CHAPITRE II

Ainsi que nous avons déjà eu l'occasion de le dire, la caféine se trouve dans le café,combinée en majeure partieavec l'acide cafétannique. Or, comme nos recherches nous ont permis de le constater, les réactions microchimiques de l’une sont souvent analogues et parfois identiques aux réactions de l’autre. Il était donc nécessaire de les étudier séparément, et tout d’abord, in vitro, de trouver des caractères distinctifs pour l’un et l’autre de ces corps, afin de pouvoir révéler, d’une façon nette et certaine, leur présence dans les organes où ils siègent de préférence, lorsque nous les examinerions in situ.

C'est à cette étude qu'est destiné ce second chapitre.

Pour nous rapprocher le plus possible des conditions qui se trouvent réalisées dans les végétaux, nous avons employé la méthode suivante : Une parcelle du corps à étudier (caféine ou acide cafétannique) est placée sur la lame porte-objet. On dépose ensuite sur la parcelle une goutte du réactif approprié. Mais, vu la faible quantité du corps étudié, cette goutte doit être aussi très petite, si l’on veut percevoir nettement la réaction.

La préparation ainsi obtenue est placée sur la platine du microscope sans avoir été, au préalable, recouverte de la lamelle couvre-objet. Gette dernière condition est indispensable si l’on veut observer les phénomènes qui accompagnent l'évaporation de . de la liqueur, la structure, la couleur du résidu, caractères qu'il est important de noter.

Je —

Etude microchimique de la caféine.

Quel que soit le corps oxydant employé, la réaction de la murexide ne peut jamais être obtenue, avec la minime quantité de caféine contenue dans une coupe d’un organe quelconque.

C'est donc à d’autres réactions qu'il faut s'adresser, pour la caractériser microchimiquement.

Nous décrivons plus bas quelques-unes des réactions que nous avons étudiées.

lodure de potassium iodé.— Une goutte d'acide chlorhydrique est déposée sur la lame porte-objet. On y laisse tomber quelques parcelles de caféine, qui se dissolvent immédiatement ; si on ajoute alors une goutte de réactif, il se produit un précipité rouge qui, après évaporation, se prend en belles aiguilles.

Ferricyanure de potassium. — Ce réactif qui, à notre connaissance du moins, n’avait jamais été employé pour déceler la caféine, donne, avec une solution chlorhydrique de celle-ci et, après évaporation, des aiguilles bleues. Dans cette combinaison, le prussiate rouge est réduit et fournit un précipité de bleu de Prusse au contact du chlorure ferrique.

Molybdate d'ammoniaque. — Nous nous sommes ser vi du réactif de Gardiner‘,solution saturée de molybdate d'ammoniaque, dans le chlorhydrate d'ammoniaque (par abrév.:chloro-molybdate d'ammoniaque). Ce réactif présente l'avantage de contenir plus de molybdate d’'ammoniaque qu'une simple solution aqueuse. Le molybdate étant très peu soluble dans l’eau, se dissout ici à la faveur du chlorhydrate.

Il donne un précipité blanc amorphe dans la solution chlorhy-

1 GawDinER ; Proceed. of Dambridge philos. Society. 4, S:, tom. VI, pag. 387.

oh

drique de caféine. Ce précipité se redissout à chaud. Si l'on évapore à siccité, il cristallise alors et se dépose, sous forme de cristaux aciculaires disposés en séries parallèles, la masse cris- (alline ainsi obtenue se colore en bleu sur les bords, au bout d'un certain temps, indice de la réduction de l'acide molybdique.

Toutefois le précipité se forme mieux, si l’on verse d’abord le réactif sur la caféine, et, si on n’ajoute l'acide chlorhydrique qu’en dernier lieu. Remplace-t-on comme dissolvant, l'acide chlorhydrique par l'acide sulfurique, le précipité s'obtient moins facilement à froid. À chaud, il cristallise de la même façon, et donne la même coloration bleue. Signalons enfin que l’ammoniaque liquide où gazeuse fait perdre cette coloration aux cristaux, qui restent comme résidu de l’évaporation. Elle réapparaît toutefois par l’action de la chaleur.

T'ungstate de soude. — Nous avons employé le tungstate de soude, en solution saturée dans l’acétate de soude, qui le dissout facilement. Ce réactif produit instantanément, sur une solution de caféine dans l'acide chlorhydrique, un précipité blanc cailleboté très abondant. Ce précipité vire immédiatement au jaune par la chaleur ou, au bout de quelque temps, par le simple contact de l'air.

Vanadate d'ammoniaque. — Voici comment nous préparons ce réactif :

Vanadate d'ammoniaque....... 08,50 Eau distilléérss. 14.1, 4, NO PForatr

Faire dissoudre à chaud.

C’est comme toujours sur une solution chlorhydrique de caféine,

que nous l’avons étudié. Une goutte ne produit dans cette solution qu'un trouble léger et.à peine visible. En laissant évaporer

à chaud ou à froind, on obtient un résidu d’un beau rouge. Si

on expose ce.résidu à l'air pendant vingt-quatre heures environ,

RO TES il passe du rouge à la coloration jaune-verdatre, qu’on obtient par la simple évaporation à l'air, d’une solution chlorhydrique de vanadate d’ammoniaque.

Ge sel n’agit donc ici que comme oxydant. Sans donner de précipité au préalable, il est réduit par la caféine, à la facon du molybdate d'ammoniaque. Ce qui le prouve, c'est qu’il reprend ses propriétés physiques au contact de l'oxygène de l'air.

Ge réactif d’une grande sensibilité permet de caractériser, sous le microscope, des traces de la caféine.

Acide phosphomolybdique. — Nous faisons une solution avec: Acide phosphomolybdique...... o& | gram.