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Pour rechercher le spectre de l’'hémochromogène dans une urine présumée hématurique, la méthode la plus simple consiste à alcaliniser celle-ci (5 à 6 em?) par quelques gouttes de lessive de soude, Il se forme à chaud un précipité de phosphates terreux, qui comme nous l’avons dit plus haut, entraine l’hémaline.
La réduction en hémochromogène peut avoir lieu spontanément sous l’action réductrice de certains constiluants de l’urine, mais on peut la faciliter en ajoutant quelques gouttes d’une solution d’hydrosulfite de soude dans l’ammoniaque.
Le spectre de l’hémochromogène sera caractérisé en regardant au spectroscope la liqueur surnageante. Il présente deux bandes : une dans le jaune vert entre D et E, très nette et très foncée, l’autre plus pâle, plus estompée, dont le milieu coïncide sensiblement avec la raie E.
On peut encore traiter l’urine par son volume de réactif hydrazinique de Riegler : dans le cas d’hématurie on.verra se développer une coloration rouge pourpre plus ou moins accusée et à lexamen microscopique on observera le spectre de l’hémochromogène.
Bloem a recherché la sensibilité de la méthode spectroscopique pour la détection des pigments sanguins. En solution aqueuse, le spectroscope permet de déceler 2 mmg 9 d’hémochromogène dans 100 ce. de solvant, alors qu’on doit avoir au moins 5 mmg d’oxyhémoglobine dans 100 cc. pour retrouver un spectre d'intensité comparable.
Dans l'urine les résultats sont beaucoup moins nets. Le spectre d'absorption de l’oxyhémoglobine ne peut être décelé que pour une concentration minima de {1 mmg d'Hémoglobine dans 100 ce. d’urine, et le spectre de l’hémochromogène à partir de 8 mmg.
On peut encore, en traitant l’hématine par un acide fort, libérer l’hématoporphyrine que l’on caractérisera par
son spectre d'absorption ou par son spectre de fluorescence. Le spectre d'absorption est caractérisé par deux bandes, l’une foncée entre C et D, l’autre plus large au milieu de l’espace entre D et E. L’hématoporphyrine possède une belle fluorescence rouge, et peut donner avec certains métaux (Pt, Zn, Sn, Cd) des complexes métalliques également fluorescents. ;
Le spectre de fluorescence de son complexe stanneux est un procédé de choix pour l'identification des taches de sang (Bierry et Gouzon). On peut l’utiliser pour la recherche du sang dans l'urine, en déféquant celle-ci par le réactif acéto-picrique. Le précipité formé, qui a entrainé l’hématine, est traité par une solution chlorhydrique de chlorure stanneux. Après une ou deux minutes d’ébullition, on tamponne le milieu par addition d’acétate de soude, ce qui favorise la formation du complexe stanneux. Celui-ci présente une fluorescence orangée qui est la résultante de deux bandes, l’une rouge et l’autre jaune dont les maxima correspondent respectivement à 5820 et 6315 A°. | |
I ne faut pas oublier qu’il y a des porphyrinuries pathologiques, et que des porphyrines naturelles peuvent exister à l’état de traces dans l’urine humaine normale.
