CHAPITRE XVIII FÉCONDATION DE L'ŒUF SECONDAIRE

$ I. — Formation du pronucleus femelle polyénergide

Nous avons vu que, synchroniquement, tous les noyaux contenus dans l’œuf entrent, soit en mitose, soit en amitose, pour faire leur réduction chromatique. Parmi ces noyaux un seul provient de l’ovocyte privilégié qui a donné naissance à l’œuf, les autres sont formés par les noyaux les moins dégénérés des autres ovocytes qui se sont fusionnés avec l’ovocyte privilégié. La réduction chromatique opérée, la reconstitution de la chromatine des noyaux restés dans l’œuf s’opère, pour donner de nouveaux noyaux plus petits qui, au point de vue chromatique, ont valeur de demi-noyaux. Chacun de ces noyaux constitue un pronucléus femelle monoénergide, de dimensions égales, en moyenne, au pronucléus femelle représenté figure LIV. Il a environ 10 u de diamètre. Nous trouvons ainsi à ce stade, dans le même œuf, 10 à 12 pronucléi femelles monoénergides, soit isolés, soit appliqués par deux ou quelquefois par trois. Le centrosome resté dans l’œuf, après l’expulsion du deuxième globule polaire, persiste encore quelque temps, puis les radiations astériennes diminuent de longueur, son centriole devient minuscule et finalement l’ovocentre disparaît. On en voit (fig LIV) un certain nombre qui persistent encore, mais sont de taille minime.

D'autre part, si nous examinons l’œuf à un stade un peu plus avancé (fig. 58, pl. VI), nous ne trouvons plus que 2 ou 3 pronucléi femelles au maximum, mais généralement dont l’un est de taille beaucoup plus considérable. Nous avons vu que le pronucléus fémelle normal monoénergide avait un diamètre moyen de 10 u ; le pronucléus femelle représenté figure 58, planche VI, a 50 y de diamètre. Dans le même œuf se trouvent deux autres pronuelei dont l’un est le pronucléus femelle normal monoénergide, l’autre a 15 u de diamètre. Par quel processus ont pris naissance ces gros noyaux ? Si nous examinons la figure LIV, nous voyons, à la partie inférieure, les noyaux qui ont fait leur réduction par amitose, se montrer accolés deux à deux (fig. 51, 52, 56, 57, pl. VI). La cloison de séparation va disparaître et bientôt les deux noyaux n’en feront plus

FIG, LIV. Œuj secondaire mûr expulsé dans la cavité ombrellaire. De nombreux pronucléi femelles s'appliquant l’un contre l’autre pour se fusionner, En bas globule polaire expulsé par amitose, x 300.

qu'un seul. De même pour les noyaux centraux et les noyaux périphériques qui ont fait leur réduction chromatique par mitose. Seul. le pronucléus femelle provenant du noyau normal de l’œuf ne se fusionne pas.

TON PPT

Il est monoénergide. De la même façon, les pronucléi biénergides, provenant de la fusion de deux pronuclei monoénergides s’accolent l’un à l’autre et, par disparition de la cloison de séparation, donnent un pronucléus femelle tétraénergide. Le même phénomène peut se reproduire encore et c’est ainsi que nous avons ces gros pronucléi femelles polyénergides comme celui de la figure 58, planche VI. Toujours, on n’en trouve qu’un aussi volumineux dans l’œuf ; le plus souvent, on en trouve deux autres beaucoup plus petits. Le pronucléus femelle (fig. 58, pl. VI) présente encore dans plusieurs des coupes qui l’intéressent des fragments de cloisons de séparation, fixées à la partie interne de la membrane du noyau.

Le pronucléus femelle polyénergide, comme d’ailleurs le pronucléus femelle monoénergide, présente une structure qui permet de le différencier très facilement du pronucléus mâle. Sa membrane est toujours épaisse, bien délimitée et de couleur sombre. Extérieurement à elle une couche de cytoplasme mince, très dense, à grains très fins, se continuant immédiatement dans les travées des alvéoles. Pas de réseau plasmatique visible à l’intérieur du pronucléus. Celui-ci est rempli par une infinité de petits grains, d’une finesse extrême, présentant une coloration générale peu foncée. IL est à supposer que ces grains si ténus sont constitués par une grande partie de la chromatine pulvérisée du noyau, car les vrais grains chromatiques visibles sont peu nombreux dans le pronucléus femelle complètement formé et constituent une dizaine de sphérules arrondies ayant l’aspect de nucléoles à centre clair.

