LA E D
virus myxomateux. Ils utilisent comme source de virus du tissu myxomateux. Ce tissu est broyé, additionné à 50 % de solution de RINGER, puis centrifugé. On recueille le liquide qui surnage, puis, toujours,selon les auteurs, on y plonge pendant 15 minutes des fragments de testicule de lapin, fragments qui sont placés ensuite dans une goutte de plasma et d'extrait de rate de lapin. Les passages du virus sur les fragments de testicule ont lieu toutes les semaines. Les auteurs ont ainsi pu réaliser trente passages et ont constaté que la virulence du virus, non seulement se maintenait mais avait tendance à s’exalter. En effet, la durée de l’incubation, à la suite de l’inoculation d’un tel virus de culture passait en moyenne de 11 à 6 jours.
Ces mêmes auteurs ont utilisé également des milieux de culture à base de poumon, de rate, de foie, milieux qui leur ont donné, utilisés seuls, des résultats beaucoup moins satisfaisants. En revanche, un excellent milieu de culture est constitué par l'association testicule-poumon.
BENJAMIN et Rivers [12], puis Prorz [99], ont cultivé le même virus dans un mélange de liquide de Tyrode et de sérum de lapin, renfermant des cellules en suspension. Ils ajoutent 0,5 em’ de virus à 2 cm‘ de mélange, le tout étant placé dans un flacon de CaRREL. Les auteurs signalent que 20 repiquages ont été réalisés, avec toujours une augmentation de la virulence. Au Le repiquage, PLoTz a noté une activité encore nette du virus à la dilution 4.10.
‘b) Ovoculture : C’est Lusx [84] le premier qui décrivit la eulture du virus du myxome sur la chorio-allantoide d’embryon de poulet. Les membranes inoculées à une dilution convenable ont présenté des lésions discrètes, mais au maximum de netteté dès le premier passage.
Ces lésions apparaissent, après trois jours d’incubation, en zones blanchâtres, opaques, surélevées, mesurant de 0,5 à 1 mm. dé diamètre, à bords plutôt irréguliers. Une dilution de 20 % de membranes confluentes prélevées après trois jours produisait habituellement 3 à 10 lésions lorsqu'elle était inoculée au taux de 10-. Par contre les membranes prélevées après 5 à 6 jours ne contenaient plus qu'environ 5 à 10 % de cette quantité. Les embryons incubés pendant six jours après l’inoculation étaient parfaitement sains. La forme ét l’abondance des lésions sur la membrane sont influencées par la dose infectante et par la tem-
La
. pérature de l'embryon avant et après l’inoculation; cette température serait optima, pour THoMpson et COoATES [135] entre 33 et 35°. L'auteur n’a pas observé de perte de virulence du virus pour le lapin après 26 passages sur œuf. Notons que Lusx a montré que pour déceler les quantités minimes de virus, le lapin est plus sensible que la membrane chorio-allantoïdienne. D’ailleurs limmun-sérum spécifique neutralise moins bien l’infection du virus sur chorio-allantoïde que sur lapin.
Vers la même époque H4aGEx et Du. D. HsinG [37] rapportent qu'après 20 passages sur œuf de poule il y a une perte du pouvoir léthal du virus pour le lapin et, au contraire une augmentation du pouvoir pathogène pour l'embryon. Leurs conclusions sont donc nettement opposées à celles de Lusx.
C’est alors que HoFFSTADT et PILCHER [40-41-42] reprenant l'étude de l’ovoculture du virus myxomateux notent que celui-ci produit une modification de la chorio-allantoïde quand il y est inoculé. Ces modifications sont comparables à celles produites par d’autres ultra-virus.
Dans ce cas particulier elles apparaissent comme des granulations situées dans le cytoplasme ecto, meso et endodermique de la membrane. Ces corpuscules sont identiques à ceux qu’ont isolés des tissus myxomateux, RIVERS, WARD, PILCHER, VAN RooYEN, etc., et constituent des éléments viriens purs. HOFFSTADT et PILCHER concluent que le virus peut cultiver et se multiplier en maintenant sa virulence, pendant 32 passages.
Un peu plus tard, en 1939 [42] ces mêmes auteurs montrent qu'après de nombreux passages le virus infectait bien l'embryon de poulet comme l’indiquent les modifications pathologiques. Enfin, en 1942, rejoignant l’observation de Lusx, qui signalait que l’immun sérum neutralisait moins bien le virus de la chorio allantoïde, HOFFSTADT et PILCHER après de nombreuses expériences affirment que le virus qui cultive sur embryon de poulet n’est pas totalement identique, du point de vue antigénique au virus des lésions cutanées.
HoFFSTADT, OMUNDSON et DonaALpson [44] ont tenté avec succès la culture du virus sur chorio-allantoïde de l'embryon de canard. Ils réussirent 20 passages en série, et ont établi que l’âge optimum de l’embfyon était de douze jours (neuf chez les poussins) et les conditions optima de culture de 30 heures à 22° suivies de 24 heures à 35°. D’après eux donc, l'embryon de