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Les hydrolyses chimiques ont l’avantage de donner des amino-acides presque purs et pratiquement pas de peptides et la digestion est beaucoup plus poussée qu'avec les ferments.
Procédés enzymatiques.
Ces derniers ont le grand intérêt de ne pas détruire certains des amino-acides de la protéine. Les ferments utilisés sont la Papaine et surtout le Trypsine.
Madden a préparé un hydrolysat en soumettant de la caséine à l’action de la Papaine en milieu acide et à une température d’environ 40° C.
D’après Clowes ce produit contiendrait des substances azotées n'ayant pas atteint le stade ultime d’acide aminé, ieur poids moléculaire étant d'environ 500.
Beattie et ses élèves ont montré qu’il était possible de parfaire la digestion d’un tel produit en le soumettant après la Papaine à l’action de la Trypsine.
En 1942, Cox est arrivé à obtenir des hydrolysats comparables à partir de la Lactalbumine ou des protéines du sérum de bœuf. Mais en pratique, il faut retenir surtout les hydrolysats de caséine obtenus par action d’extrait frais äe pancréas de porc.
Le premier a été réalisé par Mueller en 1940. Il soumettait de la caséine préalablement lavée à l’action d’un extrait de pancréas frais de porc ou à l’action directe de fragments finement divisés de pancréas de porc et ceci à température constante et à l’abri de la contamination bactérienne. Il dosait la teneur en amino-acides et arrêtait la digestion lorsque le taux d’amino-acides cessait d’augmenter. L’hydrolysat est ensuite filtré, décoloré au charbon concentré et finalement desséché par pulvérisation en couche mince. Le produit terminal est essayé chez des animaux qui le reçoivent comme seule source de protéine et on observe l’augmentation de poids.
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Des études d’anaphylaxie sont faites sur des animaux qui reçoivent pendant deux ou trois semaines des injections préparatoires, celles-ci sont intraveineuses chez les lapins, sous-cutanées chez le cobaye. Des injections intraveineuses déchaïnantes ne donnnent aucun choc anaphylaetique ce qui prouve l’absence de protéines ou de protéoses.
Le produit est également incapable de provoquer des réactions d'allergie chez les animaux préalablement sensibilisés au lait écrémé ou aux extraits de pancréas de porc. Il s’agit donc d’un produit non anaphylactogène.
Enfin il est injecté en quantité importante aux chiens aussi bien anesthésiés que non et il ne produit aucun ettet anormal sur la pression sanguine, la respiration ou la température. | DAPFRHELAEGARS LA
L’'Hydrolysat est ainsi préparé en Amérique sous le nom d’Amigen par Mead Johnson and Co, et en Angleterre par Herts Pharmacentical Ltd sous le nom de Pronutrin. fl s’agit d’une poudre fine, couleur crême pâle facilement soluble dans l’eau avec laquelle elle donne une solution jaune.
Le pH d’une solution à 5 % est d'environ 5,5 à 5,8.
L'analyse chimique montre qu’il existe environ 12 % d'azote total, 55 à 60 % de cet azote s’y trouve sous forme d’amino-acides, les autres 40 à 45 % étant constitués par des polypeptides de faible poids moléculaire. Il n’y a pas de réaction chimique des protéines.
La composition saline est la suivante :
Chlore Jun Hs ee Em en Ar 2 %
SOditDE +... JE eIRRHON 15 % PhOSDHOrEUENE APE AMOLT 0,9 % SOIÉTE ue ce + ee IMÉIOUTNE 0,657 Potassium -: : .. .... 3062 ae 0,3 % Calc. LE MONS IdTIooC st 0,1 %
Magnésium .....:.u2ex 4 0,05 %
1 litre d’une solution à 5 % contient environ 2 grs de chlorure de sodium. -
En Suède, en 1944, Wretlind et Jorpes mirent au point un hydrolysat enzymatique spécialisé sous le nom d’Aminosol. La caséine est digérée, la solution est alors dialysée par une méthode suggerée par Wretlind. La caséine est purifiée par précipitation isoélectrique et décomposée par l'alcool bouilli; sels, matières grasses et vitamines sont éliminés. L’hydrolyse à 37° se fait avec du pancréas séché à l’acétone ou de l'extrait glycérolé de pancréas de porc. Dans une partie de la solution on a les amino-acides purs et les peptides à faible poids moléculaire.
Il fallait en outre éviter la croissance de bactéries, car la solution ainsi contaminée donne des réactions fébriles méême si secondairement elle est stérilisée, filtrée ou dialysée. L’adjonction de sulfamides ne suffit même pas.
L'analyse chimique montre qu'il existe 85 % d’acides aminés libres. Une solution à 2,5 % est isotonique et a un pH entre 7 et 7,5.
= Le lapin peut recevoir 1/2 litre d’une solution à 3.3 % en 1 heure 1/2 sans aucun inconvénient. De multiples injections intra-veineuses ont été faites à l’homme sans aucune réaction fébrile.
Telles sont les deux ordres de préparations commercialisées.
PHARMACOLOGIE
Outre l’innocuité des produits il faut étudier la valeur alimentaire des hydrolysats.
Trois épreuves sont proposées pour mesurer la qualité d’une protéine thérapeutique :
1° l’index de bilan azoté:
2° la capacité de régénération du plasma sanguin;
3° le pouvoir de croissance.
er L'index de bilan azoté.
C’est la mesure de la fraction de protéine retenue dans le corps de l’animal. Un hydrolysat avec un index élevé peut équilibrer la balance azotée avec une quantité journalière basse.
La régénération du plasma sanguin
Le taux des protéines du piasma est un indice de l’état de nutriuon en proteines. La perte en proteines tissulaires est accompagne en principe a une chute des protéines au piasma. Beaucoup de maladies s'accompagnent aussi d’hypoprotéinèemie par suite de la destruction croissante des protéines tissulaires et l’impossibilité d'utilisation et l’absorption des protéines alimentaires. Mais bien souvent l’hypoprotéinémie est masquée par la deshydratation; en fait, c’est le capital en protéines du corps qui diminue. Dans ce cas là, c’est la quantité totale en circulation qu’il convient d'étudier et non pas la concentration du plasma.
Les hydrolysats facilement assimilables, outre les besoins azotés qu’ils doivent couvrir, ont la propriété de régénérer les protéines du plasma. En effet, lorsque l’organisme a besoin de protéines nouvelles, l’hémoglobine et les protéines plasmatiques sont les premières resynthétisées à partir des amino-acides. Expérimentalement, on produit une hypoprotéinémie chez les animaux de laboratoires par * saignées répétées. On leur administre les hydrolysats et la rapidité de la régénération des protéines plasmatiques est considérée comme une indication de la valeur nutritive de l’hydrolysat.
Le pouvoir de croissance.
Le pouvoir de croissance mesuré chez les animaux est
Li 50.
basée sur le rapport entre le gain de poids et la consommation en protéines. Si ce point est particulièrement intéressant lors de l’utilisation des hydrolysats dé protéines en pédiätrie, de même en thérapeutique de l’adulte ce pouvoir de croissance est une importante mesure de la qualité nutritive.