ROLE DES SUCRES DANS LA RÉACTION

Divers auteurs ont préconisé les uns l’addition de elucose, les autres celle de lactose, d’autres enfin l’absence de sucre dans le but de favoriser la réaction du rouge neutre. Ils ont obtenu ainsi des résultats contradictoires.

Guerbet (19) s’est préoccupé de cette question et a fait quelques expériences en aérobie et en anaérobie d’où il résulte que l’acidité des cultures, c’est-à-dire la présence de sucres fermentescibles, est nuisible à la réaction en aérobie (voir mécanisme de la réaction, chap. V).

La présence des sucres, si elle permet de surprendre la formation des gaz dans les cultures, gêne considérablement le virage du milieu au jaune canari avec fluorescence verte.

Il est facile de le comprendre depuis que le mécanisme de la réaction du rouge neutre est connu: le virage et la fluorescence sont dus à un phénomène de réduction en milieu alcalin. Or, la fermentation des sucres aboutit à la production d’acides, le virage sera

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donc forcément gêné s’il n’est pas totalement empêché. On risquera donc d’avoir des résultats négatifs alors que l’eau renferme du colibacille.

Pour vérifier le fait, nous avons pratiqué avec M. le D' Rocxaix une série de recherches du colibacille dans l’eau comparativement au milieu du neutral-rot sucré (glycose ou lactose) et en milieu non sucré (tableau [).

Le tableau I, p. 42, nous montre que le bouillon au neutral-rot, glycosé ou lactosé, est souvent en défaut, alors que les bouillons non sucrés décèlent de façon constante la présence du colibacille.

Si nous faisons abstraction des n° 12, 14 et 21, où nous n’avons pas isolé de colibacille typique, nous trouvons que sur 43 échantillons d’eau, renfermant du colibacille, 27 fois seulement, c’est-à-dire dans la proportion de 62, 79 p. 100, le bouillon au neutral-rot sucré a donné la réaction positive, alors que le bouillon non sucré ne fut pas une seule fois en défaut. Les milieux phéniqués (milieux de Vincent) donnèrent une fois (eau n° 18) une réaction négative alors que l’eau renfermait du colibacille.

D'autre part, le virage en bouillon au neutral-rot sucré est fugace; il apparait pendant quelques heures et disparaît. Il est souvent incomplet et se réduit à la fluorescence sans production de la coloration Jaune canari. Le virage en bouillon au neutral-rot sucré est au contraire persistant ; il n’exige pas une surveillance de tous les instants pour surprendre le moment du virage. Cette différence s'explique très bien par le mécanisme de la réaction,

Tableau !

BOUILLON BOUILLON mueux | ISOLEMENT ECHANTILLON au au Te et identification Genaun 3 neutral-rot neutral-rot ha du d'eau sucrè non sucré (de Vincent) colibacille 1 Eau n° : | —+ + + — 2 = 3e un Sn = 3 : = + de Qi — 4i — + + :

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1 Ont été considérés comme colibacilles, les bacilles ayant présenté les ca” ractères suivants : colonies rouges sur milieu d'endo-mobilés, ne prenant pas le grain, faisant coaguler le lait, virer au rouge le bouillon lactosé, tournesolé ne liquéfiant pas la gélatine, donnant de l'endol (procédé de Salkowsky).

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On peut, par contre, se demander si le milieu non sucré n’est pas trop sensible et si le rouge neutre, dans ce cas, ne se laisse pas trop facilement influencer par des microbes réducteurs autres que le colibacille. L’échantillon d’eau n° 12 en effet a donné une réaction positive, alors que nous n’avons pu isoler de colibacille de l’eau. Pour répondre à cette question nous avons ensemencé en bouillon au neutral-rot non sucré un grand nombre de microbes; seuls, des microbes de la fermentation ammoniacale, les paratyphiques Aertryck, Kurth, Para-B. (Rennes), Para-B. (Lyon), Conrad, Schootmiüller, nous ont donné le virage complet. Le Bacillus subtilis, le Mesentericus vulgatus, le Mesentericus niger ont produit, dans les vingtquatre heures, un peu de fluorescence. Les autres microbes, pathogènes ou saprophytes, ensemencés (environ une soixantaine) n’ont donné ni fluorescence, ni virage au jaune canari.

Pourquoi certaines eaux colibacillifères font-elles virer le neutral-rot 2lycosé ou lactosé, alors que d’autres restent sans effet et ne font virer que le bouillon au neutral-rot non sucré ?