Le pronucléus femelle polyénergide est donc formé par la fusion d’un certain nombre (5, 6 ou plus) de pronucléi femelles monoénergides. Ce processus de formation doit être considéré comme une manifestation d’une loi très générale formulée par BRACHET (1910 a) : « Des noyaux ayant la valeur de pronuclei de sexe quelconque, plongés dans un cytoplasme commun, s’attirent mutuellement et s'unissent pour autant que leur attraction réciproque ne soit pas neutralisée par l’entrée en activité des centrosomes auxquels ils sont accolés ».

$ IT. — Formation du pronucleus mâle polyénergide

Le plus souvent, la fécondation de l’œuf mûr se produit par la pénétration d’un seul spermatozoïde qui se transforme en pronucléus mâle ; on dit qu’il y a monospermie. Il est admis, aujourd’hui, que la polyspermie peut se produire, mais seulement par suite d’une intervention expérimentale

ou encore grâce à des circonstances spéciales considérées comme anormales. La littérature scientifique nous apprend cependant que les gros œufs à vitellus abondant, comme les œufs d'insectes, de sélaciens, de batraciens, de reptiles ou d'oiseaux, présentent d’assez nombreuses exceptions à cette règle. Il y a alors polyspermie physiologique qui n’est jamais suivie de polyfécondation véritable.

On ne comprendrait pas, en effet, que plusieurs spermatozoïdes ayant pénétré et se transformant en plusieurs pronucléi mâles monoénergides ou en un seul pronucléus mâle polyénergide s’unissent à un seul pronucléus femelle monoénergide. Un seul spermatozoïde, parmi tous ceux qui ont pénétré, va accomplir tous les actes de la fécondation ; tous les autres seront réduits à jouer un rôle tout à fait secondaire et quelquefois nul. Ainsi, l'embryon qui se développe aux dépens de cette fécondation sera toujours monospermique, toutes les cellules qui le composent provenant de l’œuf fécondé qui résulte de la réunion du pronucléus mâle et du pronucléus femelle, tous les deux monoénergides. Il est aujourd’hui admis que la monospermie est une condition absolument indispensable pour que l’œuf fécondé puisse se développer et donner un animal adulte. Nous tâcherons de démontrer que chez T. mesembryanthemum la polyspermie est normale puisqu'elle se produit aussi souvent que la monospermie et que l’œuf polyspermique a un développement qui se poursuit normalement, jusqu’au moment où il est matériellement possible de l’observer, c’est-à-dire jusqu’au stade actinula, stade pendant lequel la larve mise en liberté n’a plus qu’à se fixer pour devenir petit polype.

Chez les poissons cartilagineux, RUOKERT (1910) a parfaitement établi que certains des mérocytes (noyaux bourgeonnants dans la couche digestive de transition, entre le disque embryonnaire et la masse de vitellus) ne sont pas autre chose que des têtes de spermatozoïdes accessoires pénétrées qui se sont vacuolisées.

Nicoras (1903) a montré qu’il en est de même chez les reptiles, mais on n’est pas du tout fixé sur la destinée finale des mérocytes. Il en serait d’ailleurs de même chez les oiseaux. D’après ce qui précède, la polyspermie des œufs à gros vitellus n’influerait en rien sur la fécondation et le développement de l'embryon.

