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de milieu sur la paroi intérieure des tubes. Pour cela il faut introduire la pipette de PASTEUR au fond des tubes.

Ces tubes ensemencés peuvent être placés à la glacière et conservés durant des semaines avant leur utilisation.

Dosage proprement dit:

| Préparer des solutions de Pénicilline-étalon et de Péni-

cilline à examiner. Sachant que l’unité internationale de Pénicilline correspond à 0,6 ; de Pénicilline G cristallisée, faire 8 dilutions de Pénicilline-étalon allant de 0,25 U.I. à 2. U.L. par cc., comme il est indiqué dans le tableau suivant (Tableau N° 1). Faire également 8 dilutions de Pénicilline à examiner en la supposant sensiblement identique à la Pénicilline-étalon.

Retirer 18 tubes ensemencés de la glacière et les placer 15 à 18 heures à l’étuve à 37°. Nous avons constaté au cours de nos expériences, comme nous l’exprimons ci-dessous, que ce laps de temps est grandement suffisant pour assurer une culture luxuriante. Il ne faut pas perdre de vue non plus que le colorant employé à la fin du dosage, pour qu’il devienne rouge, doit se trouver en présence de cellules en prolifération. Il est indispensable de se placer dans des conditions telles que la culture ait suffisamment poussé sans pour cela que la croissance soit arrêtée.

Le temps de culture pour lequel la prolifération du B. subtilis est maxima a été déterminé de la façon suivante:

Nous préparons une gamme de tubes ensemencés que nous disposons à l’étuve à 37°. Toutes les trois heures et dans chaque tube successif nous ajoutons une goutte de solution de Colorant vital à 1%. Nous obtenons des teintes allant du rose au rouge suivant l’intensité de la prolifération. Nous faisons une gamme colorée identique à l’aide de solutions de rouge neutre que nous mesurons au photomètre. Nous en notons les résultats dans le tableau N° 2 et nous donnons la courbe correspondante (courbe N° 1) en portant le temps en ordonnées et les déviations photométriques en abscisses. L’intensité de coloration étant maxima au bout de 18 heures, il convient donc, pour les raisons énoncées plus haut, de disposer les tubes ensemencés pendant 15 à 18 heures à l’étuve à 37° avant d’ajouter les solutions d’Antibiotiques.

Nos essais ont également porté sur la culture du Staphylocoque doré. Pour ce germe, la prolifération maxima a lieu après un séjour de 24 heures à l’étuve (Tableau N° 2 et courbe N° 2). La poussée est beaucoup plus lente que celle du B. subtilis. Cette différence s’exagère encore si l’on considère le Bacille de Timothée (Tableau N° 2 et courbe N° 3),

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