Nous avons isolé des cultures en bouillon au neutral-rot sucré, un certain nombre de races de colibacilles dont nous avons étudié la fonction acidogène.

De l’échantillon n°7, nous avons isolé cinq races de coli, pour les soumettre à cette étude (tableau IT).

== Mn.

Tableau Il RACES BOUILLON BOUILLON BOUILLON de au neutral-rot au neutral-rot tournesolé- LAIT OBSERVATIOMS colibacilles glycosé non sucré lacté Coli À — + Je e Résultats Coli B |Virage complet ue == au bout au jaune canari de 48h avec fluorescence. Coli G | Fluorescence. + 4e Pas de virage au jaune canari.

Coli D |Légère fluores- + de ce cence. Pas de virageau jaune canari.

Coli E — CT AE es

Nous avons isolé de l’eau n° 19 deux races de colibacilles (tableau IT) :

Tableau III

RACES BOUILLON BOUILLON BOUILLON de au neutral-r0t au neutral-rot | tournesolé- LAIT OBSERVATIONS Colibacilles glycosé non sucré lactosé Coli A — se ne de Coli B — . 2 Coagulation non complète

De l’eau n° 35 nous avons isolé huit races de coli (tableau IV) :

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Tableau IV RACES [l BOUILLON BOUILLON BOUILLON OBSERde au neutral-rot au neutral-rot lactosé LAIT colibacillee glycosé non sucré tournesolé VATIONS Coli À | Fluorescence. Do cu as Pas de virage au jaune canari.

Coli B Id. + 2e 4e Coli C |Légère fluores- + A Coagulation cence. Pas de incomplète virage aujaune canari. Coli D Id. + + Id.

Coli E Id. ia ie ee Coli F Id. 25 2e EE Coli G Fluorescence + + — Pas de virage au jaune canari. |

Les tableaux II, II et [IV montrent d’une façon très nette que les colibacilles à fonction acidogène très accusée (coli À et E du tableau IL, A et B du tableau III, A et B du tableau IV) ne font pas virer, ou seulement d’une façon très incomplète, le bouillon au neutral-rot sucré. Par contre, les colibacilles à fonction acidogène faible (coli D du tableau Il; E et F du tableau IV) ou nulle (coli B du tableau Il) font virer les bouillons sucrés.

Les bouillons au neutral-rot, non sucrés, ont viré dans tous les cas et ne sont pas influencés par la fonc tion acidogène des bacilles.

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Si donc les eaux n° 7 (tableau IT) et n° 35 (tableau IV) ont donné un résultat positif dans la recherche directe du colibacille dans l’eau (tableau I), c’est qu’elles renfermaient des colibacilles à fonction acidogène faible ou à peu près nulle: seules ces races colibacillaires ont été décelées ; les races de colibacilles à fonction acidogène accusée,renfermées également dans ceseaux, n’ont pas été décelées par le bouillon au neutral rot sucré.

IUERBET (19) a montré qu’en présence du glycose, l'apparition de l’acidité est retardée par l’anaérobiose. On pourra donc, dans ce cas, utiliser comme élément de diagnostic la fermentation des sucres et le virage. De cette façon seulement, on pourra obtenir, à peu près certainement, le virage en même temps que la production de gaz. Mais si l’on pratique les cultures en aérobiose, ilest de toute nécessité de supprimer les sucres, qui gènent ou empêchent le virage.

En somme, pour nous résumer, nous pouvons dire que :

1° La présence des sucres (glycose ou lactose) dans le bouillon de Savage gêne ou empêche le virage du bouillon au neutral-rot ou jaune canari avec fluorescence, lorsque l’eau ensemencée dans ce bouillon contient du colibacille.

2° L'apparition ou l’absence de virage dans le

ee bouillon au neutral-rot est fonction de l'aptitude plus ou moins grande des colibacilles ensemencés, à attaquer les sucres et à produire des acides. Les races cohbacillaires, produisant une forte proportion d'acide, empêchent le virage.

3° Pour les cultures aérobies, 11 vaut mieux supprimer les sucres et se contenter, comme élément de diaenostic, du virage au jaune canari avec fluorescence, qui dans ce cas sera complet et persistant. Si l’on veut toutefois utiliser les deux éléments de diagnostic (production de gaz par fermentation des sucres et virage au jaune canari avec fluorescence) il faut faire la culture en anaérobiose.

C'est ce point que nous allons maintenant étudier.

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