BRACHET (1910) et HERLANT (1911) ont fait, chez les Batraciens anoures, des expériences de polyspermie très démonstratives. Lorsqu’on fait pénétrer quelques spermatozoïdes séparés dans l’hémisphère supérieur d’un œuf de batracien, chaque spermatozoïde se transforme en

pronucléus mâle, son centrosome formant un énergide distincte, des énergides voisines. Le spermatozoïde, qui a pénétré au voisinage du point d'expulsion des globules polaires, devient pronucléus qui copule avec le pronucléus femelle. Tous les autres restent à l’état de pronucléi mâles, répartis dans tout le cytoplasme de l’œuf, comparables aux fragments d'œufs mérogoniques sans noyaux. À ce stade tous les pronucléi de l’œut polyspermique entrent synchroniquement en mitose normale et la segmentation cytoplasmique suivant immédiatement après la mitose, l’œuf se divise en autant de blastomères qu’il y a de spermatozoïdes qui ont pénétré. La mort survient avant la métamorphose et d'autant plus vite que la polyspermie a été plus accentuée.

$ III. — La polyspermie chez T. Mesembryanthemum

Ainsi donc, d’après les explications qui précèdent, on comprend très bien que dans l’œuf normal possédant un seul noyau qui, après maturation se transforme en pronucléus femelle ayant valeur chromatique de deminoyau, la monospermie seule puisse assurer la fécondation de cet œuf, par apport d’un pronucléus mâle ayant valeur de demi-noyau, et son développement complet.

Mais si nous considérons l’œuf mûr de 7. mesembryanthemum, nous avons vu que dans son cytoplasme il présentait plusieurs pronucléi de valeur différente, le plus souvent un de ces pronucléi étant monoénergide, les autres polyénergides. Il est donc possible de concevoir la polyspermie d’une façon toute différente de celle des batraciens anoures, ou de celle des sélaciens, reptiles et oiseaux. Il semble, en effet, qu’à la présence dans le cytoplasme de l’œuf de pronucléi femelles de valeur différente, doivent correspondre la pénétration dans ce même œuf de nombreux spermatozoïdes se groupant en pronucléi de valeur égale aux pronucléi femelles, pour produire une polyfécondation. D'ailleurs, il est à considérer que dans l’œuf de la T'ubulaire, il n’existe pas de vitellus et que toute la masse de l’œuf est formée par le cytoplasme. C’est ce que nous allons

essayer de démontrer. $ IV. — Recherches personnelles Nous savons que le gonophore mâle mûr met ses spermatozoïdes en

liberté, par rupture de l’épithélium sous-ombrellaire. Ces spermatozoïdes remplissent la cavité de l’ombrelle, puis passent à l'extérieur par l’ouver-

266 PAUL BENCIT

ture du gonophore. Ils arrivent ainsi à l’ouverture du gonophore femelle, passent entre la paroi de cette ouverture et le manubrium et arrivent dans la cavité de la cloche, au moment où l’œuf venant de faire sa réduction chromatique a crevé l’épithélium sous-ombrellaire et est tombé dans cette cavité. Il peut, comme nous l’avons vu, pénétrer un seul spermatozoïde et la pénétration peut se faire en un point quelconque. L’œuf est alors monospermique et l’évolution se poursuit, comme nous l'avons

Fra. LV. Seize spermatozoïdes ont pénétré dans l’œuf, mais aucun n'a fait sa réaction. X 540

déjà indiqué. Souvent un certain nombre de spermatozoïdes pénètrent dans l’œuf isolément, en différents points ; mais en un certain point, 4 à 6 spermatozoïdes ou plus pénètrent à la suite l’un de l’autre. Le premier spermatozoïde qui pénètre détermine-t-il, comme dans le cas général, l’onde de contraction qui se propage, à partir du point d’entrée et détermine la formation du liquide périvitellin, visqueux ou agglutinant, qui retarde ou arrête les autres spermatozoïdes ? Il est probable que non, car aucune formation de cette nature n’apparaît, à aucun moment, autour de l’œuf dans lequel les spermatozoïdes viennent de pénétrer. La taille considérable de l’œuf de la Tubulaire et le grand nombre de spermatozoïdes qui

PC De

attendent avec impatience sa libération dans la cavité de la cloche sont deux conditions qui permettent à la polyspermie de se réaliser, grâce à la lenteur de propagation de l’onde de contraction et à l’éloignement de la première énergide spermatique.

