Aucun antigène ne semble posséder au maximum ces deux qualités h la fois.

K. MoMOSE ^ a utilisé comme antigène une tuberculine spéciale, qu'il appelle TAC, obtenue en traitant par la soude des bacilles préalablement dégraissés par le chloroforme. Il la prépare de la manière suivante :

Les bacilles provenant de cultures en bouillon âgés de 6 à 8 semaines sont lavés à l'eau physiologique, puis à l'eau distillée sur un Gltre, puis pressés entre deux doubles de papier buvard et pesés. On les broie soigneusement dans un mortier d'agate en y ajoutant d'abord goutte à goutte une solution de soude à lo p. loo et on étend avec la même solution dans la proportion de lo ce. pour i gr. de bacilles. On verse