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Sa composition est la suivante:

Autolysat de levure ............. 8 cc.

Extrait de viande .:............. 2 er.

Giuicove nl. ee die ET ee 5 gr.

LACTOS CNE RARE RS RARE RE 3 gr.

Saéchañose 14.4 sci te CUEETS 2 gr.

GE las RTE SN LA ARE 20 gr. Eau ordinaire qs-p. ............. 1000 cc.

Ajuster à pH 7.

Stériliser à l’autoclave à 115° pendant 15 minutes ou tyndalliser trois jours de suite.

Préparation de l’Autolysat de levure:

Peser 200 gr. de Levure de boulanger. Laver et diviser dans un litre d’eau ordinaire. Laisser décanter. Faire une dizaine de lavages.

Introduire dans un flacon fermé au moyen d’un bouchon de caoutchouc percé d’un tube en verre portant un petit tuyau en caoutchouc muni d’une pince de Moor. Ce dispositif sert de soupape de sûreté. Attacher le bouchon avec un fil de fer.

Placer à l’étuve à 37° jusqu’à liquéfaction. Laisser échapper de temps en temps le gaz carbonique dégagé. Centrifuger. Prendre la partie liquide, de couleur brun-noir, pour l’emploi.

Conserver sous une couche de 3 cm. de Toluène. Remarque:

Lors de la mise à l’étuve, il est prudent d’entourer le flacon d’un linge, afin de limiter les dégâts au cas où une trop forte pression de gaz carbonique ferait exploser le récipient.

Le milieu définitif à l’Autolysat de levure sera réparti dans des tubes à essai à raison de 5 à 10 cc. par tube et de 50 cc. dans des flacons d'ERLENMEYER de 100 ec. Boucher au coton. Stériliser 15 minutes à 115°. Laisser les tubes se solidifier en position inclinée.

Ensemencer un tube à essai à l’aide d’une colonie de B. subtilis. Disposer à 37° pendant 24 heures. On obtient une colonie luxuriante.

Emulsionner cette culture dans quelques centimètres cubes de Sérum physiologique stérile. A l’aide de cette émulsion, ensemencer un milieu précédemment préparé dans un flacon d'ERLENMEYER et préalablement liquéfié au bainmarie à 100° et maintenu à 40-45° jusqu’à équilibre thermique. j

Introduire à l’aide d’une pipette PASTEUR 1 cc. environ bouchés au coton et stériles, en s’efforçant de ne pas mettre de milieu ensemencé dans des tubes à hémolyse calibrés,