Le premier spermatozoïde qui pénètre est ordinairement celui qui est voisin de l'endroit où vient de se produire l'expulsion du globule polaire

Fic. LVI. Œuf mûr entouré de spermatozoïdes (spz) ; un de ceux-ci vient de pénétrer, 4 autres sont déjà transformés en pronuclei mâles (pm). X 540,

du noyau normal et par conséquent où se trouve le pronucléus femelle monoénergide. La tête et le segment intermédiaire pénètrent seuls, la queue reste à l'extérieur. La réaction ne se produit pas instantanément et on peut apercevoir dans la zone périphérique de l’œuf la tête piriforme très chromatique. Bientôt, le cytoplasme se condense autour de lui, l’englobant dans une zone épaissie à granulations très fines et très basophiles (fig. 59, pl. VI). Le segment intermédiaire montre un centriole chromatique et une centrosphère nettement limitée, de laquelle part

un aster spermatique, formé de nombreux rayons à structure moniliforme, les derniers granules venant se continuer insensiblement dans les fines travées du cytoplasme ambiant. La pénétration du spermatozoïde a lieu suivant une direction radiale, puis la tête opère un mouvement de rotation de 1809, de façon que le segment intermédiaire, d’abord tourné vers l'extérieur se trouve à la fin de la rotation regarder le centre de l’œuf. A partir de ce stade, la tête du spermatozoïde devient absolument méconnaissable, elle augmente considérablement de volume en se vacuolisant ; la chromatine se résout en grains nombreux qui se dispersent dans le noyau ; la coloration devient aussi beaucoup moins intense. Il apparaît, en même temps, un fin réseau plasmatique dont les mailles renferment un suc nucléaire incolore. Le pronucléus mâle monoénergide est ainsi formé.

Si le spermatozoïde qui donne le pronucléus mâle monoénergide pénètre toujours dans l’œuf au voisinage du point d'émission du globule polaire du noyau de l’œuf normal, c’est-à-dire à la face convexe de l’œuf, les spermatozoïdes qui vont donner le pronucléus mâle polyénergide pénètrent presque toujours par la face concave, c’est-à-dire la face interne de l’œuf qui coiffe le spadice. Il peut ainsi pénétrer, en des points peu éloignés, une quinzaine de spermatozoïdes (fig. LV), dont la queue reste à l’extérieur et qu’on reconnaît encore, quelque temps, à la forme de la tête. Il sont enfermés par groupes dans les mailles du réseau cytoplasmique sans aucune trace de cytoplasme germinatif autour d’eux, ce qui indique qu’ils n’ont encore produit aucune réaction. A l’inverse de ce qui se passe dans le spermatozoïde isolé dont le centrosome se montre dès le début de sa réaction, avant que la tête du spermatozoïde se modifie ici, toutes les têtes de spermatozoïdes se vacuolisent d’abord et augmentent considérablement de volume. Elles prennent immédiatement l’aspect de pronucléi (fig. LVi) ; le bloc de chromatine homogène qui constituait la tête du spermatozoïde se fragmente en un nombre considérable de grains très basophiles qui s’éparpillent dans le pronucléus, pendant qu’apparaît un réseau plasmatique, à filaments très fins et excessivement nombreux qui s’enchevêtrent profondément. Les centrioles, les centrosphères et les rayons astériens n’ont pas encore apparu. On voit alors les pronucléi les plus rapprochés s’appliquer l’un contre l’autre, d’une façon tout à fait intime. Il se forme un ou deux faisceaux de pronueléi composés : l’un de six pronucléi simples, l’autre de deux ou trois. Ces faiseaux prennent la forme d’une sphère dans laquelle chaque pronucléus est délimité exté-

rieurement pendant un temps considérable par sa membrane extérieure de séparation. Ce n’est qu’à ce moment qu’apparaissent les irradiations astériennes. Très rarement, on peut voir un centriole avec sa centrosphère (fig. 65, pl. VIT). Le plus souvent, à la partie externe du faisceau sphérique de pronucléi, l’on voit un certain nombre d’asters symétriquement disposés. Il est facile de se rendre compte que le nombre d’asters correspond exactement au nombre de pronucléi, c’est-à-dire au nombre de spermatozoïdes qui entrent dans la formation de ce polykaryon.

Chaque aster du polykaryon correspond done à l’appareil centrosomien du spermatozoïde. À ce stade le polykaryon présente une structure tout à fait particulière qu’on ne retrouve nulle part. Celui représenté par les figures 60 à 63, planche VII, qui ne sont que les coupes successives, a la forme d’une sphère de 50 y de diamètre. Il à été formé par la vacuolisation et l’accolement de 6 spermatozoïdes puisqu'il y a 6 asters différents extérieurement. Ces asters sont très puissants et leurs rayons s2 prolongent, non seulement extérieurement, dans les travées cytoplasmiques, mais aussi intérieurement, ayant l’air de se continuer par les filaments plasmatiques. Extérieurement et intérieurement les membranes de séparation entre les divers pronucléi constituants sont encore très nettes et leur disparition est à peine ébauchée en certains endroits. Dans chaque pronucléus le réseau plasmatique se présente, sous forme de filaments d'une grande ténuité et d’un nombre incalculable, présentant des sinuosités qui s’entre-croisent à l’infini. La chromatine, en granules très fins placés bout à bout sur les filaments plasmatiques, forme des sinuosités plus sombres très caractéristiques, tranchant nettement sur les précédentes. On rencontre encore (fig. 60 pl. VIT), quelques blocs chromatiques non encore complètement réduits en fins granules, ainsi que quelques sinuosités, non formées de grains chromatiques placés bout à bout, mais à chromatine massive (fig. 61, 63, pl. VIT). Le suc nucléaire présente une coloration plus basophile qu’à l’ordinaire, par suite de la pulvérisation d’une partie de la chromatine des pronuelei. Finalement, les membranes qui séparent les divers pronuclei constituant le faisceau s’effacent et disparaissent progressivement. Dès lors, le pronucléus mâle polyénergide est complètement formé.

BracxeT (1910) à pu observer, dans la polyspermie expérimentale de la grenouille, la formation de polykaryons ou pronculéus mâles polyénergides, mais sans que ceux-ci prennent part à la fécondation, la polyfécondation n’existant jamais, et la monospermie étant toujours la règle.

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Il voit pénétrer dans l’œuf de la grenouille plus de 100 spermatozoïdes qui se dispersent, rapprochés le plus souvent par groupes de 2 ou 3. Chacun d’eux se vacuolise et devient ainsi pronucléus, sans que son aster apparaisse ; puis, dans chaque groupe, les pronucléi qui le composent se rapprochent et finissent par se toucher, les membranes de séparation disparaissent et la fusion devient complète, donnant ainsi naissance à un pronucléus mâle polyénergide. Ce n’est que lorsque la fusion est achevée que les asters apparaissent accolés à la partie extérieure des polykaryons, s’enchevêtrant de façon inextricable et en nombre égal à celui des spermatozoïdes qui se sont fusionnés. Dans ce cas particulier, BRACHET n’a pas vu se produire de développement. Il a assisté seulement à l’ébauche de quelques mitoses multipolaires, mais finalement c’est toujours la nécrose qui s’est produite.

C’est grâce à cet ensemble de faits si démonstratifs que BRACHET a pu énoncer sa loi très générale sur la fusion des pronucléi, loi que nous avons déjà citée, à propos de la formation du pronucléus femelle polyénergide.

Ainsi, chez la grenouille, BRACHET à pu avoir par polyspermie expérimentale le pronucléus mâle monoénergide actif dans la fécondation et le pronucléus mâle polyyénergide passif pendant la fécondation, très probablement parce qu’il n’y à pas dans l’œuf mûr de pronucléus femelle polyénergide avec lequel il puisse copuler. Ce fait est très important parce qu’il marque une étape entre la polyspermie expérimentale de la grenouille et la polyspermie normale de la Tubulaire. Si l’œuf de la grenouille avait plusieurs pronucléi femelles, il est permis de supposer que la fécondation pourrait se produire sans toutefois prétendre que le développement pourrait être poussé plus loin, la différenciation ontogénétique ne le permettant pas.

$ V. — Copulation des pronuclei mâles et femelles polyénergides

Tous les dessins de la planche VITT représentent les coupes impaires successives, de l’amphimixie de deux polykaryons mâles et femelles. Le dessin des coupes paires n’a pas été représenté pour réduire au minimum le nombre de planches. Cette amphimixie est d’ailleurs la seule polyénergide, que l’on rencontre dans cet œuf. Avant même que les membranes de séparation des pronucléi qui forment le polykaryon mâle et je polykaryon femelle aient complètement disparu, ces deux polykaryons

se rapprochent jusqu’au contact. On y remarque, en effet (fig. 70, 71, 72 73, pl. VIIT), pour le polykaryon femelle des traces de cloisons non encore disparues, contre la membrane externe ; pour le polykaryon mâle (fig. 68, 69, 70, pl. VIIT). L’attraction de ces deux polykaryons est assez forte pour produire l’aplatissement des deux surfaces de contact. À ce stade, les ovocentres du polykaryon femelle ont disparu depuis longtemps, tandis que le polykaryon mâle est entouré par les spermocentres en nombre égal aux pronucléi mâles, groupés et fusionnés pour le former. Je pense, sans toutefois pouvoir apporter une preuve suffisante, que le nombre de pronucléi ayant servi à former les deux pronucléi qui vont copuler est le même, c’est-à-dire que si le polykaryon mâle à été formé en définitive par le rapprochement et la fusion de 6 spermatozoïdes, le polykaryon femelle aura été formé par la fusion de 6 pronucléi femelles monoénergides. D'ailleurs, dès que les deux polykaryons sont entrés en contact, les spermocentres se divisent et tandis qu’un des spermocentres fils reste accolé au polykaryon mâle, l’autre va se fixer à la surface du polykaryon femelle, à l'extrémité opposée. Ces spermocentres sont très bien développés. Le plus souvent, on peut apercevoir au centre de l’aster un centriole chromatique ; la centrosphère est toujours mal délimitée mais les rayons sont puissants et nombreux du côté externe. Du côté interne, ils s’enfoncent dans le polykaryon mâle, repoussant même sa surface qui présente ainsi des incisures profondes (fig. 70, pl. VIIT). Si l’on compte les asters représentés par toutes les coupes de l’amphimixie, on en trouve 12. Nous pouvons en déduire qu’ils proviennent de 6 spermocentres divisés et que, par conséquent, le polykaryon mâle à été formé par la fusion de 6 pronucléi mâles, provenant de 6 spermatozoïdes. De même, nous pouvons être certains que le polykaryon femelle à été formé, par la fusion de 6 pronucléi femelles provenant, dans le cas présent, de la fusion de 6 pseudocellules, ayant fait aussi leur réduction chromatique. La structure de ces deux polykaryons accolés est complètement différente. Le polykaryon femelle est un peu plus grand que le polykaryon mâle. En effet, tandis que le polykaryon mâle a 40 u de diamètre, le polykaryon femelle à 60 u. Mais ce qui frappe immédiatement, c’est la chromaticitée générale très grande du polykaryon mâle. Celui-ci paraît contenir beaucoup plus de chromatine que le polykaryon femelle. Son réseau plasmatique très développé est formé d’un lacis de filaments sinueux, portant de nombreux granules chromatiques placés bout à bout. On n’y trouve que quelques blocs plus gros, quelquefois allongés. Le polykaryon femelle ne

présente pas de réseau plasmatique visible ; il se montre, avec une structure granuleuse, d’une finesse inouïe. Vers son centre, on trouve seulement un gros nucléole chromatique homogène et 4 ou 5 petits nucléoles de taille différente, mais plus petits et c’est tout. Il est probable qu’une grande partie de la chromatine s’est pulvérisée en grains excessivement fins, qui sont les petits grains colorés qui constituent, en partie, les granulations multiples du polykaryon femelle.

Autour des deux polykaryons se trouve une calotte de cytoplasme germinatif très condensé, renfermant, lui aussi, des grains très basophiles. Il est probable qu’il se produit, à travers la membrane des deux polykaryons, une diffusion qui rejette, dans le cytoplasme une partie des granulations chromatiques, occasionnant ainsi une espèce d'épuration nucléaire. L’excès de coloration de la calotte cytoplasmique germinative, qui entoure le polykaryon femelle et se continue insensiblement dans les travées du cytoplasme, autorise cette supposition.

La figure LVir représente la coupe d’un gonophore contenant deux œufs secondaires, à des stades très rapprochés, provenant d’un œuf géant. Ces deux œufs sont polyspermiques et il y a eu polyfécondation. Au centre de l’œuf entier, il y a eu plusieurs fécondations représentées en détail par les coupes de la planche IX (les coupes impaires seulement, les coupes paires n’ayant pas été dessinées). À la périphérie, du côté extérieur de l’œuf, nous trouvons encore trois fécondations dont une, à cause de ses dimensions minimes, paraît être monospermique. Enfin, dans ce même œuf, à la périphérie du côté central, nous reconnaissons trois spermatozoïdes qui ont pénétré séparément, se sont fortement vacuolisés, ont formé un aster puissant, ce sont trois pronucléi mâles monoénergides, qui ne seront pas utilisés et probablement dégénèreront au bout d’un certain temps.

Si nous examinons de près les coupes de la planche IX qui représentent la partie centrale de l’œuf (fig. LVIT) nous reconnaissons dans les figures 74, 75, 76, 77, un polykaryon mâle et un polykaryon femelle qui vont s'appliquer l’un contre l’autre, mais sont encore bien séparés, ne présentant aucune face aplatie de contact. On distingue encore, dans le polyka.ryon femelle, quelques lambeaux de cloisons de séparation appliqués à la face interne de la membrane, ou même une cloison entière (fig. 77). Mais dans la figure 77 apparaissent un monokaryon et un polykaryon mâles, non fusionnés avec le précédent. Il est probable que le gros polykaryon mâle copulera seul avec le polykaryon femelle parce qu’ils ont été

OVOGÉNÈSE cHEZz LA MYRIOTHÈLE ET LA TUBULAIRE 273

ations et des spermatozoïdes transformés en pronuclei re mitose de segmentation multipolaire ; une autre

pic. LV. Œuf secondaire entier renfermant plusieurs fécond mâies. L'œuf secondaïre incomplet montre une re mitose multipolaire de segmentation est dans la partie coupée absente. X

formés par la fusion du même nombre de pronucléi mâles ou femelles. Si tous les pronucléi mâles voisins avaient fusionné ensemble, le polykaryon mâle unique formé aurait eu une valeur chromatique supérieure à celle du polykaryon femelle, d’où disharmonie entre les deux polykaryons et la fécondation n’aurait certainement pu avoir lieu. Les figurés 78, 79, 80, 81, 82 représentent une deuxième fécondation (les coupes impaires seules ont été représentées) qui fait immédiatement suite à la précédente Ici le polykaryon femelle a opéré sa fusion presque entièrement, mais le polykaryon mâle n’est pas formé. Les spermatozoïdes se sont vacuolisés pour former des pronucléi sans aster développé ; ces pronucléi se sont rapprochés et leur fusion n’a pas encore eu lieu, cependant plusieurs pronucléi semblent avoir fusionné entre eux (fig. 80, pl. IX). Il est probable qu’il se formera ici aussi un polykaryon de même valeur chromatique que le polykaryon femelle, de façon qu’il y ait harmonie entre les deux polykaryons et qu’ainsi la fécondation soit possible. S'il reste ensuite des pronucléi mâles en excès, ils dégénèreront.

Au stade suivant, la fécondation va s’opérer par pénétration du polykaryon mâle, dans l’intérieur du polykaryon femelle et, dans un même œuf, il pourra y avoir polyfécondation. Par exemple, les polykaryons mâles et femelles de la planche VIIT étant les seuls polyénergides, il y aura fécondation unique polyénergide tandis que dans l’œuf représenté figure Lvir il y aura polyfécondation polyénergide.

Examinons une des trois fécondations, placées à la face externe de l'œuf figure Lvir. On voit le pronucléus mâle envoyer sa chromatine à l’intérieur du pronucléus femelle, sous forme de filaments dendritiques, qui gagnent d’abord la partie centrale, puis se distribuent insensiblement vers la périphérie, laissant entre eux et la membrane du pronucléus femelle un espace clair. La fécondation terminée, le pronucléus mâle paraît s’être introduit tout entier dans le pronucléus femelle, car le réseau plasmatique et la chromatine ont conservé la même structure. Nous avons ainsi un premier noyau de segmentation représenté figure Lvir dans la moitié de l’œuf coupé. L'autre moitié de cet œuf nous montrerait une autre fécondation monospermique avec fuseau bipolaire.

Lorsque la pénétration du pronucléus femelle par le pronucléus mâle est finie, le noyau de conjugaison est évidemment de volume plus réduit que la somme des volumes du pronueléus mâle et du pronucléus femelle. Il a le volume du pronucléus femelle ; il est à supposer qu’une certaine quantité de suc nucléaire du pronucléus femelle passe par osmose à

OVOGÉNÈSE CHEZ LA MYRIOTHÈLE ET LA TJUBULAIRE 9278

travers la membrane et va dans le cytoplasme. Les asters qui entouraient le pronucléus mâle se rapprochent de la surface du noyau de conjugaison et deviendront les asters des mitoses multipolaires qui vont avoir lieu.

Dans chaque œuf secondaire il y aura done le plus souvent : 1° un noyau de conjugaison provenant d’une fécondation monospermique du noyau primitif de l’œuf ; ce noyau de conjugaison aura un fuseau bipolaire et une mitose normale ; 20 un ou plusieurs noyaux de conjugaison, provenant de polykaryons mâles et femelles ; ces noyaux de conjugaison auront des fuseaux multipolaires, avec mitoses multipolaires.

$ VI. — Historique et Critique

La polyspermie a été signalée par différents observateurs, chez T. mesembryanthemum.

TICHOMIROFF (1887) dit, sans y insister, avoir observé des œufs polyspermiques de 7. mesembryanthemum.

BRAUER (A.) (1891) signale comme phénomènes anormaux, d’abord l'apparition de deux vésicules germinatives, dans un œuf qu’il a observé une fois, enfin, quelques cas de polyspermie, chez la même T'ubulaire. Ces œufs polyspermiques présentent beaucoup d’irradiations, au milieu desquelles BRAUER à vu un grain chromatique, représentant probablement le spermatozoïde non modifié ; cependant, dans la plupart des cas, il n’en trouve pas de trace. Ces œufs polyspermiques se distinguaient des autres œufs monospermiques, parce que, sur leur côté extérieur, il s’était amassé une quantité considérable de spermatozoïdes. Enfin dans quelques cas particuliers, BRAUER a rencontré aussi, dans des œufs en segmentation, à côté du noyau, de petites irradiations qu’il attribue à la présence de spermatozoïdes en surnombre.

D’après SCHNEIDER (K.) (1902), lorsque l’œuf müûür est tombé dans la cavité de l’ombrelle, une ou plusieurs spermies, que l’on trouve en quantité considérable à cet endroit pénètrent dans l’œuf. Le plus souvent, dit-il, il paraît se former beaucoup de rayonnements, dans le cytoplasme, mais la tête du spermatozoïde se développe en pronucléus mâle dans un seul rayonnement, pronucléus mâle d’abord étroit et en forme de quille.

OSCHMANN (1923) voit quelquefois plusieurs spermatozoïdes pénétrer dans l’œuf de T. mesembryanthemum et former plusieurs synkaryons,

suivant le procédé que nous avons décrit. Il voit même cette fécondation se produire lorsque l’œuf s’est déjà segmenté en plusieurs blastomères ; quelquefois, les blastomères se séparent complètement, ceci constituant, d’après lui, une fécondation multiple. Enfin, l'embryon englobe souvent

des spermatozoïdes, qui sont digérés.